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人幽門螺桿菌細(xì)胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgG（HP-CagA-IgG）ELISA試劑盒

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產(chǎn)品簡介

人幽門螺桿菌細(xì)胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒，ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人幽門螺桿菌細(xì)胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人幽門螺桿菌細(xì)胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

52719 Endostatin/COL18A1  內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體 0.1ml
52720 Endo G  核酸內(nèi)切酶G抗體 0.1ml
52721 β endorphin  β-內(nèi)啡肽抗體 0.1ml
52722 envelope glycoprotein (Yellow fever virus)  黃熱病毒包膜糖蛋白抗體 0.2ml
52723 ENO1  MYC啟動子結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
52724 ENO3  骨骼肌烯醇化酶抗體 0.2ml
52725 ENPP1  核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體 0.1ml
52726 ENPP3/CD203c  ENPP3抗體IgG 0.2ml
52727 CTHRC1  膠原三股螺旋重復(fù)蛋白1抗體 0.2ml
52728 EBP50/SLC9A3R1  細(xì)胞骨架連接質(zhì)膜蛋白抗體 0.2ml
52729 EpCAM/CD326  上皮細(xì)胞粘附分子抗體 0.1ml
52730 E.coli O6  大腸桿菌埃希桿菌O6抗體（腸致病性大腸桿菌O6） 0.2ml
52731 E.coli DH-5 Alpha  DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體 0.1ml
52732 E.coli O157:H7  腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體 0.2ml
52733 EPEC/E.coli  腸致病性大腸桿菌抗體 0.2ml
52734 E.coli/EPEC  大腸埃希菌菌體蛋白抗體 0.2ml
52735 E.coli O139  抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體（仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139） 0.2ml
52736 E. coli LPS  大腸桿菌脂多糖抗體 0.2ml
52737 EP3  前列腺素E受體3抗體 0.1ml
52738 Endomucin  內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體 0.2ml
52739 EphA1/Ephrina1/Ephrin A1 Receptor  內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白*激酶A抗體（腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白4） 0.1ml
52740 EphA4  *蛋白激酶A4抗體 0.1ml
52741 Ephrin B  Ephrin B抗體 0.1ml
52742 phospho-Ephrin B(Tyr329)  磷酸化Ephrin B抗體 0.1ml
52743 phospho-Ephrin B(Tyr316)  磷酸化Ephrin B抗體 0.1ml
52744 phospho-Ephrin B(Ser300)  磷酸化Ephrin B抗體 0.1ml
52745 phospho-Ephrin B(Tyr324/329)  磷酸化Ephrin B抗體 0.1ml
52746 Ephrin A3/EFNA3  *蛋白激酶A3受體抗體 0.1ml
52747 Ephrin A5  *蛋白激酶A5受體抗體 0.1ml
52748 HPSE2  乙酰肝素酶樣蛋白抗體 0.2ml
52749 EphA2/Eph receptor A2  內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白*激酶抗體 0.1ml
52750 Phospho-EphA2(Tyr594)  磷酸化*蛋白激酶A2受體抗體 0.1ml
52751 EphA4 R/Eph receptor A4  *蛋白激酶A4受體抗體 0.2ml
52752 EphB2 R  *蛋白激酶受體B2抗體 0.1ml
52753 EPO  紅細(xì)胞生成素抗體 0.1ml
52754 EPOR  紅細(xì)胞生成素受體抗體 0.1ml
52755 EPHX2  胞漿環(huán)氧化物水解酶抗體 0.2ml
52756 Eppin  附睪蛋白酶抑制蛋白 0.2ml
52757 EPX  嗜酸性粒細(xì)胞過氧化物酶抗體 0.2ml
52758 EphB6  *蛋白激酶受體B6抗體 0.1ml
52759 EPS8  表皮生長因子受體底物8抗體 0.1ml
52760 ERα/ESR1  雌激素受體α抗體 0.1ml
52761 ERAB/HSD17B10  內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
52762 Lumican  基膜聚糖蛋白抗體 0.2ml
52763 ERCC1  DNA切除修復(fù)蛋白1抗體 0.2ml
52764 ERK2/MAPK1  絲裂原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml
52765 phospho-MEK1/MAPKK1(Ser298)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體 0.1ml
52766 phospho-MEK1(Thr286)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體 0.1ml
52767 Phospho-MEK1/2(Ser218/222)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體 0.1ml
52768 Phospho-MEK1/2(Ser222)人幽門螺桿菌細(xì)胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體 0.1ml
52769 phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 0.1ml
52770 phospho-MEK1/MAP2K1(Ser385)   磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml
52771 phospho-MEK1/MAP2K1(Thr292)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml
52772 phospho-ERK1(Thr202/Tyr204)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml
52773 phospho-MEK1/MAP2K1(Thr386)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人幽門螺桿菌細(xì)胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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