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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗鈣調素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗鈣調素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗鈣調素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
54179 MIP4/CCL18 巨噬細胞炎癥蛋白18抗體 0.1ml
54180 MITF MITF相關轉錄因子抗體 0.2ml
54181 MMP-1 基質金屬蛋白酶-1抗體 0.1ml
54182 MMP-1 基質金屬蛋白酶-1抗體 0.1ml
54183 MMP-2 基質金屬蛋白酶-2抗體 0.1ml
54184 MMP-3 基質金屬蛋白酶3抗體 0.1ml
54185 MMP-7 基質金屬蛋白酶-7抗體 0.1ml
54186 MMP-8 基質金屬蛋白酶-8抗體 0.1ml
54187 MMP-9 基質金屬蛋白酶-9抗體 0.1ml
54188 MMP-9 基質金屬蛋白酶-9抗體 0.1ml
54189 MMP-2 基質金屬蛋白酶-2抗體 0.1ml
54190 MMP-2 基質金屬蛋白酶-2抗體 0.1ml
54191 MMP-1 基質金屬蛋白酶-1抗體 0.1ml
54192 MMP-13 基質金屬蛋白酶13抗體 0.1ml
54193 MMP-14 基質金屬蛋白酶-14抗體 0.1ml
54194 MMP-15 基質金屬蛋白酶-15抗體 0.1ml
54195 MMP-16 基質金屬蛋白酶-16抗體 0.1ml
54196 MMP-20 基質金屬蛋白酶20抗體 0.1ml
54197 MMP-17 基質金屬蛋白酶-17抗體 0.1ml
54198 MMP19 基質金屬蛋白酶18/19 0.2ml
54199 MMP20 基質金屬蛋白酶20 0.2ml
54200 MMP24/ MMP25/MMP21 基質金屬蛋白酶-24抗體 0.1ml
54201 MMP-22 基質金屬蛋白酶22抗體 0.2ml
54202 MMP-23 基質金屬蛋白酶23抗體 0.2ml
54203 MMP-26 基質金屬蛋白酶-26抗體 0.2ml
54204 MMP-28 基質金屬蛋白酶28抗體 0.2ml
54205 MMP-10 基質金屬蛋白酶-10抗體 0.1ml
54206 MMP-11 基質金屬蛋白酶-11抗體 0.1ml
54207 MMP-12 基質金屬蛋白酶-12抗體 0.1ml
54208 beta 2 Microglobulin β2微球蛋白抗體 0.1ml
54209 Beta-2-MG(B2E5) β2微球蛋白抗體(單抗) 0.1ml
54210 MOG 髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白抗體 0.1ml
54211 Moesin 膜突蛋白抗體 0.1ml
54212 Mouse IgA 兔抗小鼠IgA抗體 0.2ml
54213 M-RAS/Mras 原癌基因M-ras抗體 0.1ml
54214 RHEB Ras蛋白腦組織同源類似物RHEB蛋白抗體 0.1ml
54215 Mre11/HNGS1 DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體 0.2ml
54216 Phospho-Mre11 (Ser676) 磷酸化DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體 0.1ml
54217 MPO/c-ANCA 髓過氧化物酶抗體 0.1ml
54218 MCR/NR3C2/Mineralocorticoid receptor 鹽皮質激素受體抗體 0.2ml
54219 MRP1/ABCC1 多藥耐藥相關蛋白1抗體 0.1ml
54220 MRP2 多藥耐藥相關蛋白2抗體 0.1ml
54221 MRP3 多藥耐藥相關蛋白3抗體 0.1ml
54222 MRP4/ABCC4 多藥耐藥相關蛋白4抗體 0.1ml
54223 MRP5/ABCC5 多藥耐藥相關蛋白5抗體 0.1ml
54224 MRP7/ABCC10 多藥耐藥相關蛋白7抗體 0.1ml
54225 MRP8/ABCC11 多藥耐藥相關蛋白8抗體 0.2ml
54226 MRP9/ABCC12 多藥耐藥相關蛋白9抗體 0.2ml
54227 MrpL12 線粒體核糖體蛋白L12抗體 0.1ml
54228 MrpL28 線粒體核糖體蛋白L28抗體 0.1ml
54229 MSH Alpha 促黑細胞激素α抗體 0.1ml
54230 MSH γ1 促黑細胞激素γ1抗體 0.2ml
54231 MSH gamma 促黑細胞激素γ抗體 0.2ml
54232 MrpL39 人抗鈣調素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒 線粒體核糖體蛋白L39 0.1ml
54233 MSH2 錯配修復蛋白2抗體 0.1ml
54234 MSH6 錯配修復蛋白6抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人生長調節致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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