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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-03-14 13:15:36瀏覽次數(shù):142次
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人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
45611 羅匹尼羅相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 221264-21-7
45612 *標(biāo)準(zhǔn)品 Ropivacaine 200mg 84057-95-4
45613 鹽酸*對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品 Ropivacaine Hydrochloride 200mg 132112-35-7
45614 鹽酸*有關(guān)物質(zhì)A對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 21436-98-6
45615 鹽酸*有關(guān)物質(zhì)B對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 112773-90-7
45616 洛克沙砷標(biāo)準(zhǔn)品 Roxarsone 200mg 121-19-7
45617 盧非酰胺標(biāo)準(zhǔn)品 Rufinamide ea 106308-44-5
45618 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品 Rutin 100mg 250249-75-3
45619 糖精標(biāo)準(zhǔn)品 Saccharin 200mg 1981/7/2
45620 糖精鈣標(biāo)準(zhǔn)品 Saccharin Calcium 100mg 6381-91-5
45621 糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Saccharin Sodium 100mg 6155-57-3
45622 貫葉連翹提取物標(biāo)準(zhǔn)品 600mg 84082-80-4
45623 2-羥基芐胺標(biāo)準(zhǔn)品 Salicylamide 200mg 65-45-2
45624 水楊酸標(biāo)準(zhǔn)品 Salicylic Acid 125mg 69-72-7
45625 水楊酸相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 100mg 9-96-7
45626 水楊酸相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 100mg 636-46-4
45627 水楊酸片標(biāo)準(zhǔn)品 30tables 69-72-7
45628 昔美酸沙美特羅標(biāo)準(zhǔn)品 Salmeterol Xinafoate 150mg 94749-08-3
45629 沙美特羅相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
45630 沙美特羅相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Salmeterol Related Compound B 10mg 108928-81-0
45631 雙水楊酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Salsalate 150mg 552-94-3
45632 甲磺酸沙奎拉韋標(biāo)準(zhǔn)品 Saquinavir Mesylate 200mg 149845-06-7
45633 沙奎拉韋相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Saquinavir Related Compound A 25mg
45634 *標(biāo)準(zhǔn)品 Scopolamine Hydrobromide 250mg 6533-68-2
45635 東莨菪內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品 Scopoletin 20mg 92-61-5
45636 司可*標(biāo)準(zhǔn)品 Secobarbital CII 200mg 76-73-3
45637 *標(biāo)準(zhǔn)品 Selegiline Hydrochloride 200mg 14611-52-0
45638 L-硒代蛋氨酸標(biāo)準(zhǔn)品 Selenomethionine 100mg 3211-76-5
45639 番瀉苷標(biāo)準(zhǔn)品 Sennosides 500mg 517-43-1
45640 番瀉苷A標(biāo)準(zhǔn)品 Sennoside A 20mg 81-27-6
45641 番瀉苷B標(biāo)準(zhǔn)品 Sennoside B 20mg 128-57-4
45642 芝麻油標(biāo)準(zhǔn)品 Sesame Oil (AS) 1ml×2ampules 8008-74-0
45643 芝麻油相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 6mg×3vials 2190-21-8
45644 芝麻油相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 6mg×3vials 64550-34-1
45645 L-*標(biāo)準(zhǔn)品 L-Serine 200mg 56-45-1
45646 *外消旋混合物標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 79617-89-3
45647 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
45648 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sertraline Hydrochloride 100mg 79559-97-0
45649 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sevoflurane 1ml 28523-86-6
45650 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 0.2ml 58109-34-5
45651 *標(biāo)準(zhǔn)品 100mg
45652 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 0.2ml 13171-18-1
45653 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 0.2ml 920-66-1
45654 *銀標(biāo)準(zhǔn)品 Silver Sulfadiazine 200mg 22199-08-2
45655 N-乙酰神經(jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)品 N-Acetylneuraminic Acid 200mg 131-48-6
45656 *標(biāo)準(zhǔn)品人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒 Silybin 50mg 22888-70-6
45657 水飛薊寧標(biāo)準(zhǔn)品 Silydianin 20mg 29782-68-1
45658 二甲基硅油標(biāo)準(zhǔn)品 Simethicone 50g 8050-81-5
45659 西地那非雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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