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人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（NGAL）ELISA試劑盒

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人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

49418 ANKRD9  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體 0.2ml
49419 APM2  脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體 0.2ml
49420 ANKS1A  錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體 0.2ml
49421 APOL3  載脂蛋白L3抗體 0.2ml
49422 ARMC3 (Cancer/testis antigen 81)  腫瘤/睪丸抗原81抗體 0.2ml
49423 ARSA  芳香基硫酸酯酶1抗體 0.2ml
49424 ATE1  *tRNA的蛋白轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
49425 ATX2  脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體 0.2ml
49426 ATXN7L1  共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣1抗體 0.2ml
49427 ATXN7L2  共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣2抗體 0.2ml
49428 BCNP  B淋巴細(xì)胞新型蛋白1抗體 0.2ml
49429 BEX4  腦表達(dá)X連鎖蛋白4抗體 0.2ml
49430 ABCA5  三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A亞基5抗體 0.2ml
49431 BTBD7  BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 0.2ml
49432 GUSB/beta glucuronidase  β葡萄糖醛酸苷酶抗體 0.2ml
49433 CA13  碳酸酐酶 0.2ml
49434 HOXC9  同源盒蛋白HOXC9抗體 0.2ml
49435 CA6  碳酸酐酶6抗體 0.2ml
49436 CA7  碳酸酐酶7抗體 0.2ml
49437 CCBE1  膠原蛋白和鈣結(jié)合表皮生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)域1抗體 0.2ml
49438 CCDC102B  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白102B抗體 0.2ml
49439 CCDC16/ZNF83  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白16抗體 0.2ml
49440 CCDC21  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白21抗體 0.2ml
49441 CCDC52  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白52抗體 0.2ml
49442 CCDC6  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體(乳頭狀甲狀腺癌編碼蛋白) 0.2ml
49443 CCDC7  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 0.2ml
49444 CCDC80  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白80抗體 0.2ml
49445 CD163L1  CD163蛋白樣1抗體 0.2ml
49446 CDAN1  先天性紅細(xì)胞生成異常性貧血蛋白1抗體 0.2ml
49447 CDK2AP2  細(xì)胞周期素依賴激酶2相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml
49448 CEACAM21  癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子21抗體 0.2ml
49449 CDKAL1  周期素依賴性激酶5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體 0.2ml
49450 CEACAM16/CEAL2  癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子16抗體 0.2ml
49451 CEACAM19/CEAL1  癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子19抗體 0.2ml
49452 ADCK5  ADCK5蛋白抗體 0.2ml
49453 ITGB1BP2/CHORDC3  整合素β1結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
49454 CLDND2  膜蛋白CLDND2抗體 0.2ml
49455 CLLD7  *核苷酸交換因子CLLD7抗體 0.2ml
49456 CLN3  神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體 0.2ml
49457 CLN6  神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN6抗體 0.2ml
49458 CLPTM1  唇裂和腭裂相關(guān)跨膜蛋白1抗體 0.2ml
49459 CMT/Icmt  異戊烯半*羧基甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
49460 CKLFH1/CMTM1  趨化素樣因子超家族成員1抗體 0.2ml
49461 β-Amyloid 1-42(CT)  β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體 0.1ml
49462 CKLFH3/CMTM3  趨化素樣因子超家族成員3抗體 0.2ml
49463 CKLFH4/CMTM4  趨化素樣因子超家族成員4抗體 0.2ml
49464 CKLFH5/CMTM5  趨化素樣因子超家族成員5抗體 0.2ml
49465 CKLFH8/CMTM8  趨化素樣因子超家族成員8抗體 0.2ml
49466 CKLFH6/CMTM6  趨化素樣因子超家族成員6抗體 0.2ml
49467 CKLFSF7/CMTM7  趨化素樣因子超家族成員7抗體 0.2ml
49468 CNIH3/CNIH2  cornichon樣蛋白抗體 0.2ml
49469 CNKSR1  人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒Ras激酶抑制因子連接增強(qiáng)蛋白1抗體 0.2ml
49470 CNKSR2  Ras激酶抑制因子連接增強(qiáng)蛋白2抗體 0.2ml
49471 CNKSR3  Ras激酶抑制因子連接增強(qiáng)蛋白3抗體 0.2ml
49472 beta-Amyloid(1-16) (human)  β淀粉樣肽（1-16）抗體（人） 0.1ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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