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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-07 10:45:18瀏覽次數(shù):139次
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人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
45763 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 152628-02-9
45764 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 1026353-20-7
45765 *標(biāo)準(zhǔn)品 Terazosin Hydrochloride 200mg 70024-40-7
45766 特拉唑嗪相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
45767 特拉唑嗪相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
45768 特拉唑嗪相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
45769 *標(biāo)準(zhǔn)品 Terbinafine Hydrochloride 200mg 78628-80-5
45770 特布他林相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Terbutaline Related Compound A 50mg
45771 *標(biāo)準(zhǔn)品 Temozolomide 200mg 85622-93-1
45772 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 24316-91-4
45773 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 13114-72-2
45774 泰諾福韋標(biāo)準(zhǔn)品 Tenofovir 15mg 206184-49-8
45775 泰諾福韋雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 ea
45776 泰諾福韋雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 4121-40-8
45777 泰諾福韋酯富馬酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Tenofovir Disoproxil Fumarate 200mg 202138-50-9
45778 曲康唑標(biāo)準(zhǔn)品 Terconazole 200mg 67915-31-5
45779 *標(biāo)準(zhǔn)品 Terfenadine 200mg 50679-08-8
45780 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Terfenadine Related Compound A 100mg 76815-60-6
45781 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Terfenadine Related Compound B 50mg
45782 萜品標(biāo)準(zhǔn)品 Terpin Hydrate 750mg 2451/1/6
45783 睪內(nèi)酯酮標(biāo)準(zhǔn)品 Testolactone CIII 125mg 968-93-4
45784 睪酮標(biāo)準(zhǔn)品 Testosterone CIII 125mg 58-22-0
45785 環(huán)戊*標(biāo)準(zhǔn)品 Testosterone Cypionate CIII 200mg 58-20-8
45786 庚酸睪酮標(biāo)準(zhǔn)品 Testosterone Enanthate CIII 200mg 315-37-7
45787 丙酸睪丸素標(biāo)準(zhǔn)品 Testosterone Propionate CIII 200mg 57-85-2
45788 *標(biāo)準(zhǔn)品 Tetracaine Hydrochloride 200mg 136-47-0
45789 *標(biāo)準(zhǔn)品 Tetracycline Hydrochloride 200mg 64-75-5
45790 鹽酸四氫唑啉標(biāo)準(zhǔn)品 Tetrahydrozoline Hydrochloride 200mg 522-48-5
45791 *標(biāo)準(zhǔn)品 Thalidomide 200mg 50-35-1
45792 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 58-55-9
45793 *熔點標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)品 500mg 58-55-9
45794 噻苯咪唑標(biāo)準(zhǔn)品 Thiabendazole 100mg 148-79-8
45795 鹽酸硫胺標(biāo)準(zhǔn)品 500mg 1967/3/8
45796 硫戊比妥標(biāo)準(zhǔn)品 Thiamylal CIII DISCONTINUED 200mg
45797 蘋果酸硫乙拉嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Thiethylperazine Malate 200mg 52239-63-1
45798 馬來酸乙?guī)€拉嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Thiethylperazine Maleate 200mg 1179-69-7
45799 硫柳汞鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Thimerosal 500mg 54-64-8
45800 硫*標(biāo)準(zhǔn)品 Thioguanine 200mg 154-42-7
45801 戊硫代巴比妥標(biāo)準(zhǔn)品 Thiopental CIII 250mg 76-75-5
45802 硫利達(dá)嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Thioridazine 200mg 50-52-2
45803 鹽酸硫利達(dá)嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Thioridazine Hydrochloride 200mg 130-61-0
45804 硫鏈絲菌素標(biāo)準(zhǔn)品 Thiostrepton 200mg 1393-48-2
45805 三亞乙基硫代磷酰胺標(biāo)準(zhǔn)品 Thiotepa 500mg 52-24-4
45806 替沃噻噸標(biāo)準(zhǔn)品 Thiothixene 250mg 3313-26-6
45807 (E)-替沃噻噸標(biāo)準(zhǔn)品 (E)-Thiothixene 100mg 3313-27-7
45808 通佐溴銨標(biāo)準(zhǔn)品 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒Thonzonium Bromide 200mg 553-08-2
45809 噻氯匹定相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Ticlopidine Related Compound A 20mg 68559-60-4
45810 噻氯匹定相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Ticlopidine Related Compound B 20mg 68559-55-7
45811 L-*標(biāo)準(zhǔn)品 L-Threonine 200mg 72-19-5
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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