人趨化因子IP-10(interferon-inducibleprotein-10)ELISA試劑盒
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2016-12-31 22:57:56瀏覽次數(shù):132次
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人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
49864 BTBD10 BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體 0.2ml
49865 BTBD17 BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 0.2ml
49866 ANGL2/ANGPTL2 血管生成素樣蛋白2抗體 0.1ml
49867 BTBD19 BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白19抗體 0.2ml
49868 GCLC/GCLM γ谷氨酰半*合成酶抗體(γ-GCSc) 0.2ml
49869 GCOM1 GCOM1蛋白抗體 0.2ml
49870 OGFOD2 末端多聚腺苷酸2蛋白抗體 0.2ml
49871 GFOD2 葡萄糖果糖還原酶2抗體 0.2ml
49872 GFRAL 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體 0.2ml
49873 GHDC GHDC蛋白抗體 0.2ml
49874 GK5/Glycerokinase 5 甘油激酶5抗體 0.2ml
49875 GLB1L3 β半乳糖苷酶1樣蛋白3抗體 0.2ml
49876 GLCCI1 糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 0.2ml
49877 ANGPTL3/ANG5 血管生成素樣蛋白3 0.2ml
49878 GLIPR2 腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml
49879 Grpa 半乳糖凝集素相關(guān)蛋白A抗體 0.2ml
49880 Galectin 12/LGALS12 半乳糖凝集素12抗體 0.2ml
49881 ANGPTL4/ARP4 血管生成素樣蛋白4抗體 0.2ml
49882 HAGHL 羥基酰*水解酶樣蛋白抗體 0.2ml
49883 HEATR7B2 熱休克蛋白受體家族蛋白7B2抗體 0.2ml
49884 HEBP2 Heme結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
49885 HEPACAM2 肝細(xì)胞粘附分子2抗體 0.2ml
49886 HEXDC 氨基己糖苷酶D抗體 0.2ml
49887 HHLA2 HHLA2蛋白抗體 0.2ml
49888 KIAA1576/VAT1L 囊泡胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1家族蛋白抗體 0.2ml
49889 BOLA1 BOLA1蛋白抗體 0.2ml
49890 BOLA2 BOLA2蛋白抗體 0.2ml
49891 BPIL1 殺菌通透性增加蛋白樣1抗體 0.2ml
49892 BPIL2 殺菌/通透性增加蛋白樣2抗體 0.2ml
49893 BPIL3 殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體 0.2ml
49894 BRD1 BRD1蛋白抗體 0.2ml
49895 BRP44 腦蛋白44抗體 0.2ml
49896 BRP44L 腦蛋白44樣蛋白抗體 0.2ml
49897 BRPF3 BRPF3蛋白抗體 0.2ml
49898 LMO2 T淋巴細(xì)胞易位蛋白2抗體 0.2ml
49899 BTNL2 嗜乳脂蛋白樣2抗體 0.2ml
49900 BTNL3 嗜乳脂蛋白樣3抗體 0.2ml
49901 BTNL8 嗜乳脂蛋白樣8抗體 0.2ml
49902 BTNL9 嗜乳脂蛋白樣9抗體 0.2ml
49903 BXDC1 BXDC1蛋白抗體 0.2ml
49904 BXDC2 BXDC2蛋白抗體 0.2ml
49905 BEND3 BEND3蛋白抗體 0.2ml
49906 BEND4/CCDC4 BEND4蛋白抗體 0.2ml
49907 BEND6 BEND6蛋白抗體 0.2ml
49908 c-ABL1/2(Tyr393/429) 磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體 0.1ml
49909 NF-κB p105/p50(Phospho-Ser373) 磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 0.1ml
49910 phospho-C-Myc(Thr373) 磷酸化致癌基因C-Myc抗體 0.2ml
49911 Lin28 RNA結(jié)合蛋白LIN28抗體 0.2ml
49912 Phospho-BRCA1(Ser988) 磷酸化乳腺癌易感基因1抗體 0.1ml
49913 phospho-Cdc25B (Ser149) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 0.1ml
49914 phospho-GluR1(Ser849) 磷酸化*受體1抗體 0.1ml
49915 ZNF471 鋅指蛋白471抗體人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒 0.2ml
49916 Phospho-NMDAR2B (Tyr1474) 磷酸化*受體2B抗體 0.1ml
49917 phospho-ATF2 (Thr53) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
49918 phospho-ATF2 (Thr55) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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