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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2016-12-31 20:59:13瀏覽次數(shù):71次
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人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
56932 anti-Melamine 抗三聚氰胺抗體 0.2ml
56933 Anti-14-3-3 14-3-3 蛋白抗體 0.1ml
56934 Anti-2,4-D 2,4-二氯苯氧乙酸 /除草劑/激素型除草劑抗體 0.1ml
56935 Anti-5-HT 5-羥色胺抗體 0.1ml
56936 Anti-5-HTR1A 5-羥色胺受體1A抗體 0.1ml
56937 Anti-5-HT1B 5-羥色胺受體1B抗體 0.1ml
56938 Anti-5-HTR2A 5-羥色胺受體2A抗體 0.1ml
56939 Anti-5-LOX 5-脂氧合酶抗體 0.1ml
56940 anti-8-OHdG 8-羥基脫氧鳥苷 0.2ml
56941 Anti-AACT-α1 α-1抗胰*抗體 0.1ml
56942 Anti-AAT α-1抗*抗體 0.2ml
56943 Anti-AATF 拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.2ml
56944 Anti-ABCB6 ABCB6抗體 0.2ml
56945 Anti-ABCG1 三磷酸腺苷結(jié)合盒G1抗體 0.2ml
56946 Anti-ABCG2 三磷酸腺苷結(jié)合盒G2抗體 0.2ml
56947 Anti-ABL1 ABL1抗體 0.1ml
56948 Anti-ABL2 ABL2抗體 0.2ml
56949 Anti-ACE1 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抗體 0.1ml
56950 Anti-ACEI 血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體 0.1ml
56951 Anti-Acinus 腺泡Acinus抗體 0.1ml
56952 Anti-Ack1 Ack1抗體 0.2ml
56953 Anti-β-Actin β-肌動(dòng)蛋白抗體 0.1ml
56954 Anti-ACTH 促腎上腺皮質(zhì)激素抗體 0.1ml
56955 Anti-Actin α /α-SMA 肌動(dòng)蛋白α抗體 0.1ml
56956 Anti-AD7C-NTP/NTP/AF 神經(jīng)絲蛋白抗體 0.1ml
56957 Anti-ADAM-TS1/METH1 整合素樣金屬蛋白酶與*1型 0.2ml
56958 Anti-ADAM-TS7 整合素樣金屬蛋白酶與*1型-7 0.2ml
56959 Anti-Adducin protein 內(nèi)收蛋白抗體 0.2ml
56960 Anti-ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
56961 Anti-Adipo R1 脂聯(lián)素受體-1抗體 0.1ml
56962 Anti-Adipo R2 脂聯(lián)素受體-2抗體 0.1ml
56963 Anti-Adiponectin 脂聯(lián)素抗體 0.1ml
56964 Anti-ADM 腎上腺髓質(zhì)素抗體 0.1ml
56965 Anti-ADM R 腎上腺髓質(zhì)素受體抗體 0.1ml
56966 Anti-ADNP/NAP 活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體 0.1ml
56967 Anti-ADORA3/A3AR 腺苷受體A3 0.2ml
56968 Anti-ADRA1 alpha-1腎上腺素能受體抗體 0.2ml
56969 Anti-ADRA2 alpha-2腎上腺素能受體抗體 1ml
56970 Anti-ADRB1 腎上腺素能受體β1抗體 0.1ml
56971 Anti-ADRB2 腎上腺素能受體β2抗體 0.1ml
56972 Anti-ADRB3/β3-AR 腎上腺素能受體β3抗體 0.2ml
56973 Anti-AE3 陰離子交換蛋白3抗體 0.1ml
56974 Anti-AEBP1 脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1 0.1ml
56975 Anti-AFP 鼠抗人甲胎蛋白抗體 0.1ml
56976 Anti-AGER 晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體 0.1ml
56977 Anti-AGEs 晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體 0.1ml
56978 Anti-Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗體 0.1ml
56979 Anti-Agrin 聚集蛋白抗體 0.2ml
56980 Anti-AhDMT 1 抗植物蛋白大豆、花生AhDMT-1抗體 1mg
56981 Anti-AIF 調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體 0.1ml
56982 Anti-AK-1 腺苷酸激酶-1 0.1ml
56983 Anti-ALK/CD246Ag 間變型淋巴瘤激酶抗體 0.1ml
56984 Anti-AMACR/P504S α-甲基?;?消旋酶抗體 0.2ml
56985 Anti-AMPK alpha-1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 0.2ml
56986 Anti-AMPKβ1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體 0.2ml
56987 Anti-Amylin 糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體 0.1ml
56988 Anti-β-Amyloid 1-42 CT β淀粉樣肽1-42 0.1ml
56989 Anti-β-Amyloid β淀粉樣肽抗體 0.1ml
56990 Anti-β-Amyloid 1-40 β淀粉樣肽 1-40 C端抗體 0.1ml
56991 Anti-Ang-Ⅱ 人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒血管緊張素II抗體 0.1ml
56992 Anti-Angiotensin II receptor 血管緊張素Ⅱ受體抗體 0.2ml
56993 Anti-ANGPTL1/ANG-1 血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗體 0.2ml
56994 Anti-ANGPTL2/ANG-2 血管位蛋白樣2/血管生成素樣蛋白-2抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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