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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀(guān)察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
46922 LN (laminin) 層粘連蛋白(多肽抗原) 0.5mg
46923 Laminin Beta1 peptide 層粘連蛋白β1抗原 0.5mg
46924 lamin A 核纖層蛋白A抗原 0.5mg
46925 LOX-1/OLR1 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體 0.5mg
46926 LPLUNC1 人鼻咽癌癌基因多肽抗原 0.5mg
46927 LYVE-1(lymphalic vessel endotheilial hyaluronan receptor 1) 淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗原 0.5mg
46928 ACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(抗原) 0.5mg
46929 Integrin alpha E2 peptide 整合素alpha E2抗原 0.5mg
46930 Mac-1 (Mac-1/CR3/CD11b+CD18) 巨噬細(xì)胞表面分子抗原 0.5mg
46931 Mafa(avian)(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A) v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗原 0.5mg
46932 MAGE-1 黑色素瘤相關(guān) 0.5mg
46933 MAPKK1 (MAP kinase kinase 1) 絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗原 0.5mg
46934 ASK1/MAPKKK5 細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶5抗原 0.5mg
46935 Maspin (mammary serine protease inhibitor) 抑癌基因抗原 0.5mg
46936 Matriptase 蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗原 0.5mg
46937 HCMV UL49(Human Cytomegalovirus UL49 Gene) 人巨細(xì)胞病毒UL49抗原 0.5mg
46938 MC-1R (melanocortin-1-receptor) 黑皮質(zhì)素-1受體抗原 0.5ml
46939 Mcl-1(myeloid cell leukemia 1) peptide 髓樣細(xì)胞白血病-1抗原 0.5mg
46940 MDM2 (urine double minute 2) 雙微體2癌基因抗原 0.5mg
46941 MDR1(multidrug resistance 1) 多藥耐藥蛋白抗原 0.5mg
46942 MEF2(myocyte enhancer-binding factor 2) 肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗原 0.5mg
46943 Mfn1 (Mitofusin1) 線(xiàn)粒體融合蛋白1 0.5mg
46944 MT(metallothionein) 金屬硫蛋白抗原 0.5mg
46945 MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor) 層粘連蛋白受體1抗體 0.5mg
46946 MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 層粘連蛋白受體1抗原(C端) 0.5mg
46947 MK(Midkine) 中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗原 0.5mg
46948 MLC/Myosin light chain 3 peptide 肌球蛋白輕鏈3抗原 0.5mg
46949 MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) 巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗原 0.5mg
46950 MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta) 巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗原 0.5mg
46951 CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta) CD122/白介素2受體β鏈抗原 0.5mg
46952 MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2) 巨噬細(xì)胞炎癥蛋白2抗原 0.5mg
46953 MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原 0.5mg
46954 MMP-20(matrix metalloproteinase 20) 基質(zhì)金屬蛋白酶20抗原 0.5mg
46955 MMP-17(Matrix metalloproteinase-17) 基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗原 0.5mg
46956 MMP-26(Matrix metalloproteinase-26) 基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗原 0.5mg
46957 MMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗原 0.5mg
46958 MMP-10(matrix metalloproteinase 10) 基質(zhì)金屬蛋白酶-10抗原 0.5mg
46959 MPO peptide 髓過(guò)氧化物酶抗原 0.5mg
46960 MRP2 (multidrug resistance-associated protein2) 多藥耐藥相關(guān)蛋白2 0.5mg
46961 MRP5/ABCC5(Multidrug Resistanec-Associated Protein 5) 多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原 0.5mg
46962 MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28) 線(xiàn)粒體核糖體蛋白L28(抗原) 0.5mg
46963 MLH1(Mutl homolog l gene) 錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗原 0.5mg
46964 MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1) 胃粘液素抗原 0.5mg
46965 MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B) 褪黑素受體1B抗原 0.5mg
46966 MLN(Motilin)peptide 胃動(dòng)素多肽 0.5mg
46967 mTOR(Mammalian target of rapamycin) 雷帕霉素靶蛋白 0.5mg
46968 Muc-1/CD227 粘蛋白-1/上皮膜 0.5mg
46969 MyD88 (myeloid differential protein-88) 髓樣分化蛋白抗原 0.5mg
46970 PMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2) 周?chē)窠?jīng)髓鞘蛋白2抗原 0.5mg
46971 MYSM1(Myb-like, SWIRM and MPN domain-containing protein 1) MYSM1抗原 0.5mg
46972 MYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret、mouse MYOZ抗原 0.5mg
46973 CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 煙堿型乙酰*受體α7(多肽) 0.5mg
46974 Nanog fragment 干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白(多肽)人XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒 0.5mg
46975 Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白:納曲酮偶聯(lián)血藍(lán)蛋白 0.5mg
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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