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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
60464 Anti-Gentamicin *抗體 0.2ml
60465 Anti-Tetracycline 四環素抗體 0.2ml
60466 Anti-Gentamicin Monoclonal Antibody *單克隆抗體 0.2ml
60467 Anti-Oxytetracycline *抗體 0.2ml
60468 Anti-Metronidazole *抗體 0.2ml
60469 Anti-Metronidazole *單克隆抗體 0.2ml
60470 Anti-WBSCR14/ChREBP 糖類應答元件結合蛋白ChREBP抗體 0.2ml
60471 Anti-ChRM2 毒蕈堿型乙酰*受體抗體 0.2ml
60472 Anti-ChRM1 毒蕈堿型乙酰*受體M1抗體 0.1ml
60473 Anti-ChRM2 毒蕈堿型乙酰*受體M2抗體 0.1ml
60474 Anti-ChRM3 毒蕈堿型乙酰*受體M3抗體 0.1ml
60475 Anti-CIDEB 促進凋亡基因抗體 0.2ml
60476 anti-CIB1 鈣整合素結合蛋白1抗體 0.2ml
60477 Anti-C-jun 原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體 0.1ml
60478 Anti-phospho-c-Jun/AP-1(Thr91+Thr93) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml
60479 Anti-phospho-c-Jun (Ser73) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml
60480 Anti-phospho-c-Jun (Ser243) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml
60481 Anti-phospho-c-Jun (Thr93) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml
60482 Anti-phospho-c-Jun (Ser63) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml
60483 Anti-Jun B 活化蛋白激酶B抗體 0.2ml
60484 Anti-Jun D 活化蛋白激酶D抗體 0.2ml
60485 Anti-CK I alpha/STK 屬絲/*蛋白質激酶抗體 0.2ml
60486 Anti-CK II Alpha/STK 屬絲/*蛋白質激酶抗體 0.2ml
60487 Anti-CK II alpha/STK 屬絲/*蛋白質激酶抗體 0.2ml
60488 Anti-P-CK 廣譜細胞角蛋白PCK抗體 0.1ml
60489 Anti-CK18 細胞角蛋白18抗體 0.1ml
60490 Anti-CK18 細胞角蛋白18抗體(C端) 0.1ml
60491 Anti-CK18 細胞角蛋白18抗體 0.1ml
60492 Anti-CK14/17/42/10 細胞角蛋白14抗體 0.1ml
60493 Anti-CK15 細胞角蛋白15抗體 0.2ml
60494 Anti-CK16 細胞角蛋白16抗體 0.1ml
60495 Anti-CK17 細胞角蛋白17抗體 0.2ml
60496 Anti-Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) 磷酸化細胞角蛋白17抗體 0.1ml
60497 Anti-CK19 細胞角蛋白19抗體 0.1ml
60498 Anti-CK19 細胞角蛋白19抗體 0.1ml
60499 Anti-CK20 細胞角蛋白20抗體 0.2ml
60500 Anti-CK1/8/19 細胞角蛋白1/8/19抗體 0.1ml
60501 Anti-CK2 細胞角蛋白2抗體 0.1ml
60502 Anti-CK3 細胞角蛋白3抗體 0.1ml
60503 Anti-CK4 細胞角蛋白4抗體 0.1ml
60504 Anti-CK5 細胞角蛋白5抗體 0.1ml
60505 Anti-CK7 細胞角蛋白7抗體 0.2ml
60506 Anti-CK7 抗細胞角蛋白7抗體 0.2ml
60507 Anti-CK10 細胞角蛋白10抗體 0.2ml
60508 Anti-CK5+6 細胞角蛋白5+6抗體 0.1ml
60509 Anti-CK6 細胞角蛋白6抗體 0.1ml
60510 Anti-CK8 細胞角蛋白8抗體 0.1ml
60511 Anti-CKLFSF2 趨化素樣因子超家族成員2抗體 1ml
60512 Anti-CK1+5+10+14 高分子量角蛋白抗體 0.2ml
60513 Anti-CK-HMW 高分子量細胞角蛋白抗體 0.2ml
60514 anti-CKIP-1 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗體 0.2ml
60515 Anti-CKMT2 肌酸磷酸激酶2抗體 人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA試劑盒 0.2ml
60516 Anti-Clostridium perfringens type D D型產氣莢膜梭菌抗體 0.5ml
60517 Anti-CITED1/ABCC1 結合轉化激活因子CITED1抗體 0.2ml
60518 Anti-CLCA4 鈣激活氯離子通道4抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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