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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
46690 E2 tag E2 tag多肽抗原 0.5mg
46691 EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠質細胞*運載蛋白3抗原 0.5mg
46692 EBNA-3 (Epstein barr nuclear antigens 3) EB病毒編碼核蛋白-3 0.5mg
46693 ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 內皮素轉化酶1抗原 0.5mg
46694 ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2) 內皮素轉化酶2抗原 0.5mg
46695 ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒細胞陽離子蛋白抗原 0.5mg
46696 ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發育不良抗原 0.5mg
46697 rhEGF(rh-Epidermal growth factor) * 100ug
46698 EGF(Epidermal growth factor)rat 重組表皮生長因子抗原(大鼠) 0.5mg
46699 EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 類表皮生長因子域7抗原 0.5mg
46700 Egr-1(Early growth response 1) 早期反應基因-1/應急反應生長基因1抗原 0.5mg
46701 phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 磷酸化eIF-4E(Ser209)抗原 0.5mg
46702 ELK1 細胞轉錄因子ELK1抗原 0.5mg
46703 Elastin 彈性蛋白抗原 0.5mg
46704 ELAVL1/HuR peptide ELAVL1/HuR多肽抗原 0.5mg
46705 Emp1 (epithelial membrane protein 1) 表皮膜蛋白1抗原 0.5ml
46706 sFRP-4(Secreted frizzled-related protein 4; Frizzled protein, human endometrium) 抗子宮內膜抗原 0.5mg
46707 Endostatin 內皮抑素/內皮他丁抗原 0.5mg
46708 EpCAM(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮細胞粘附分子/表皮細胞粘附分子(多肽) 0.5mg
46709 EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮細胞粘附分子/表皮細胞粘附分子抗原 0.5mg
46710 E.coli O6 (Escherichia coli O6) E.coli O6大腸桿菌菌體蛋白 0.5mg
46711 EPEC/E.coli(enteropathogenic E.coli,EPEC) 普通大腸埃希菌菌體蛋白(非致病性) 1mg
46712 EphA1 R(Ephrin A1 Receptor) EphA1-R受體抗原 0.5mg
46713 EPOR peptide 紅細胞生成素受體抗原 0.5mg
46714 phospho-ERK1/MAPK-1/2(pThr183 + pTyr185) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗原 0.5mg
46715 ERK(Extracellular signal-regulated kinase) 絲裂原活化蛋白激酶抗原 0.5mg
46716 MAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK) 絲裂原活化蛋白激酶3抗原 0.5mg
46717 MAPK4(Mitogen-activated protein kinase 4) 絲裂原活化蛋白激酶4抗原 0.5mg
46718 ER- Alpha(phospho-Ser167)peptide 人磷酸化雌激素受體α多肽抗原 0.5mg
46719 ER- Alpha(phospho-Tyr537)peptide 磷酸化雌激素受體α抗原 0.5mg
46720 ER- Alpha /ER alpha peptide 雌激素受體α抗原 0.5mg
46721 ER- Alpha/ER alpha peptide 雌激素受體α抗原 0.5mg
46722 ER- Beta (Estrogen receptor-beta) peptide 雌激素受體β抗原 0.5mg
46723 ets1/E26 (E-twenty six 1) Ets轉錄因子家族ets1抗原 0.5mg
46724 EV71(Human enterovirus 71)VP1 腸道病毒71型/手足口病病毒抗原 0.5mg
46725 EV71(Human enterovirus 71)VP1(CT) 腸道病毒71型/手足口病病毒抗原(C端) 0.5mg
46726 ATEXPA10 peptide 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥)抗原 0.5mg
46727 Ezrin/Radixin 埃茲蛋白(多肽) 0.5mg
46728 F1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽) 0.5mg
46729 F1 operon positive regulatory protein(CT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(C端多肽) 0.5mg
46730 FABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結合蛋白抗原 0.5mg
46731 FADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡結構域相關蛋白抗原 0.5mg
46732 FAK(Focaladhesin kinase) 粘著斑激酶抗原 0.5mg
46733 phospho-FAK(pTyr577) 磷酸化粘著斑激酶抗原 0.5mg
46734 phospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase) 磷酸化粘著斑激酶抗原 0.5mg
46735 FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的絲/*激酶抗原 0.5mg
46736 FBN1 (fibrillin 1) 原纖維蛋白1抗原 0.5mg
46737 FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纖維母細胞生長因子4抗原 0.5mg
46738 FGF5 peptide 纖維母細胞生長因子5抗原 0.5mg
46739 Fibulin 1 衰老關鍵蛋白抗原 0.5mg
46740 FLG(filaggrin)peptide 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗原 0.5mg
46741 FOS B FosB抗原 人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒0.5mg
46742 FRA2/FOSL2(Fos related/like antigen 2) FOS樣抗原2 0.5mg
46743 FOXF1(Forkhead box protein F1) 叉頭蛋白F1抗原 0.5mg
46744 FOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原 0.5mg
46745 FoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T細胞轉錄因子)抗原 0.5mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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