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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人T細胞急性淋巴母細胞白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人T細胞急性淋巴母細胞白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人T細胞急性淋巴母細胞白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
48857 DIS/CCAR1 細胞周期及凋亡調節(jié)蛋白1抗體 0.2ml
48858 DPF2/D4 zinc and double PHD fingers family 2 雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體 0.2ml
48859 DUSP22/JSP1 雙特異性磷酸酶22抗體 0.2ml
48860 FKBP38 FK506結合蛋白38抗體 0.2ml
48861 FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 叉頭蛋白O1/O3/O4抗體 0.2ml
48862 GADD45 gamma 生長抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ 0.2ml
48863 CDC2L6 細胞分裂周期2樣蛋白激酶6抗體 0.2ml
48864 Hrk/BCL2 interacting protein BCL2相互作用蛋白質抗體 0.2ml
48865 IKB zeta/MAIL protein KB抑制蛋白激酶Ζ抗體 0.2ml
48866 NME5/IPIA beta P53誘導細胞凋亡抑制蛋白抗體 0.2ml
48867 Noxa Noxa蛋白抗體 0.2ml
48868 phospho-RKIP (Ser 153) 磷酸化Raf激酶抑制蛋白抗體 0.1ml
48869 BMP11 骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體 0.2ml
48870 RERE 肌萎縮相關蛋白1抗體 0.2ml
48871 SPNS1 SPNS1抗體 0.2ml
48872 beta Bax/BCL2 associated X protein BCL2相關X蛋白抗體 0.2ml
48873 Nucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD 核仁蛋白3抗體 0.2ml
48874 CARD10 BCL10結合蛋白和激活核轉錄因子抗體 0.2ml
48875 CARD12 凋亡加強結構域蛋白12抗體 0.2ml
48876 CARD14 凋亡加強結構域蛋白14抗體 0.2ml
48877 CARD15 凋亡加強結構域蛋白15抗體 0.2ml
48878 CARD4 凋亡加強結構域蛋白4抗體 0.2ml
48879 CARD6 凋亡加強結構域蛋白6抗體 0.2ml
48880 CARD8 凋亡加強結構域蛋白8抗體 0.1ml
48881 CARD9 凋亡加強結構域蛋白9抗體 0.2ml
48882 CARD17/INCA 凋亡加強結構域蛋白17抗體 0.2ml
48883 TP53I11 腫瘤蛋白P53誘導蛋白11抗體 0.2ml
48884 ZNF420 鋅指蛋白420抗體 0.2ml
48885 ZNHIT1/CGBP1 細胞周期蛋白1結合蛋白抗體 0.2ml
48886 p53AIP1 p53調節(jié)凋亡誘導蛋白1抗體 0.2ml
48887 APOL6 載脂蛋白樣蛋白6抗體 0.2ml
48888 ARTS 凋亡相關蛋白TGFb信號抗體 0.2ml
48889 Bif Bax相互作用因子1抗體 0.2ml
48890 CLIC4 細胞內氯離子通道蛋白4抗體 0.2ml
48891 PLSCR3 磷脂爬行酶3抗體 0.2ml
48892 PNPT1 多核苷酸磷酸化酶蛋白抗體 0.2ml
48893 AIF 調亡誘導因子抗體 0.1ml
48894 phospho-AXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703) 磷酸化粘附相關激酶抗體 0.1ml
48895 PTRH2 Bcl-2轉錄抑制因子1抗體 0.2ml
48896 PUS10/CCDC139 卷曲螺旋結構域蛋白139抗體 0.2ml
48897 THAP1 核凋亡因子THAP1抗體 0.2ml
48898 THYN1 胸腺細胞核蛋白1抗體 0.2ml
48899 TIA1 細胞毒顆粒相關蛋白TIA-1抗體 0.2ml
48900 NUPR1/p8 核蛋白p8抗體 0.2ml
48901 KIF4A 沉默驅動蛋白KIF4A抗體 0.2ml
48902 PARP3 多腺苷二磷酸多聚酶3抗體/多聚ADP-核糖聚合酶3 0.2ml
48903 PARP4 多腺苷二磷酸多聚酶4抗體/多聚ADP-核糖聚合酶4 0.2ml
48904 DOCK1 細胞質分裂付出蛋白1抗體 0.2ml
48905 EDA2R/TNFRSF27 腫瘤壞死因子受體超家族成員27抗體 0.2ml
48906 EDG1/CD363/S1P1 內皮細胞分化鞘脂G蛋白偶聯受體1抗體 0.2ml
48907 FEM 1B FEM1B抗體 0.2ml
48908 AIF 調亡誘導因子抗體人T細胞急性淋巴母細胞白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒 0.1ml
48909 BACH1/BRIP1 乳腺癌易感基因相互作用蛋白1抗體 0.1ml
48910 AIMP2 AIMP2抗體 0.2ml
48911 phospho-BACH1/BRIP1(Ser990) 磷酸化乳腺癌易感基因相互作用蛋白1抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人T細胞急性淋巴母細胞白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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