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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
50761 C19orf18 19號染色體開放閱讀框18抗體 0.2ml
50762 C19orf21 19號染色體開放閱讀框21抗體 0.2ml
50763 C19orf24 19號染色體開放閱讀框24抗體 0.2ml
50764 MFSD12/C19orf28 19號染色體開放閱讀框28抗體 0.2ml
50765 C19orf45 19號染色體開放閱讀框45抗體 0.2ml
50766 C19orf46 19號染色體開放閱讀框46抗體 0.2ml
50767 C19orf47 19號染色體開放閱讀框47抗體 0.2ml
50768 C19orf54 19號染色體開放閱讀框54抗體 0.2ml
50769 C1GALT1 N-乙酰半乳糖胺糖蛋白3、β-半乳糖轉移酶1抗體 0.2ml
50770 VGLUT2 囊泡*轉運蛋白2抗體 0.2ml
50771 Phospho-BLNK(Tyr84) 磷酸化T淋巴細胞連接蛋白抗體 0.1ml
50772 Phospho-BLNK(Tyr491) 磷酸化T淋巴細胞連接蛋白抗體 0.1ml
50773 TWA1/C20orf11 20號染色體開放閱讀框11抗體 0.2ml
50774 C20ORF141 20號染色體開放閱讀框141抗體 0.2ml
50775 C20orf103 20號染色體開放閱讀框103抗體 0.2ml
50776 C20orf111 過氧化氫誘導轉錄蛋白1抗體 0.2ml
50777 C20orf112 20號染色體開放閱讀框112抗體 0.2ml
50778 C20orf132 20號染色體開放閱讀框132抗體 0.2ml
50779 C20orf160 20號染色體開放閱讀框160抗體 0.2ml
50780 KIZUNA/C20orf19 20號染色體開放閱讀框19抗體 0.2ml
50781 C20orf194 20號染色體開放閱讀框194抗體 0.2ml
50782 C20orf195 20號染色體開放閱讀框195抗體 0.2ml
50783 C20orf196 20號染色體開放閱讀框196抗體 0.2ml
50784 APOE/Apo E2 載脂蛋白E抗體 0.1ml
50785 C20orf43 20號染色體開放閱讀框43抗體 0.1ml
50786 GPCR GPR97 G蛋白偶聯受體97抗體 0.2ml
50787 HECA HECA蛋白抗體 0.2ml
50788 APOE3 載脂蛋白E3抗體 0.2ml
50789 Hornerin/S100A18 角化蛋白S100A16抗體 0.2ml
50790 IFI35 干擾素誘導35蛋白抗體 0.2ml
50791 APOE4/Apolipoprotein E4 載脂蛋白E4抗體 0.2ml
50792 ITM2A 完整膜蛋白E25A抗體 0.2ml
50793 APOJ/Clusterin 載脂蛋白J抗體 0.1ml
50794 JWA JWA蛋白抗體 0.2ml
50795 Kazrin Kazrin蛋白抗體 0.2ml
50796 LCE1A 晚期包膜蛋白1抗體 0.2ml
50797 LCE2B 晚期包膜蛋白2B抗體 0.2ml
50798 增殖相關核仁抗原抗體 0.2ml
50799 LIPK 脂肪酶家庭成員K抗體 0.2ml
50800 NHEDC2 線粒體鈉/氫交換蛋白質2抗體 0.2ml
50801 NOC3L/FAD24 脂肪細胞分化因子24 0.2ml
50802 Sox9a 轉錄因子sox9a抗體 0.2ml
50803 KBP KBP蛋白抗體 0.2ml
50804 Nidogen 2 巢蛋白NID2抗體 0.2ml
50805 Nanos3 骨巢蛋白抗體 0.2ml
50806 PDE4A8 磷酸二酯酶4A8抗體 0.2ml
50807 C10orf27/SPATIAL 第10號染色體開放閱讀框27抗體 0.2ml
50808 FEZ1 腦胚胎鋅指樣蛋白1抗體 0.2ml
50809 FAM29A/HAUS6 FAM29蛋白抗體 0.2ml
50810 E4F1 E4F轉錄因子1抗體人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒 0.2ml
50811 CHPT1 甘油二酯*磷酸轉移酶抗體 0.2ml
50812 BIN2/BRAP1 乳腺癌相關蛋白1抗體 0.2ml
50813 B4GALT7/GlcNAc beta 半乳糖轉移酶7亞基β1,4抗體 0.2ml
50814 FAM96B FAM96B蛋白抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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