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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-14 13:22:07瀏覽次數(shù):154次
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人鱗狀上皮細胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人鱗狀上皮細胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人鱗狀上皮細胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
52195 FES 原癌基因*蛋白激酶FES抗體 0.2ml
52196 MATK *蛋白激酶細胞分裂素抗體 0.2ml
52197 Cytokeratin 5/CK5 細胞角蛋白5抗體 0.1ml
52198 CK7(human) 細胞角蛋白7抗體(人) 0.2ml
52199 CK7 細胞角蛋白7抗體 0.1ml
52200 CK10 細胞角蛋白10抗體 0.1ml
52201 CK5+6 細胞角蛋白5+6抗體 0.1ml
52202 CK6 細胞角蛋白6抗體 0.1ml
52203 MLF1 Interacting Protein/PBIP1/KLIP 卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 0.1ml
52204 CK8 細胞角蛋白8抗體 0.1ml
52205 phospho-CK8 (Ser23) 磷酸化細胞角蛋白8抗體 0.1ml
52206 CKLFSF2/CMTM2 趨化素樣因子超家族成員2抗體 0.2ml
52207 CK1+5+10+14 高分子量角蛋白抗體 0.2ml
52208 Cytokeratin 13/CK-HMW 高分子量細胞角蛋白抗體 0.1ml
52209 CKIP-1 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗體 0.2ml
52210 CKMT2 肌酸磷酸激酶2抗體 0.2ml
52211 Clostridium perfringens type D D型產(chǎn)氣莢膜梭菌抗體 1ml
52212 CITED1/ABCC1 結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體 0.2ml
52213 CLCA4 鈣激活氯離子通道4抗體 0.1ml
52214 CLEC1/CLEC1A C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體 0.2ml
52215 CLEC2/CLEC1B C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體 0.2ml
52216 CPLA2 beta 胞漿型磷脂酶A2抗體 0.2ml
52217 C-Mer/MERTK c-mer原癌基因*激酶抗體 0.1ml
52218 phospho-MLF1 Interacting Protein/PBIP1(Thr78) 磷酸化卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 0.1ml
52219 MRC1/CD206 巨噬細胞甘露糖受體抗體 0.2ml
52220 CLPS 胰輔脂酶抗體 0.2ml
52221 C-Met/Met/HGFR 肝細胞生長因子受體抗體 0.1ml
52222 SP17/CT22 精子表面蛋白Sp17抗體 0.2ml
52223 Phospho-Met (Tyr1003) 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)抗體 0.1ml
52224 Phospho-Met(Tyr1234/1235) 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)抗體 0.1ml
52225 Phospho-Met(Tyr1349) 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)抗體 0.1ml
52226 CMKLR1 趨化樣因子受體1抗體 0.1ml
52227 Nucleoprotein TPR 核蛋白易位啟動子區(qū)域TPR抗體 0.2ml
52228 VAM1/MPP6 棕櫚酰化膜蛋白6抗體 0.2ml
52229 MTLC 致癌基因抗體 0.2ml
52230 phospho C-Myc(Thr58/pSer62) 磷酸化致癌基因C-Myc抗體 0.1ml
52231 phospho C-Met/HGFR(Tyr1365) 磷酸化原癌基因c-Met抗體 0.1ml
52232 c-Myc tag c-Myc tag標簽抗體 0.1ml
52233 AU5 tag AU5 tag標簽抗體 0.1ml
52234 AU1 tag AU1 tag標簽抗體 0.1ml
52235 Glu-Glu Tag Glu-Glu tag抗體 0.1ml
52236 E Tag E Tag標簽抗體 0.1ml
52237 CNGA2 環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗體 0.1ml
52238 CANX/Calnexin 鈣連蛋白抗體 0.1ml
52239 FAM13B1 FAM13B1蛋白抗體 0.2ml
52240 CNP/CNPase C型鈉尿肽抗體 0.1ml
52241 CNR1/CB1 鈣粘蛋白相關的神經(jīng)受體1抗體 0.1ml
52242 CNR2/CB2 鈣粘蛋白相關的神經(jīng)受體2抗體 0.1ml
52243 CNTFR-α 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α抗體 0.1ml
52244 CNR-2/PCDHA6 鈣粘蛋白相關的神經(jīng)受體2抗體 0.2ml
52245 CNTF 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 0.1ml
52246 Phospho-Cofilin(Ser3) 磷酸化絲切蛋白抗體 0.1ml
52247 Phospho-Cofilin/CFL1 (Tyr139) 磷酸化絲切蛋白抗體 0.1ml
52248 phospho-CFL1/CFL2 (Tyr88) 磷酸化絲切蛋白抗體 0.1ml
52249 COLEC12 凝集胎盤蛋白1抗體 0.2ml
52250 Collagen I Ⅰ型膠原抗體 0.1ml
52251 Collagen II/Chondrocalcin Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體 0.1ml
52252 FAP/FAPA 成纖維細胞激活蛋白α抗體 0.2ml
52253 FAP1/PTPN13 Fas相關磷酸酶1/蛋白*磷酸酶非受體型13抗體 0.2ml
52254 Collagen III 抗Ⅲ型膠原抗體 Collagen Ⅲ 0.1ml
52255 Collagen III 抗Ⅲ型膠原抗體人鱗狀上皮細胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒 0.1ml
52256 CIAPIN1 細胞因子誘導凋亡抑制因子1 0.2ml
52257 Collagen IV/Arresten 抗IV型膠原抗體 0.1ml
52258 Collagen V Ⅴ型膠原抗體 0.1ml
52259 Collagen IV 抗IV型膠原抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人鱗狀上皮細胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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