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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人c-myc癌基因產物(c-myc)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人c-myc癌基因產物(c-myc)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人c-myc癌基因產物(c-myc)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
50314 SERPINB3 *蛋白酶抑制劑B3抗體 0.2ml
50315 Cystatin D 胱抑素D/半*蛋白酶抑制劑D抗體 0.2ml
50316 CST8/Cystatin 8 胱抑素8/半*蛋白酶抑制劑8抗體 0.2ml
50317 CST9/Cystatin 9 胱抑素9/半*蛋白酶抑制劑9抗體 0.2ml
50318 Cystatin S 胱抑素S/半*蛋白酶抑制劑S抗體 0.2ml
50319 C1orf149 1號染色體開放閱讀框149抗體 0.2ml
50320 C1orf187 1號染色體開放閱讀框187抗體 0.2ml
50321 C1orf177 1號染色體開放閱讀框177抗體 0.2ml
50322 C1orf183 1號染色體開放閱讀框183抗體 0.2ml
50323 RNF70 環指蛋白70抗體 0.2ml
50324 RNF41 環指蛋白41抗體 0.2ml
50325 RNF14 環指蛋白14抗體 0.2ml
50326 RNF157 環指蛋白157抗體 0.2ml
50327 RNF144 E3泛素蛋白連接酶144A抗體 0.2ml
50328 RNF149 環指蛋白149抗體 0.2ml
50329 RNF156 環指蛋白156抗體 0.2ml
50330 RNF158 心臟蛋白磷酸酶1結合蛋白/環指蛋白158抗體 0.2ml
50331 RNF166 環指蛋白166抗體 0.2ml
50332 RNF167 環指蛋白167抗體 0.2ml
50333 RNF180 環指蛋白180抗體 0.2ml
50334 CREG1 E1A激活基因刺激蛋白1抗體 0.2ml
50335 CDX1 尾側型同源轉錄因子1抗體 0.2ml
50336 CDX2/3 尾側型同源轉錄因子2/3抗體 0.2ml
50337 RNF35 環指蛋白35抗體 0.2ml
50338 RNF23 環指蛋白23抗體 0.2ml
50339 RNF24 環指蛋白24抗體 0.2ml
50340 RNF25 環指蛋白25抗體 0.2ml
50341 RNF31/HOIP 環指蛋白31抗體 0.2ml
50342 RNF34 環指蛋白34抗體 0.2ml
50343 RNF20 環指蛋白20抗體 0.2ml
50344 RNF21 環指蛋白21抗體 0.2ml
50345 RNF190 環指蛋白190抗體 0.2ml
50346 RNF19B 環指蛋白19B抗體 0.2ml
50347 RNF111 環指蛋白111抗體 0.2ml
50348 RNF113A 環指蛋白113A抗體 0.2ml
50349 RNF123 環指蛋白123抗體 0.2ml
50350 TRAC1/RNF125 環指蛋白125抗體 0.2ml
50351 RNF128 環指蛋白128抗體 0.2ml
50352 RNF130/ 環指蛋白130抗體 0.2ml
50353 RNF133 環指蛋白133抗體 0.2ml
50354 RNF138 環指蛋白138抗體 0.2ml
50355 RNF121 環指蛋白121抗體 0.2ml
50356 RNF113B 環指蛋白113B抗體 0.2ml
50357 RNF150 環指蛋白150抗體 0.2ml
50358 RNF165 環指蛋白165抗體 0.2ml
50359 RNF169 環指蛋白169抗體 0.2ml
50360 RNF170 環指蛋白170抗體 0.2ml
50361 RNF185 環指蛋白185抗體 0.2ml
50362 RNF186 環指蛋白186抗體 0.2ml
50363 RNF215 環指蛋白215抗體 0.2ml
50364 RNF32 環指蛋白32抗體 0.2ml
50365 USP9X 泛素特異性蛋白酶9X抗體 0.2ml
50366 USP10 去泛素酶10抗體人c-myc癌基因產物(c-myc)ELISA試劑盒 0.2ml
50367 Mycobacterium 結核分枝桿菌抗體 0.2ml
50368 BECN1L1 Bcl-2同源結構域樣蛋白1抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人c-myc癌基因產物(c-myc)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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