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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗DNA酶B抗體(anti-DNase B)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗DNA酶B抗體(anti-DNase B)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗DNA酶B抗體(anti-DNase B)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
56714 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/RBITC 羅丹明標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56715 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Gold 膠體金標記的兔抗小鼠k鏈 0.5ml
56716 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56717 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Bio *標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56718 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Cy3 Cy3標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56719 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Cy5 Cy5標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56720 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56721 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Cy7 Cy7標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56722 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE PE標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56723 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56724 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56725 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/APC APC標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56726 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56727 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56728 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56729 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56730 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56731 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
56732 Rabbit Anti-rat IgG/Bio *標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56733 Rabbit Anti-rat IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56734 Rabbit Anti-rat IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗大鼠IgG 0.3ml
56735 Rabbit Anti-rat IgG/FITC FITC標記的兔抗大鼠IgG 0.3ml
56736 Rabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56737 Rabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56738 Rabbit Anti-rat IgG/Gold 膠體金標記的兔抗大鼠IgG 0.5ml
56739 Rabbit Anti-rat IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56740 Rabbit Anti-rat IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56741 Rabbit Anti-rat IgG/Cy5 Cy5標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56742 Rabbit Anti-rat IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56743 Rabbit Anti-rat IgG/Cy7 Cy7標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56744 Rabbit Anti-rat IgG/PE PE標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56745 Rabbit Anti-rat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56746 Rabbit Anti-rat IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56747 Rabbit Anti-rat IgG/APC APC標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56748 Rabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56749 Rabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56750 Rabbit Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56751 Rabbit Anti-rat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
56752 Rabbit Anti-rat IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56753 Rabbit Anti-rat IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56754 Rabbit Anti-rat IgM/APC APC標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56755 Rabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56756 Rabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56757 Rabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56758 Rabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56759 Rabbit Anti-rat IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56760 Rabbit Anti-rat IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗大鼠IgM 0.3ml
56761 Rabbit Anti-rat IgM/FITC FITC標記的兔抗大鼠IgM 0.3ml
56762 Rabbit Anti-rat IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56763 Rabbit Anti-rat IgM/Gold 膠體金標記的兔抗大鼠IgM 0.5ml
56764 Rabbit Anti-rat IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56765 Rabbit Anti-rat IgM/Bio *標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56766 Rabbit Anti-rat IgM/Cy3 人抗DNA酶B抗體(anti-DNase B)ELISA試劑盒Cy3標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56767 Rabbit Anti-rat IgM/Cy5 Cy5標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56768 Rabbit Anti-rat IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
56769 Rabbit Anti-rat IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗DNA酶B抗體(anti-DNase B)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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