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人細胞周期素D2（Cyclin-D2）ELISA

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產品簡介

人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA ，ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用，但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。

詳細介紹

人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA 實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發，提高試驗質量。

52027 phospho-Cdc25B (Ser353)  磷酸化細胞分裂周期蛋白25B抗體 0.1ml
52028 SIGLEC10/SLG2  唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素抗體 0.2ml
52029 Cdc6  細胞分裂周期蛋白6抗體 0.1ml
52030 Jagged1/CD339  Jagged1/CD339抗體 0.1ml
52031 Cdc7  細胞分裂周期蛋白7抗體 0.1ml
52032 Jagged 2  Notch配體Jagged 2蛋白抗體 0.2ml
52033 SIGLEC14  唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素14抗體 0.2ml
52034 phospho-Cdc6 (Ser54)  磷酸化細胞分裂周期蛋白6抗體 0.1ml
52035 SIGLEC11  唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素11抗體 0.2ml
52036 CDC34/UBC3  細胞周期調控因子34 0.1ml
52037 CDC40  細胞分裂周期同源蛋白40抗體 0.2ml
52038 CDC34B/UBC3B  泛素載體蛋白R2抗體 0.2ml
52039 CDCA4  細胞分裂周期相關蛋白4抗體 0.1ml
52040 CDC42  細胞分化周期CDC42蛋白抗體 0.1ml
52041 Phospho-CDC42 (Ser71)  磷酸化細胞分化周期CDC42蛋白抗體 0.1ml
52042 Cip4  細胞分化周期CDC42相互作用蛋白4抗體 0.2ml
52043 BubR1  有絲分裂檢驗點蛋白BubR1抗體 0.2ml
52044 CDK1/Cdc2  周期素依賴性激酶1抗體 0.1ml
52045 CDK2  周期素依賴性激酶2抗體 0.1ml
52046 CLIP1/CLIP170  細胞質連接蛋白1抗體 0.2ml
52047 Phospho-CDK2 (Thr160)  磷酸化周期素依賴性激酶2抗體 0.1ml
52048 Phospho-CDK2 (Thr14)  磷酸化周期素依賴性激酶2抗體 0.1ml
52049 CDK3  周期素依賴性激酶3抗體 0.1ml
52050 CDK4  周期素依賴性激酶4抗體 0.1ml
52051 CNTROB  乳腺癌易感基因2相互作用蛋白抗體 0.2ml
52052 HEC1  癌細胞高表達蛋白Hec1抗體 0.2ml
52053 CDK5  周期素依賴性激酶5抗體 0.1ml
52054 HURP/DAP5  肝癌上調蛋白抗體 0.2ml
52055 CDK6  周期素依賴性激酶6抗體 0.1ml
52056 phospho-CDK6 (Tyr13)  磷酸化周期素依賴性激酶6抗體 0.1ml
52057 phospho-CDK6 (Tyr24)  磷酸化周期素依賴性激酶6抗體 0.1ml
52058 CDK7  周期素依賴性激酶7抗體 0.1ml
52059 LGALS3BP  可溶性半乳糖凝集素3結合蛋白抗體 0.2ml
52060 phospho-CDK7 (Thr170)  磷酸化周期素依賴性激酶7抗體 0.1ml
52061 MAD2  有絲分裂阻滯缺陷蛋白2抗體 0.2ml
52062 CDK8  周期素依賴性激酶8抗體 0.1ml
52063 CDK9/Cyclin T1  周期素依賴性激酶9抗體 0.1ml
52064 Phospho-CDK9 (Thr186)  磷酸化周期素依賴性激酶9抗體 0.1ml
52065 Phospho-CDK9 (Thr29)  磷酸化周期素依賴性激酶9抗體 0.1ml
52066 CDK10  周期素依賴性激酶10 0.2ml
52067 CDK11  周期素依賴性激酶11抗體 0.2ml
52068 CDKN1C/p57 Kip2  周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體 0.1ml
52069 Mad2L1  有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白1抗體 0.2ml
52070 Phospho-p57 Kip2 (Thr310)  磷酸化周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體 0.1ml
52071 NEK2  中心體相關蛋白激酶Nek2抗體 0.2ml
52072 CGP-39/YKL-40  軟骨糖蛋白39抗體 0.1ml
52073 CEA/CD66e/CEACAM5  癌胚抗原抗體 0.1ml
52074 PAR6  缺陷性分配同源物α抗體 0.2ml
52075 CEA  癌胚抗原抗體 0.1ml
52076 CEA(C3)  癌胚抗原單克隆抗體（包被） 0.1ml
52077 CEA(B5)  癌胚抗原單克隆抗體（檢測） 0.1ml
52078 PCGF1  表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體 0.2ml
52079 CEAcam8/CD67  癌胚抗原相關細胞粘附分子8抗體 0.2ml
52080 PCGF1  表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體 0.2ml
52081 cellulase  纖維素酶抗體人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA 1ml
52082 CEBP-alpha  轉錄調節因子C/EBP α 抗體 0.1ml

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹的工作作風檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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