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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
60126 Anti-Phospho-A Raf (Tyr301/302) 磷酸化A-Raf抗體 0.1ml
60127 Anti-B-Raf B Raf抗體 0.2ml
60128 Anti-c-Raf/Raf1 c Raf/Raf1抗體 0.2ml
60129 Anti-phospho-B-Raf (Ser365) 磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
60130 Anti-phospho-B-Raf (Ser445) 磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
60131 Anti-phospho-B-Raf (Ser601) 磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
60132 Anti-BRCA1/BAP1 乳腺癌易感基因1抗體(人) 0.1ml
60133 Anti-Phospho-BAP1 (Ser592) 磷酸化乳腺癌易感基因1抗體(人) 0.1ml
60134 Anti-Phospho-BRCA1 (Ser1524) 磷酸化乳腺癌易感基因1抗體 0.1ml
60135 Anti-BRCA1/BAP1 乳腺癌易感基因1抗體 0.2ml
60136 Anti-BRCA2 乳腺癌易感基因2抗體 0.1ml
60137 Anti-BrdU 溴脫氧尿苷抗體 0.1ml
60138 Anti-BrdU 溴脫氧尿苷單克隆抗體 0.1ml
60139 Anti-BrdU 溴脫氧尿苷抗體 0.1ml
60140 Anti-BRN3A 轉錄因子Brn3蛋白抗體 0.2ml
60141 Anti-Brs3/Bombesin Receptor 3 蛙皮素受體3抗體 0.1ml
60142 Anti-SMARCA4/SNF2 beta 抑癌基因SNF2β抗體 0.1ml
60143 Anti-Brucella 布魯氏菌抗體 0.2ml
60144 Anti-BRMS-1 乳腺癌轉移抑制基因1抗體 0.1ml
60145 Anti-Brucella 布氏桿菌菌體蛋白抗體 0.2ml
60146 Anti-BSA 牛血清白蛋白抗體 0.1ml
60147 Anti-BSEP 膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體 0.2ml
60148 Anti-Bone sialoprotein 骨涎蛋白抗體 0.2ml
60149 Anti-BTG2/TIS21 B細胞遷移基因2抗體 0.1ml
60150 Anti-BTK/ATK 蛋白*激酶ATK抗體 0.2ml
60151 Anti-Phospho-Btk(Ser180) 磷酸化蛋白*激酶ATK抗體 0.1ml
60152 Anti-Phospho-Btk(Tyr223) 磷酸化蛋白*激酶ATK抗體 0.1ml
60153 Anti-C5a 過敏毒素C5a(補體C5a)抗體 0.2ml
60154 Anti-human C3 補體C3抗體 0.2ml
60155 Anti-C5b-9 末端補體復合物抗體 0.2ml
60156 Anti-CA125 卵巢癌抗原抗體 0.1ml
60157 Anti-CA15-3/MUC1 乳腺癌相關抗原抗體 0.1ml
60158 Anti-CACH2/CaV1.2 L型鈣通道蛋白抗體 0.1ml
60159 Anti-CACNA1G/Cav3.1 電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體 0.1ml
60160 Anti-DFF-40beta/CAD/CPAN Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抗體 0.2ml
60161 Anti-Casein 酪蛋白抗體 0.2ml
60162 Anti-Calcineurin A/PP-2B alpha 1 鈣調磷酸酶抗體 0.2ml
60163 Anti-Caldesmon 鈣介質素抗體 0.2ml
60164 Anti-phosphor-Caldesmon(Ser789) 磷酸化鈣介質素抗體 0.2ml
60165 Anti-Calpain 1 鈣蛋白酶1抗體 0.1ml
60166 Anti-Calpain 2 鈣激活的*2抗體 0.1ml
60167 Anti-Calponin 1 鈣調節(jié)蛋白-1抗體 0.2ml
60168 Anti-Phospho-Troponin I (Ser23/24) 磷酸化鈣調節(jié)蛋白-1抗體 0.1ml
60169 Anti-Calmodulin/CAM 鈣調節(jié)素抗體 0.1ml
60170 Anti-CaMK2a 鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體 0.1ml
60171 Anti-phospho-CaMK2 alpha (Thr286) 磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體 0.1ml
60172 Anti-phospho-CaMK2 alpha (Tyr231) 磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體 0.1ml
60173 Anti-Camk1g 鈣/鈣調蛋白依賴蛋白激酶IG抗體 0.2ml
60174 Anti-CaMK2 beta 鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2b抗體 0.1ml
60175 Anti-CAP1 CAP1抗體 0.2ml
60176 Anti-CAP2 環(huán)化酶相關蛋白CAP-2抗體 0.2ml
60177 Anti-CTn1 心肌肌鈣蛋白抗體 0.1ml
60178 Anti-CT-1/CTF1 心肌營養(yǎng)素1抗體 0.1ml
60179 Anti-CA I 碳酸酐酶1抗體 人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒 0.2ml
60180 Anti-CTNNAL1 粘附分子相關蛋白a1抗體 0.1ml
60181 Anti-CA II 碳酸酐酶2抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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