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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
56996 Anti-Annexin A 膜粘連蛋白-A抗體 0.2ml
56997 Anti-Annexin II 膜粘連蛋白-2抗體 0.2ml
56998 Anti-Annexin V 膜粘連蛋白-5抗體 0.1ml
56999 Anti-Annexin V 重組膜粘連蛋白-5抗體 0.1ml
57000 Anti-AP1 銜接蛋白1抗體 0.2ml
57001 Anti-Apaf-1 凋亡蛋白活性因子-1抗體 0.1ml
57002 Anti-APC APC活化蛋白C抗體 0.2ml
57003 anti-apoD 載脂蛋白D抗體 0.2ml
57004 Anti-Apo-E 載脂蛋白E抗體 0.1ml
57005 Anti-APP695/770 淀粉樣肽前體蛋白抗體 0.1ml
57006 Anti-AQP-2 水通道蛋白-2抗體 0.1ml
57007 Anti-AQP-3 水通道蛋白-3抗體 0.1ml
57008 Anti-AQP4 水通道蛋白-4抗體 0.1ml
57009 Anti-AR 雄激素受體抗體 0.1ml
57010 Anti-ARC ARC抗體 0.2ml
57011 Anti-ARF6 ADP核糖基化因子6抗體 0.2ml
57012 Anti-Aromatase P450 芳香化酶/細胞色素P450/P450抗體 0.1ml
57013 anti-ARIP2a 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體 0.1ml
57014 anti-β-arrestin 1/2 β-抑制蛋白1/2抗體 0.1ml
57015 anti-ARIP2B 激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體 0.2ml
57016 Anti-ART 膠質細胞系源性神經營養因子GDNF的一種抗體 0.1ml
57017 Anti-ARα1 α1腎上腺素能受體抗體 0.1ml
57018 Anti-ASCL1/MASH1 神經母細胞特異性轉移因子抗體 0.1ml
57019 anti-ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1抗體 0.1ml
57020 anti-ASPP2 P53凋亡刺激蛋白2 0.1ml
57021 Anti-AT/AGT 血管緊張素原抗體 0.1ml
57022 Anti-AT1R 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 0.2ml
57023 Anti-ATF1 活化復制因子1抗體 0.1ml
57024 Anti-ATF2 活化復制因子2抗體 0.2ml
57025 Anti-ATF3 活化轉錄因子3抗體 0.2ml
57026 Anti-B7-H1/PDL1/CD274 程序性死亡配體1抗體 0.1ml
57027 Anti-B7-H4 B7H4抗體 0.2ml
57028 Anti-BACE/ASP2 β分泌酶抗體 0.1ml
57029 Anti-Bad 相關死亡促進因子Bad抗體 0.1ml
57030 anti-Bak Bcl-2同源拮抗劑Bak抗體 0.1ml
57031 Anti-BADH2 BADH2抗體 0.1ml
57032 Anti-Bassoon/RCN 鋅指蛋白231抗體 0.2ml
57033 Anti-Bax Bax抗體 0.1ml
57034 Anti-Bcl-2 Bcl-2抗體 0.1ml
57035 Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21 乳腺癌耐藥相關蛋白抗體 0.1ml
57036 Anti-BDNF 腦源神經營養因子/腦衍化神經營養因子 0.1ml
57037 Anti-Beta-casein β-酪蛋白兔抗山羊、綿羊 0.2ml
57038 anti-bov β-lactoglobulin 牛β-乳球蛋白抗體 1.0ml
57039 anti-bov Casein 抗牛酪蛋白抗體 1.0ml
57040 Anti-BFGF/FGF-2 堿性成纖維細胞生長因子抗體 0.1ml
57041 Anti-BGP 骨保護蛋白/骨鈣素抗體 0.1ml
57042 Anti-Bid BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體 0.1ml
57043 Anti-BIRC5/Survivin variant 細胞凋亡抑制因子5抗體 0.1ml
57044 Anti-BK channel BK通道蛋白抗體 0.1ml
57045 Anti-BKCa channels 鈣激活鉀通道蛋白抗體 0.1ml
57046 Anti-BMP2 骨形態發生蛋白-2抗體 0.1ml
57047 Anti-BMP-7 骨形態發生蛋白-7抗體 0.2ml
57048 Anti-BNP 腦鈉素/利鈉肽抗體 0.1ml
57049 Anti-BNP/Biotin *化腦鈉肽 0.5ml
57050 Anti-BRAF 黑素瘤相關蛋白抗體 0.2ml
57051 Anti-BRCA1 人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒 乳腺癌易感基因1抗體 0.2ml
57052 Anti-BRCA2 乳腺癌易感基因2抗體 0.2ml
57053 Anti-BrdU 溴脫氧尿苷抗體 0.1ml
57054 Anti-BRMS-1 乳腺癌轉移抑制基因1抗體 0.1ml
57055 Anti-RCA 兔抗牛血清白蛋白抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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