人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

46196 CA125  卵巢癌抗原  0.2mg
46197 CK19  細(xì)胞角蛋白19抗原  0.5mg
46198 CAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease)  Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶（抗原）  0.5mg
46199 MYOG  肌紅蛋白抗原  0.5mg
46200 Calponin 1  鈣調(diào)節(jié)蛋白-1（抗原）  0.5mg
46201 COMP  軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原  0.5mg
46202 Caspase-1 (ICE; CASP-1；P45)  天冬氨酸-*特異性蛋白酶家族（抗原）  0.5mg
46203 Caspase-3 (CPP32)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-3（抗原）  0.5mg
46204 Caspase-6 (NT)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6（抗原）  0.5mg
46205 Caspase-6 (CT)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6（抗原）  0.5mg
46206 phospho-AMPK alpha 1(Thr172) peptaide  磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗原  1mg
46207 Caspase-9  白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6（抗原）  0.5mg
46208 Caspase-9   白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6（抗原）  0.5mg
46209 AD7C-NTP/NTP/AF peptide   神經(jīng)絲蛋白蛋白多肽抗原（人）  0.5mg
46210 Caspase-10   半胱胺酸蛋白酶-10（抗原）  0.5mg
46211 Caspase-13   半胱胺酸蛋白酶蛋白-13（抗原）  0.5mg
46212 CD19(B-lymphocyte antigen CD19)  CD19  0.5mg
46213 Clenbuterol Hydrochloride/BSA  *偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA  1mg
46214 Clenbuterol Hydrochloride/KLH  *偶聯(lián)血藍(lán)蛋白KLH  1mg
46215 Estradiol/BSA  雌二醇偶聯(lián)牛血清白蛋白  1mg
46216 DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase)N terminal  雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原（N端）  0.5mg
46217 DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase)  雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原  0.5mg
46218 Ractopamine/BSA  萊克多巴胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物  1mg
46219 Ractopamine/KLH  萊克多巴胺與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物  1mg
46220 MMP9  基質(zhì)金屬蛋白酶9  0.5mg
46221 CD105/Endoglin  CD105蛋白  0.2mg
46222 Mycobacterium bovis   牛結(jié)核桿菌菌體蛋白  0.5mg
46223 AMH/MIS  Muellerian抑制因子抗原  1mg
46224 AEG-1 peptide  AEG-1抗原  0.5mg
46225 CD31 (PECAM-1)  血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1（抗原）  0.5mg
46226 ADFP/ADRP/adipophilin   脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗原  0.5mg
46227 Immunoglobuin binding protein-1(CD79A)IGBP-1  免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1  0.5mg
46228 CD133  造血干細(xì)胞抗原CD133  0.5mg
46229 CD133  造血干細(xì)胞抗原（多肽抗原）  0.5mg
46230 H5N1-H5  H5亞型全病毒  1mg
46231 Newcastle disease virus  雞新城疫疫苗（雞瘟4型混合病毒）  1ml
46232 SDF-1/CXCL12  基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1  0.5mg
46233 Bacillus anthraci  炭疽桿菌菌體蛋白  0.5mg
46234 ADCY1 peptide  腺苷酸環(huán)化酶1多肽抗原  0.5mg
46235 c-erbB-2蛋白  c-erbB-2蛋白（抗原）  0.5mg
46236 ChAT(Choline Acetyltransferase)  *乙酰轉(zhuǎn)移酶（抗原）  0.5mg
46237 HCLS1  造血干細(xì)胞特異性蛋白  0.5mg
46238 ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2)  毒蕈堿型乙酰*受體（抗原）  0.5mg
46239 C-Peptide( C-PEP )  C-肽（C肽）  0.5mg
46240 CR (Calretinin)  鈣結(jié)合蛋白（抗原）  0.5mg
46241 CRP (C-reactive protin)  C-反應(yīng)蛋白（抗原）  0.5mg
46242 ADORA3/A3AR(adenosine receptor A3)  腺苷受體A3抗原  0.5mg
46243 Integrin alpha V  巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子αV多肽  0.5mg
46244 phospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198) peptide  磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗原  1mg
46245 CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1)  環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白（抗原）  0.5mg
46246 phospho-CREB-1   磷酸化環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白（多肽）  0.1mg
46247 ADRA2 peptide  人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒腎上腺素能受體2抗原  0.5mg
46248 CRF (Corticotropin-Releasing Factor)  促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子  0.5mg
46249 CT (Calcitonin )  降鈣素（抗原）  0.5mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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