猴熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒科研
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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人肺癌標志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人肺癌標志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人肺癌標志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
49531 β-Amyloid(1-42) β淀粉樣肽(1-42)抗體 0.1ml
49532 CCDC94 卷曲螺旋結構域蛋白94抗體 0.2ml
49533 CCDC135 卷曲螺旋結構域蛋白135抗體 0.2ml
49534 CCDC124 卷曲螺旋結構域蛋白124抗體 0.2ml
49535 CCDC112/MBC1 膀胱癌突變蛋白1抗體 0.2ml
49536 CCDC82 卷曲螺旋結構域蛋白82抗體 0.2ml
49537 CCDC68/se57-1 卷曲螺旋結構域蛋白68抗體(皮膚T淋巴細胞淋巴瘤相關抗原) 0.2ml
49538 CCDC83 卷曲螺旋結構域蛋白83抗體 0.2ml
49539 CCDC120 卷曲螺旋結構域蛋白120抗體 0.2ml
49540 CCDC23 卷曲螺旋結構域蛋白23抗體 0.2ml
49541 CCDC136/NAG6 鼻咽癌相關蛋白6抗體 0.2ml
49542 CCDC40 卷曲螺旋結構域蛋白40抗體 0.2ml
49543 AMY2A 胰腺α*抗體 0.1ml
49544 CCDC144A 卷曲螺旋結構域蛋白144A抗體 0.2ml
49545 CCDC60 卷曲螺旋結構域蛋白60抗體 0.2ml
49546 CCDC89 卷曲螺旋結構域蛋白89抗體 0.2ml
49547 CCDC114 卷曲螺旋結構域蛋白114抗體 0.2ml
49548 Pancreatic Amylase 胰*抗體 0.1ml
49549 CCDC39 卷曲螺旋結構域蛋白39抗體 0.2ml
49550 CCDC30 卷曲螺旋結構域蛋白30抗體 0.2ml
49551 CCDC34 卷曲螺旋結構域蛋白34抗體 0.2ml
49552 CCDC75 卷曲螺旋結構域蛋白75抗體 0.2ml
49553 CCDC65 卷曲螺旋結構域蛋白65抗體 0.2ml
49554 Signal recognition particle 信號識別顆粒抗體 0.1ml
49555 CCDC157 卷曲螺旋結構域蛋白157抗體 0.2ml
49556 CCDC90B 卷曲螺旋結構域蛋白90B抗體 0.2ml
49557 CCDC104 卷曲螺旋結構域蛋白104抗體 0.2ml
49558 CCDC12 卷曲螺旋結構域蛋白12抗體 0.2ml
49559 CCDC67 卷曲螺旋結構域蛋白67抗體 0.2ml
49560 CCDC144A 卷曲螺旋結構域蛋白144A抗體 0.2ml
49561 CCDC129 卷曲螺旋結構域蛋白129抗體 0.2ml
49562 CCDC107 卷曲螺旋結構域蛋白107抗體 0.2ml
49563 CCDC116 卷曲螺旋結構域蛋白116抗體 0.2ml
49564 CCDC117 卷曲螺旋結構域蛋白117抗體 0.2ml
49565 CCDC127 卷曲螺旋結構域蛋白127抗體 0.2ml
49566 CCDC138 卷曲螺旋結構域蛋白138抗體 0.2ml
49567 CCDC144NL 卷曲螺旋結構域蛋白144NL抗體 0.2ml
49568 CCDC56 卷曲螺旋結構域蛋白56抗體 0.2ml
49569 CCDC146 卷曲螺旋結構域蛋白146抗體 0.2ml
49570 CCDC147 卷曲螺旋結構域蛋白147抗體 0.2ml
49571 ANGPTL1/Angiopoietin 1/ANG-1 血管生成素-1抗體 0.1ml
49572 CCDC148 卷曲螺旋結構域蛋白148抗體 0.2ml
49573 Angiopoietin 2/ANG2 血管生成素2抗體 0.1ml
49574 CCDC153 卷曲螺旋結構域蛋白153抗體 0.2ml
49575 CCDC158 卷曲螺旋結構域蛋白158抗體 0.2ml
49576 CCDC160 卷曲螺旋結構域蛋白160抗體 0.2ml
49577 CCDC22 卷曲螺旋結構域蛋白22抗體 0.2ml
49578 CCDC25 卷曲螺旋結構域蛋白25抗體 0.2ml
49579 CCDC28A 卷曲螺旋結構域蛋白28A抗體 0.2ml
49580 CCDC28B 卷曲螺旋結構域蛋白28B抗體 0.2ml
49581 CCDC36/CT74 腫瘤/睪丸抗原74抗體 0.2ml
49582 CCDC38 人肺癌標志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒卷曲螺旋結構域蛋白38抗體 0.2ml
49583 CCDC42 卷曲螺旋結構域蛋白42抗體 0.2ml
49584 CCDC43 卷曲螺旋結構域蛋白43抗體 0.2ml
49585 CCDC46 卷曲螺旋結構域蛋白46抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人肺癌標志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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