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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
47835 Reg3 gamma 胰島β細胞生長因子Reg IIIγ抗體 0.2ml
47836 ENPP1 核苷酸內焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體 0.2ml
47837 ACCN1/BNaC1/ASIC2 腦鈉通道蛋白1抗體 0.2ml
47838 CD44/HCAM/PGP1 CD44抗體 0.1ml
47839 BGP/Osteocalcin 骨保護蛋白/骨鈣素抗體 0.1ml
47840 ChRM3/Acetylcholine receptor(M3) 毒蕈堿型乙酰*受體M3抗體 0.1ml
47841 MSH3 錯配修復蛋白3抗體 0.2ml
47842 Cystatin A 胱抑素A/半*蛋白酶抑制劑A抗體 0.2ml
47843 SDF-1/CXCL12 基質細胞衍生因子1抗體 0.1ml
47844 Metallothionein 3 金屬硫蛋白3抗體 0.2ml
47845 HIV1 p55+p24+p17 艾滋病病毒抗體 0.2ml
47846 MPO/Myeloperoxidase 髓過氧化物酶抗體 0.1ml
47847 SETBP1 SET結合蛋白1抗體 0.2ml
47848 Bacillus anthraci protein 炭疽桿菌菌體蛋白抗體 0.2ml
47849 HSJ2/DNAJB6 熱休克蛋白J2抗體 0.2ml
47850 Beta galactosidase β半乳糖苷酶抗體 0.2ml
47851 human secretory IgA 人分泌型免疫球蛋白A 0.1ml
47852 PMS1 腫瘤錯配修復基因PMS1抗體 0.2ml
47853 Laminin alpha 1 層粘蛋白α1抗體 0.1ml
47854 Nucleoprotein/NP A型流感病毒核蛋白抗體 0.2ml
47855 HIV p55+P6-Gag 艾滋病病毒抗體 0.2ml
47856 HIV p55+NP7 艾滋病病毒抗體 0.2ml
47857 HIV1 p55+p17/HIV1 Pr55Gag 艾滋病病毒抗體 0.2ml
47858 rhIL-18 *18抗體 0.1ml
47859 Adiponectin receptor 2 脂聯素受體2抗體 0.1ml
47860 ELAVL3/HuC 副腫瘤綜合癥小腦變性相關蛋白抗體 0.1ml
47861 Adiponectin 脂聯素抗體 0.1ml
47862 APH1a 早老素γ分泌酶抗體 0.2ml
47863 Acrosin 精子頂體前體蛋白抗體 0.2ml
47864 SNX25 分揀微管連接蛋白抗體 0.2ml
47865 ADM/AM/Adrenomedullin 腎上腺髓質素抗體 0.1ml
47866 ADM (ProAM-N20) 腎上腺髓質素抗體(N端20肽) 0.1ml
47867 ADM R 腎上腺髓質素受體抗體 0.1ml
47868 C CBL 原癌基因CBL2抗體 0.2ml
47869 5HT3C/5HT3E 5-羥色胺受體3C抗體 0.1ml
47870 phospho-C CBL(Tyr674) 磷酸化原癌基因CBL2抗體 0.1ml
47871 ADNP/NAP 活性依賴的神經保護肽抗體 0.1ml
47872 Cphospho-C CBL(Tyr700) 磷酸化原癌基因CBL2抗體 0.1ml
47873 ADORA3 腺苷受體A3抗體 0.1ml
47874 ADO 2-氨基乙硫醇雙加氧酶抗體 0.2ml
47875 Integrin Alpha V 整合素αV抗體 0.2ml
47876 CPI17 alpha 蛋白磷酸激酶PKC/CPI-17抗體 0.1ml
47877 phospho-CPI17 alpha (Thr38) 磷酸化蛋白磷酸激酶PKC/CPI-17抗體 0.1ml
47878 ADRA2 ADRA2腎上腺素能受體2抗體 0.1ml
47879 ADRB1 腎上腺素能受體β1抗體 0.1ml
47880 APE/Girdin 肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體 0.1ml
47881 Drebrin 腦發育調節蛋白抗體 0.2ml
47882 DAG1 肌萎縮相關蛋白DAG1抗體 0.1ml
47883 ADRB2 腎上腺素能受體β2抗體(β2-AR ) 0.1ml
47884 phospho-ADRB2(Ser346) 磷酸化腎上腺素能受體β2抗體 0.1ml
47885 phospho-ADRB2 (Ser261) 磷酸化腎上腺素能受體β2抗體 0.1ml
47886 phospho-DAG1 (Tyr892) 磷酸化肌萎縮相關蛋白DAG1抗體 0.1ml
47887 SynCAM 細胞粘附分子1抗體 人阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒 0.1ml
47888 CADM3/IGSF4B 細胞粘附分子3抗體 0.2ml
47889 CAMTA1 鈣調蛋白結合轉錄激活因子1抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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