人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)相關(guān)基因B(MICB)ELISA試劑盒科研
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
45981 *標(biāo)準(zhǔn)品 Vinpocetine 100mg 42971-09-5
45982 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 63-56-2
45983 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 4880-92-6
45984 *相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 57327-92-1
45985 *標(biāo)準(zhǔn)品 10ampules
45986 含量測(cè)定系統(tǒng)適用性用*標(biāo)準(zhǔn)品 1.5g
45987 牡荊素標(biāo)準(zhǔn)品 Vitexin 25mg 3681-93-4
45988 *標(biāo)準(zhǔn)品 Voriconazole 100mg 137234-62-9
45989 *雜質(zhì)A 10mg 182230-43-9
45990 *相關(guān)物質(zhì)B 10mg 137234-63-0
45991 *相關(guān)物質(zhì)C 10mg 86404-63-9
45992 *相關(guān)物質(zhì)D 10mg
45993 *相關(guān)物質(zhì)F 50mg 5872/8/2
45994 *標(biāo)準(zhǔn)品 Warfarin 200mg 81-81-2
45995 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 37209-23-7
45996 睡茄交酯 A標(biāo)準(zhǔn)品 Withanolide A 15mg 32911-62-9
45997 呫噸-9-羧酸標(biāo)準(zhǔn)品 Xanthanoic Acid 100mg 1982/7/5
45998 占噸酮標(biāo)準(zhǔn)品 Xanthone 100mg 90-47-1
45999 賽拉嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Xylazine 200mg 7361-61-7
46000 鹽酸甲苯噻嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Xylazine Hydrochloride 200mg 23076-35-9
46001 *標(biāo)準(zhǔn)品 Xylitol 1g 87-99-0
46002 *標(biāo)準(zhǔn)品 Xylometazoline Hydrochloride 125mg 1218-35-5
46003 木糖標(biāo)準(zhǔn)品 Xylose 1g 58-86-6
46004 鹽酸育亨賓標(biāo)準(zhǔn)品 Yohimbine Hydrochloride 200mg 65-19-0
46005 扎西他濱標(biāo)準(zhǔn)品 Zalcitabine 200mg 7481-89-2
46006 扎西他濱相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Zalcitabine Related Compound A 50mg 7481-88-1
46007 *標(biāo)準(zhǔn)品 Ziprasidone Hydrochloride 200mg 138982-67-9
46008 齊拉西酮相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 87691-88-1
46009 *雜質(zhì)B對(duì)照品 10mg標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
46010 齊拉西酮相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
46011 齊拉西酮相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
46012 *標(biāo)準(zhǔn)品 Zidovudine 400mg 30516-87-1
46013 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 25526-94-7
46014 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 100mg 65-71-4
46015 齊留通標(biāo)準(zhǔn)品 Zileuton 150mg 111406-87-2
46016 齊留通相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Zileuton Related Compound A 50mg
46017 齊留通相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Zileuton Related Compound B 50mg
46018 齊留通相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 Zileuton Related Compound C 50mg
46019 氧化鋅標(biāo)準(zhǔn)品 Zinc Oxide (AS) 2g 1314-13-2
46020 鹽酸唑拉西泮標(biāo)準(zhǔn)品 Zolazepam Hydrochloride 500mg 33754-49-3
46021 唑來(lái)瞵酸相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 22884-10-2
46022 *標(biāo)準(zhǔn)品 Zolpidem CIV 10mg 82626-48-0
46023 酒石酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Zolpidem Tartrate CIV 200mg 99294-93-6
46024 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒 15mg
46025 *標(biāo)準(zhǔn)品 Zonisamide 200mg 68291-97-4
46026 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Zonisamide Related Compound A 20mg 73101-64-1
46027 R-佐米曲坦異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 139264-24-7
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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