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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
58715 產毒培養基 Toxin-Producing Medium 青霉、曲霉的產毒培養 250克
58716 葡萄球菌增菌肉湯 Staphylococcus Enrichment Broth 凝固酶陽生葡萄球菌選擇性增菌 250克
58717 貝爾德-帕克瓊脂 Baird Parker Agar 凝固酶陽生葡萄球菌的選擇性分離培養 250克
58718 CHAPMAN瓊脂 Baird Parker Agar 10 用于*的分離培養 250克
58719 卵黃*高鹽瓊脂基礎 Egg-Yolk Mannitol Salt Agar Base *的分離培養 250克
58720 改良Giolitti-Cantobi肉湯 Modified Giolitti-Cantobi Broth 用于*的增菌培養 250克
58721 *鹽瓊脂 Mannitol Salt Aga *的選擇性分離培養 250克
58722 卵黃氯化鈉瓊脂培養基 Egg-Yolk Salt Agar *的選擇性分離 250克
58723 LES ENDO瓊脂 Membrane Endo Agar LES 膜過濾水中大腸桿菌計數 250克
58724 Endo培養基 Endo Agar 大腸菌群的檢測 250克
58725 RVS肉湯 RVS Broth 食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌 250克
58726 MKTTN肉湯 MKTTN Broth 食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌 250克
58727 LIA瓊脂 Lysine Iron Agar 食品中沙門氏菌生化試驗 250克
58728 動力吲哚*培養基 MIO Medium 動力、吲哚和*試驗 250克
58729 D-E中和肉湯 E Neutralizing Broth 經防腐劑或消毒劑處理的樣品增菌培養 250克
58730 D-E中性瓊脂 E Neutralizing Agar 衛生環境中微生物的分離培養, 消毒效果測定 250克
58731 M肉湯 M-Broth 牛奶和乳制品中乳酸菌檢測和增菌培養 250克
58732 BGS瓊脂 BGS Agar 沙門氏菌分離培養 250克
58733 XLD瓊脂培養基 Xylose Lysine Desoxycholate Medium 分離志賀氏菌屬和沙門氏菌 100克
58734 脫氧膽酸鈉枸櫞酸鹽瓊脂 Desoxycholate Citrate Agar 細菌總數的測定和分離培養,沙門氏菌分離培養 250克
58735 DCLS瓊脂 DCLS Agar 致病性腸桿菌的分離 250克
58736 Vogel-Johnson瓊脂 VJ Agar 病源標本和其他標本中*陽性*的選擇性分離 250克
58737 NAC瓊脂培養基 NAC Agar Medium 假單胞菌屬分離培養 100克
58738 PDA瓊脂 Potato Dextrose Agar 霉菌分離培養和霉菌酵母菌計數 250克
58739 亮綠瓊脂培養基 Brilliant Green Agar 沙門氏菌分離培養 250克
58740 梭菌培養基 Clostridium Enrichment Medium 用于梭菌增菌培養 250克
58741 哥倫比亞瓊脂培養基 Columbia Agar Medium 營養要求較高的細菌的培養基及溶血試驗,梭菌的檢測 250克
58742 哥倫比亞4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養基 Columbia-MUG Medium 大腸桿菌的熒光檢測 250克
58743 安德雷德氏糖類肉湯 Andrade,s Carbohydrate Broth 細菌的糖發酵試驗 250克
58744 OF培養基 HLGB 細菌的氧化發酵試驗 250克
58745 EYA培養基基礎 Egg Yolk Agar Medium Base 肉毒梭菌、產氣莢膜梭菌的分離培養 250克
58746 蠟樣芽孢桿菌動力試驗 250克
58747 強化梭菌鑒別瓊脂 DRCA 食品和其他物質中梭菌的計數和培養 250克
58748 強化梭菌培養基 RCM 梭菌的增菌培養和計數 250克
58749 TBB培養基 Tybobutyricum Broth Base 乳酪產品中梭菌的計數 250克
58750 SCHAEDLER厭氧菌瓊脂 SCHAEDLER Agar 厭氧菌的分離培養 250克
58751 WILKINS-CHALGREN厭氧菌瓊脂 WILKINS-CHALGREN Agar 厭氧菌的分離培養 250克
58752 產氣莢膜梭菌瓊脂 MCP Agar 產氣莢膜梭菌的計數和培養 250克
58753 GAM瓊脂 Anaerobic Agar 用于梭菌和其他厭氧菌的分離培養 250克
58754 GAM肉湯 Anaerobic Broth 用于專性厭氧菌培養 250克
58755 乳糖-明膠培養基 Lactose-Gelatin Medium 產氣莢膜梭菌明膠液化試驗 250克
58756 TSC瓊脂 TSC Agar 產氣莢膜梭菌的平板計數 250克
58757 PY培養基 PY Medium 產氣莢膜梭菌的培養 250克
58758 產芽孢肉湯 Sporulation Broth 產氣莢膜梭菌的產芽孢培養 250克
58759 Hektoen瓊脂培養基 Hektoen Enteric Agar 用于沙門氏菌屬和志賀菌屬的分離培養 250克
58760 克氏鐵瓊脂人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒 KIA 腸桿菌科的初步鑒定 100克
58761 脫氧膽酸鈉瓊脂 DCLA 大腸菌群的平板測定以及腸道菌的選擇性培養 250克
58762 中國藍瓊脂 China Blue Lactose Agar 弱選擇性培養基,腸道致病菌選擇分離 250克
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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