植物獨腳金內酯(strigolactones)ELISA試劑盒說明書
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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
50648 G alpha gust Gα gust抗體 0.2ml
50649 SHARPIN 線性泛素鏈相關蛋白SHARPIN抗體 0.2ml
50650 gamma crystallin S γ晶狀體蛋白S抗體(γS-crystallin) 0.2ml
50651 GPR71/T1R2 蛋白偶聯受體71抗體 0.2ml
50652 STIP1 應激誘導磷蛋白1抗體 0.2ml
50653 Activated protein C/PROC1 活化蛋白C抗體 0.1ml
50654 Frataxin 線粒體型共濟失調蛋白抗體 0.2ml
50655 Phospho-SRF (Ser77) 磷酸化生長激素釋放因子抗體(血清應答因子) 0.1ml
50656 TEF3/TEAD4 轉錄增強因子TEF3抗體 0.2ml
50657 Transcription factor 25/Nulp1 核轉錄因子25抗體 0.2ml
50658 PITX2 成對樣同源結構域轉錄因子2抗體 0.2ml
50659 RBM20 RNA結合蛋白20抗體 0.2ml
50660 ZNF828/C13orf8 鋅指蛋白828抗體 0.2ml
50661 SPAC7/C13ORF28 精子頂端體相關蛋白7抗體 0.2ml
50662 RBM26 RNA結合蛋白26抗體 0.2ml
50663 MYH9 肌球蛋白重鏈9抗體 0.2ml
50664 CLLD6/C13orf1 慢性淋巴細胞白血病缺失基因6蛋白抗體 0.2ml
50665 PIBF1/C13orf24 孕酮誘導阻斷因子1抗體 0.2ml
50666 C13orf38/LOC728591 13號染色體開放閱讀框38抗體 0.2ml
50667 C14ORF140/FAM164C 14號染色體開放閱讀框140抗體 0.2ml
50668 KNL2/C14orf106 14號染色體開放閱讀框106抗體 0.2ml
50669 UBR7/C14orf130 14號染色體開放閱讀框130抗體 0.2ml
50670 SAMD15/C14orf174 14號染色體開放閱讀框174 0.2ml
50671 DRIP1/C14orf28 多巴胺受體相互作用蛋白1抗體 0.2ml
50672 C15orf41 15號染色體開放閱讀框41抗體 0.2ml
50673 C15orf52 15號染色體開放閱讀框52抗體 0.2ml
50674 C15orf62 15號染色體開放閱讀框62抗體 0.2ml
50675 Apelin/Apelin 13 脂肪炎癥因子Apelin抗體 0.1ml
50676 Tropomyosin 原肌球蛋白1抗體 0.2ml
50677 PARP16 多腺苷二磷酸多聚酶16抗體 0.2ml
50678 MRPS4/IMP3 線粒體核糖體蛋白S4抗體 0.2ml
50679 NPAP1 核孔蛋白1抗體 0.2ml
50680 Apelin receptor/AGTRL1 血管緊縮素樣蛋白1抗體 0.2ml
50681 RPUSD2 RNA尿苷酸合酶結構域蛋白2抗體 0.2ml
50682 C16orf61 16號染色體開放閱讀框61抗體 0.2ml
50683 KLHL36/C16orf44 Kelch樣蛋白36抗體 0.2ml
50684 C16orf7/ATP-BL 16號染色體開放閱讀框7抗體 0.2ml
50685 APC/Adenomatous Polyposis Coli 腺瘤樣息肉抗體 0.1ml
50686 REF-1/APEX1 多功能DNA修復酶抗體 0.1ml
50687 C16orf48 16號染色體開放閱讀框48抗體 0.2ml
50688 phospho-ATG3 (Tyr18) 磷酸化自噬相關蛋白3抗體 0.1ml
50689 C16orf57 16號染色體開放閱讀框57抗體 0.2ml
50690 ATH III 抗*3抗體 0.2ml
50691 ATG3 自噬相關蛋白3抗體 0.1ml
50692 PDZD9 PDZ結構域PDZK9蛋白抗體 0.2ml
50693 ITFG3/C16orf9 整聯蛋白重復蛋白3抗體 0.2ml
50694 IDH1/Isocitrate dehydrogenase 異檸檬酸脫氫酶1抗體 0.2ml
50695 SLC39A11 溶質載體家族39成員11抗體 0.2ml
50696 XTP4 乙型肝炎病毒X蛋白反轉錄蛋白4抗體 0.2ml
50697 KCTD11 鉀通道四聚體結構域蛋白11抗體 0.2ml
50698 DERP6/C17orf81 表皮乳頭源性蛋白6抗體 0.2ml
50699 ATG4A 自噬相關蛋白4A抗體 人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒 0.2ml
50700 C17orf42 17號染色體開放閱讀框42抗體 0.2ml
50701 C17orf49 17號染色體開放閱讀框49抗體 0.2ml
50702 APG4B/AUTL1 自噬相關蛋白4B抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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