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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
47315 IL-10(Interleukin-10) 白介素10(白細胞介素-10)(抗原) 0.5mg
47316 IL-8 白介素8(白細胞介素-8)(抗原) 0.5mg
47317 Insulin Receptor(ISR) 胰島素受體(抗原) 0.5mg
47318 Integrin Alpha 4/ITGA4(Integrin alpha 4) 整合素-α(抗原) 0.5ml
47319 LDL-R(Low-density lipoprotein receptor precursor) 低密度脂蛋白受體(抗原) 0.5mg
47320 Ki-67 peptides Ki-67 Antigen(多肽抗原) 0.5mg
47321 Kiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor) 腫瘤轉移抑制基因(抗原) 0.5mg
47322 重組K3蛋白 重組K3蛋白 0.5mg
47323 Snake poison Protein 蛇毒蛋白 0.5mg
47324 Snake poison Protein 蛇毒蛋白 1mg
47325 Batroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白 1mg
47326 Leptin 瘦素(抗原) 0.5mg
47327 Leptin receptor 瘦素受體(抗原) 0.5mg
47328 Lpin1 protein Lpin1 protein(抗原) 0.5mg
47329 Lumbrokinase 蚯蚓纖溶酶(*抗原) 0.5mg
47330 Livin (Inhibitors of apoptosis proterins Livin) 一種新的凋亡抑制蛋白(抗原) 0.5mg
47331 p38 MAPK/MKK3/MAPKK14 絲裂原活化蛋白激酶p38(抗原) 0.5mg
47332 Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉運蛋白(抗原) 0.5mg
47333 MADCAM-1 黏膜選址素(抗原) 0.5mg
47334 MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相關糖蛋白a/b(抗原) 0.5mg
47335 MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關糖蛋白(抗原) 0.5mg
47336 MMP-1(Mous ematrix metalloproteinases-1) 基質金屬蛋白酶-1(小鼠抗原) 0.5mg
47337 midnolin isoform Protein 1 中腦核仁蛋白1(抗原) 0.5mg
47338 midnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2(抗原) 0.5mg
47339 MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) 一種細胞應激分子抗原 0.5mg
47340 MRP3(Multidrug Resistanec-Associated Protein 3) 多藥耐藥相關蛋白3(抗原) 0.5mg
47341 MRP1(Multidrug Resistanec-Associated Protein 1) 多藥耐藥相關蛋白1(抗原) 0.5mg
47342 LRP/MVP (Lung resistance related protein) 肺耐藥相關蛋白(抗原) 0.5mg
47343 MSLN(mesothelin) 間皮素(多肽抗原) 0.5mg
47344 MSH2 (mutS homolog 2) MSH2抗原 0.5mg
47345 NKR(Neuromedin B Receptor) 神經激肽B受體(抗原) 0.5mg
47346 NF-L(Neurofilament triplet L) 低分子量神經絲蛋白(抗原) 0.5mg
47347 NF-M (Neurofilament triplet M) 中分子量神經絲蛋白(抗原) 0.5mg
47348 NF-H(Neurofilament triplet H) 高分子量神經絲蛋白(抗原) 0.5mg
47349 NIS(Na+/I-symporter;NIS) 鈉碘轉運體蛋白(多肽抗原) 0.5mg
47350 NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細胞核因子或稱k基因結合核因子(多肽抗原) 0.5mg
47351 NR2A (Glutamate receptor2A) *受體(N端抗原) 0.5mg
47352 NRP-1(neuropilin-1) 神經纖毛蛋白-1(抗原) 0.5mg
47353 NRP-2(neuropilin-2) 神經纖毛蛋白-2(抗原) 0.5mg
47354 NSBP1(Nucleosome-binding protein 1) 核小體結合蛋白1(抗原) 0.5mg
47355 NTP,Neurual thread protein 神經絲蛋白(抗原) 0.5mg
47356 OAT-1 (Organic anion transporter 1)human 陰離子轉運蛋白-1(人源) 0.5mg
47357 OAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat 陰離子轉運蛋白-1(大、小鼠同源:人源見bs-0606P) 0.5mg
47358 OAT-3(Organic anion transporter 3) 陰離子轉運蛋白-3(抗原) 0.5mg
47359 galectin 9 半乳糖凝集素9(抗原) 0.5mg
47360 Oct-4 胚胎干細胞關鍵蛋白(多肽) 0.5mg
47361 OPN(osteopontin) 骨橋蛋白(抗原) 0.5mg
47362 P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A) 抑癌基因p16(抗原) 0.5mg
47363 p21/WAF1/CIP1 p21 核分裂抑制因子之一(抗原) 0.5mg
47364 p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B) p27(抗原) 0.5mg
47365 P63 protein P63 腫瘤抑制基因(抗原)人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒 0.5mg
47366 OPG(Osteoprotegerin) 護骨素(多肽抗原) 0.5mg
47367 OPGL (Osteoprotegerin ligand) 骨保護蛋白配體(抗原) 0.5mg
47368 P311 protein 增生性瘢痕相關蛋白(抗原) 0.5mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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