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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗唾液腺導管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗唾液腺導管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗唾液腺導管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
59128 10毫升
59129 Rambach瓊脂 Rambach瓊脂 *快速顯色分離培養 250克
59130 耶爾森氏菌顯色培養基 耶爾森氏菌顯色培養基 耶爾森氏菌快速顯色分離培養 250克
59131 乳酸菌檢測計數顯色培養基 乳酸菌檢測計數顯色培養基 乳酸菌快速顯色分離培養 250克
59132 蠟樣芽孢桿菌計數顯色培養基 蠟樣芽孢桿菌計數顯色培養基 蠟樣芽孢桿菌快速顯色分離培養 250克
59133 克雷伯氏顯色培養基 克雷伯氏顯色培養基 克雷伯氏菌快速顯色分離培養 250克
59134 馬丁肉湯 馬丁肉湯 豬肺疫、牛肺疫、兔出敗等疫苗生產及檢驗用 1萬毫升/袋
59135 肉肝胃消化干粉培養基 肉肝胃消化干粉培養基 豬丹毒、牛副傷寒疫苗生產 1萬毫升/袋
59136 鏈球菌生產培養基 鏈球菌生產培養基 鏈球菌疫苗生產及檢驗用 1萬毫升/袋
59137 仔副菌生產培養基 仔副菌生產培養基 仔豬副傷寒疫苗制備 1萬毫升/袋
59138 酵母蛋白胨培養基 酵母蛋白胨培養基 制備豬巴氏桿菌滅活疫苗 1萬毫升/袋
59139 *牛肉湯 *牛肉湯 制造快疫疫苗用 1萬毫升/袋
59140 雞鼻炎合成培養基 雞鼻炎合成培養基 雞鼻炎滅活苗制備用 1萬毫升/袋
59141 雙料乳糖膽鹽培養基 Twofold Lactose Bile Salt Broth 用于化妝品中糞大腸菌群的測定 250克
59142 液體乳糖培養基 Lactose Medium 用于食品中沙門氏菌檢驗前增菌培養 250克
59143 乙酰胺酚紅瓊脂 Acetamide Agar 測定綠膿桿菌色素分離、培養 250克
59144 馬鈴薯葡萄糖肉湯 PDB 用于霉菌和酵母菌的培養 250克
59145 明膠瓊脂培養基 Gelatin Agar Medium 檢查細菌的明膠酶的能力 250克
59146 改良Frey氏培養基基礎 Frey Medium Modified Base 培養滑液支原體及其他禽支原體用 250克
59147 *檢定培養基 Nystatin Medium *效價測定用 250克
59148 麥迪、*檢定培養基 Medecamycin Medium 麥迪、*效價測定用 250克
59149 放線菌肉湯培養基 Actinomycete Broth Medium 用于放線菌的增殖培養和保存 250克
59150 彎曲菌血瓊脂基礎 Campylobacter Blood Agar Base 用于彎曲桿菌選擇性分離培養 250克
59151 厭氧肉肝湯 Anaerobic Beef Liver Broth 供一般厭氧菌培養及其制備檢驗用 250克
59152 破傷風梭菌培養基基礎 Clostridium Tetani Medium 供破傷風梭菌產毒用 250克
59153 改良酵母浸汁-孟加拉紅肉湯 Modified Yeast Extract-Rose Bengal Broth 小腸結腸炎耶爾森氏菌冷增菌培養 250克
59154 乳酸菌液體培養基 Lactobacillus Fluid Medium 用于檢測乳酸桿菌 250克
59155 甲苯胺藍-DNA酶瓊脂 Toluidine Blue-O-Dnase Agar 用于核糖核酸酶測定 100克
59156 中國藍薔薇酸瓊脂 中國藍薔薇酸瓊脂 250克
59157 溶脲支原體快速培養基 UU Medium BR 1人份/1支
59158 溶脲支原體培養基 UU Medium BR 100毫升
59159 溶脲支原體抗體 UU Antibody BR 1盒
59160 YT肉湯 YT Broth BR 250克
59161 YT瓊脂 YT Agar BR 250克
59162 2×YT肉湯 2×YT Medium Broth BR 250克
59163 2×YT瓊脂 2×YT Medium Agar BR 250克
59164 細菌篩選培養基 Bacterium Screening Medium BR 100克
59165 500克
59166 香蕉粉 Banana powder BR 100克
59167 500克
59168 ER培養基 Eriksson Medium BR 10升
59169 ER培養基(含維生素) Eriksson Medium with vitamins BR 10升
59170 MS培養基 MS Medium 用于植物組織培養的基礎培養基 250克
59171 MS培養基(含維生素) MS Medium with vitamins BR 10升
59172 Nitsch培養基(含維生素) Nitsch Medium with vitamins BR 10升
59173 Nitsch培養基人抗唾液腺導管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒 Nitsch Medium BR 10升
59174 NLN培養基 NLN Medium 用于植物組織培養 250克
59175 NLN培養基(含維生素) NLN Medium with vitamins BR 10升
59176 Orchimax培養基 Orchimax Medium BR 10升
59177 Orchimax培養基(含木炭) Orchimax Medium with charcoal BR 10升
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗唾液腺導管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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