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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
45354 鹽酸吡哌酯標準品 Piperidolate Hydrochloride 200mg 129-77-1
45355 *乙酸酯標準品 Pirbuterol Acetate (AS) 200mg 65652-44-0
45356 吡羅克酮乙醇銨標準品 Piroctone Olamine 200mg 68890-66-4
45357 吡羅克酮相關物質A標準品 Piroctone Related Compound A 15mg
45358 吡羅克酮相關物質B標準品 Piroctone Related Compound B 25mg 50650-75-4
45359 *標準品 Piroxicam 200mg 36322-90-4
45360 普卡霉素標準品 Plicamycin 50mg 18378-89-7
45361 聚克利樹脂標準品 Polacrilex Resin 100mg
45362 波拉克林鉀標準品 Polacrilin Potassium 200mg 65405-55-2
45363 泊洛沙姆標準品 Poloxalene 500mg 9003/11/6
45364 泊洛沙姆液標準品 Poloxamer Liquid 1ml 9003/11/6
45365 泊洛沙姆固體標準品 Poloxamer Solid 1g 9003/11/6
45366 聚葡萄糖標準品 Polydextrose 200mg 68424-04-4
45367 聚二甲基硅氧烷標準品 Polydimethylsiloxane 500mg 9016-00-6
45368 聚乙二醇200標準品 Polyethylene Glycol 200 1g 25322-68-3
45369 聚乙二醇300標準品 Polyethylene Glycol 300 1g 25322-68-3
45370 聚乙二醇400標準品 Polyethylene Glycol 400 1g 25322-68-3
45371 聚乙二醇600標準品 Polyethylene Glycol 600 1g 25322-68-3
45372 聚乙二醇1000標準品 Polyethylene Glycol 1000 1g 25322-68-3
45373 聚乙二醇1500標準品 Polyethylene Glycol 1500 1g 25322-68-3
45374 聚乙二醇3000標準品 Polyethylene Glycol 3000 1g 25322-68-3
45375 聚乙二醇3350標準品 Polyethylene Glycol 3350 1g 25322-68-3
45376 聚乙二醇4000標準品 Polyethylene Glycol 4000 1g 25322-68-3
45377 聚乙二醇6000標準品 Polyethylene Glycol 6000 1g 25322-68-3
45378 聚乙二醇8000標準品 Polyethylene Glycol 8000 1g 25322-68-3
45379 聚乙二醇10000標準品 Polyethylene Glycol 10000 1g 25322-68-3
45380 聚乙二醇12000標準品 Polyethylene Glycol 12000 1g 25322-68-3
45381 聚乙二醇20000標準品 Polyethylene Glycol 20000 1g 25322-68-3
45382 聚乙二醇35000標準品 Polyethylene Glycol 35000 1g 25322-68-3
45383 高密度聚乙烯標準品 High Density Polyethylene 3 strips 9002-88-4
45384 低密度聚乙烯標準品 Low-Density Polyethylene 3 strips 9002-88-4
45385 聚氧化乙烯標準品 Polyethylene Oxide 100mg 25322-68-3
45386 聚對苯二甲酸乙二酯標準品 3 strips 25038-59-9
45387 聚對苯二甲酸乙二酯G標準品 3 strips 25640-14-6
45388 聚甘油-3 二異硬脂酸酯標準品 Polyglyceryl 3 Diisostearate 1ml 63705-03-3
45389 聚異丁烯標準品 Polyisobutylene 1g 9003-27-4
45390 聚乙二醇15羥基硬脂酸標準品 Polyoxyl 15 Hydroxystearate 500mg 70142-34-6
45391 聚氧乙烯硬脂酸酯2標準品 Polyoxyl 2 Stearyl Ether (AS) 1g 9005-00-9
45392 聚氧乙烯硬脂酸酯20標準品 Polyoxyl 20 Stearyl Ether (AS) 1g 9005-00-9
45393 硬脂酸聚乙二醇50標準品 Polyoxyl 50 Stearate 200mg 9004-99-3
45394 硬脂酸聚乙二醇40標準品 Polyoxyl 40 Stearate 200mg 9004-99-3
45395 聚*酯20標準品 Polysorbate 20 2g 9005-64-5
45396 聚*酯40標準品 Polysorbate 40 (AS) 2g 9005-66-7
45397 聚*酯60標準品 Polysorbate 60 (AS) 2g 9005-67-8
45398 聚*酯80標準品 Polysorbate 80 2g 9005-65-6
45399 聚乙酸乙烯酯標準品人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒 Polyvinyl Acetate 1g 9003-20-7
45400 聚乙烯乙酸酯分散體標準品 Polyvinyl Acetate Dispersion 1g 9003-20-7
45401 *標準品 Polyvinyl Alcohol 100mg 9002-89-5
45402 苯甲酸鉀標準品 Potassium Benzoate (AS) 1g 582-25-2
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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