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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗神經元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗神經元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗神經元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
56160 Mouse Anti-human IgM/APC APC標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
56161 Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
56162 Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
56163 Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
56164 Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
56165 Mouse Anti-human IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
56166 Mouse Anti-human IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
56167 Mouse Anti-human IgM/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
56168 Mouse Anti-human IgM/Bio *標記的小鼠抗人IgM 0.3ml
56169 Mouse Anti-human IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
56170 Mouse Anti-human IgM/Gold 膠體金標記的小鼠抗人IgM 2ml
56171 Mouse Anti-human IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
56172 Mouse Anti-human IgM/Cy7 Cy7標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
56173 Mouse Anti-human IgM/PE PE標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
56174 Mouse Anti-Goat IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56175 Mouse Anti-Goat IgG/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗羊IgG 0.3ml
56176 Mouse Anti-Goat IgG/Bio *標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56177 Mouse Anti-Goat IgG/Gold 膠體金標記的小鼠抗羊IgG 2ml
56178 Mouse Anti-Goat IgG/Cy3 Cy3標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56179 Mouse Anti-Goat IgG/Cy5 Cy5標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56180 Mouse Anti-Goat IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56181 Mouse Anti-Goat IgG/Cy7 Cy7標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56182 Mouse Anti-Goat IgG/PE PE標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56183 Mouse Anti-Goat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56184 Mouse Anti-Goat IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56185 Mouse Anti-Goat IgG/APC APC標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56186 Mouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56187 Mouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56188 Mouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56189 Mouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56190 Mouse Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56191 Mouse Anti-Goat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56192 Mouse Anti-Goat IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
56193 Mouse Anti-Goat IgG/FITC FITC標記的小鼠抗羊IgG 0.3ml
56194 Mouse Anti-rabbit IgG/FITC FITC標記的小鼠抗兔IgG 0.3ml
56195 Mouse Anti-rabbit IgG/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗兔IgG 0.3ml
56196 Mouse Anti-rabbit IgG/Gold 膠體金標記的小鼠抗兔IgG 0.5ml
56197 Mouse Anti-rabbit IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56198 Mouse Anti-rabbit IgG/Bio *標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56199 Mouse Anti-rabbit IgG/Cy3 Cy3標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56200 Mouse Anti-rabbit IgG/Cy5 Cy5標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56201 Mouse Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56202 Mouse Anti-rabbit IgG/Cy7 Cy7標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56203 Mouse Anti-rabbit IgG/PE PE標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56204 Mouse Anti-rabbit IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56205 Mouse Anti-rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56206 Mouse Anti-rabbit IgG/APC APC標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56207 Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56208 Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56209 Mouse Anti-rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56210 Mouse Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56211 Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56212 Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56213 Mouse Anti-rabbit IgG/HRP 人抗神經元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA試劑盒 辣根過氧化物酶標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
56214 Mouse Anti-Rabbit IgM/Bio *標記的小鼠抗兔IgM 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗神經元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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