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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
45813 噻加賓相關物質A標準品 Tiagabine Related Compound A 15mg
45814 鹽酸噻加賓外消旋混合物標準品 25mg
45815 鹽酸噻加賓標準品 Tiagabine Hydrochloride 300mg 145821-59-6
45816 延胡索酸泰妙菌素標準品 Tiamulin Fumarate 250mg 55297-96-6
45817 *鈉標準品 350mg
45818 泰妙菌素相關物質A標準品 50mg
45819 泰妙菌素標準品 Tiamulin 100mg 55297-95-5
45820 鹽酸替來他明標準品 Tiletamine Hydrochloride 200mg 14176-50-2
45821 *標準品 Tilmicosin 400mg 108050-54-0
45822 *標準品 Timolol Maleate 200mg 26921-17-5
45823 *標準品 Tioconazole 200mg 65899-73-2
45824 *相關物質A標準品 Tioconazole Related Compound A 25mg 61709-33-9
45825 *相關物質B標準品 25mg
45826 *相關物質C標準品 25mg
45827 *標準品 Tobramycin 350mg 32986-56-4
45828 *標準品 Tinidazole 200mg 19387-91-8
45829 *相關物質A標準品 100mg 696-23-1
45830 *相關物質B標準品 Tinidazole Related Compound B 20mg 25459-12-5
45831 鹽酸妥卡尼標準品 Tocainide Hydrochloride 125mg 35891-93-1
45832 *標準品 Titanium Dioxide (AS) 1g 13463-67-7
45833 DL-α-生育酚標準品 250mg 1959/2/9
45834 *醋酸酯標準品 250mg 7695-91-2
45835 * 琥珀酸酯標準品 250mg 4345/3/3
45836 *標準品 Tizanidine Hydrochloride 200mg 64461-82-1
45837 替扎尼定相關物質A標準品 50mg 30536-19-7
45838 替扎尼定相關物質B標準品 50mg 173532-15-5
45839 替扎尼定相關物質C標準品 50mg 5391-52-6
45840 妥拉磺脲標準品 Tolazamide 200mg 1156-19-0
45841 苯甲唑啉鹽酸鹽標準品 Tolazoline Hydrochloride 300mg 59-97-2
45842 *標準品 Tolbutamide 200mg 64-77-7
45843 托卡朋標準品 Tolcapone 200mg 134308-13-7
45844 托卡朋相關物質A標準品 Tolcapone Related Compound A 25mg
45845 托卡朋相關物質B標準品 Tolcapone Related Compound B 25mg 134612-80-9
45846 托美丁鈉標準品 Tolmetin Sodium 500mg 64490-92-2
45847 *標準品 Tolnaftate 200mg 2398-96-1
45848 鄰甲苯磺酰胺標準品 o-Toluenesulfonamide 200mg 88-19-7
45849 對甲苯磺酰胺標準品 p-Toluenesulfonamide 200mg 70-55-3
45850 番茄提取物含番茄紅素標準品 1g
45851 *標準品 Topiramate 150mg 97240-79-4
45852 *相關物質A標準品 25mg 20880-92-6
45853 *標準品 Torsemide 200mg 56211-40-6
45854 *相關物質A標準品 75mg 72811-73-5
45855 *相關物質B標準品 75mg 160972-33-8
45856 *相關物質C標準品 30mg 58155-35-4
45857 群多普利標準品 Trandolapril 125mg 87679-37-6
45858 群多普利相關物質C標準品人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒 25mg
45859 群多普利相關物質D標準品 25mg 149881-40-3
45860 *標準品 Tranexamic Acid 200mg 1197-18-8
45861 *相關物質C標準品 15mg 330838-52-3
45862 反鉑對照品標準品 Transplatin 25mg 14913-33-8
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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