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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
60578 Anti-Phospho-CRMP-2 (Thr514) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體 0.1ml
60579 Anti-CRLR/CGRPR1 降鈣素基因相關肽1型受體抗體 0.1ml
60580 Anti-SLAMF7/CD319 SLAMF7抗體 0.2ml
60581 Anti-CRP C-反應蛋白抗體 0.1ml
60582 Anti-CRP C-反應蛋白單克隆抗體 0.2ml
60583 Anti-CREB-1 環腺苷酸應答元件結合蛋白抗體 0.1ml
60584 Anti-CREB-1 環腺苷酸應答元件結合蛋白抗體 0.1ml
60585 Anti-phospho-CREB-1(Ser133) 磷酸化CREB-1抗體 0.1ml
60586 Anti-CRF/CRH 促腎上腺皮質激素釋放因子抗體 0.1ml
60587 Anti-CRF/CRH 促腎上腺皮質激素釋放因子抗體 0.1ml
60588 Anti-CRHR1/CRFR1 促腎上腺皮質釋放激素受體1抗體 0.2ml
60589 Anti-CRHR2/CRFR2 促腎上腺皮質釋放激素受體2抗體 0.2ml
60590 Anti-CSIG 細胞衰老抑制基因抗體 0.2ml
60591 Anti-Cripto-1(NT) 畸胎瘤衍化生長因子抗體(N端) 0.2ml
60592 Anti-Cripto-1 畸胎瘤衍化生長因子抗體(C端) 0.2ml
60593 Anti-CSMD1 CSMD1抗體 0.2ml
60594 Anti-CRTAM CRTAM抗體 0.2ml
60595 Anti-CSP 環子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體 1ml
60596 Anti-C-SKI/v-SKI C-SKI抗體 0.1ml
60597 Anti-Calcitonin 降鈣素抗體 0.1ml
60598 Anti-Calcitonin 降鈣素抗體 0.1ml
60599 Anti-CTBP1 C端結合蛋白1抗體 0.2ml
60600 Anti-CT DNA (calf thymus DNA) 小牛胸腺DNA 抗體 0.2ml
60601 Anti-CTGF 結締組織生長因子抗體 0.1ml
60602 Anti-CD150/SLAM 信號淋巴細胞活化分子CD150抗體 0.2ml
60603 Anti-CD151/MER2/PETA-3 CD151抗體 0.2ml
60604 Anti-CD155/PVR 脊髓灰質炎病毒受體抗體 0.2ml
60605 Anti-CTLA-4/CD152 細胞毒性T細胞抗原-4抗體 0.1ml
60606 Anti-CTR1/Calcitonin receptor 降鈣素受體抗體 0.1ml
60607 Anti-Cullin/C10orf46 CULLIN抗體 0.2ml
60608 Anti-Cullin 4a Cullin 4a蛋白抗體 0.2ml
60609 Anti-Connexin-26 間隙連接蛋白26抗體 0.2ml
60610 Anti-Connexin-32 間隙連接蛋白32抗體 0.1ml
60611 Anti-Connexin-36 間隙連接蛋白36抗體 0.2ml
60612 Anti-Connexin-40 間隙連接蛋白40抗體 0.1ml
60613 Anti-Connexin 43 Cx-43蛋白抗體 0.1ml
60614 Anti-Phospho-Connexin 43 (Ser368) 磷酸化Connexin 43蛋白抗體 0.1ml
60615 Anti-Connexin-45 間隙連接蛋白45抗體 0.1ml
60616 Anti-CXCR1/IL-8RA 細胞表面趨化因子受體1抗體 0.1ml
60617 Anti-CXCR2/CD182 細胞表面趨化因子受體2抗體 0.1ml
60618 Anti-CX3CL1 CX3CL1抗體 0.1ml
60619 Anti-CX3CR1 趨化因子受體1抗體 0.2ml
60620 Anti-CXorf36 脫羧酶蛋白體36抗體 0.2ml
60621 Anti-CXorf36 脫羧酶蛋白體36抗體 0.2ml
60622 Anti-Cyclin A 周期素A抗體 0.1ml
60623 Anti-Cyclin B1 周期素B1抗體 0.1ml
60624 Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser147) 磷酸化周期素B1抗體 0.1ml
60625 Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser133) 磷酸化周期素B1抗體 0.1ml
60626 Anti-Cyclin C 周期素C抗體 0.1ml
60627 Anti-Cyclin D1 周期素D1抗體 0.1ml
60628 Anti-Phospho-Cyclin D1 (Thr286) 磷酸化cyclin D1抗體 0.1ml
60629 Anti-Cyclin D2 周期素D2抗體 0.1ml
60630 Anti-Cyclin D3 周期素D3抗體 0.2ml
60631 Anti-Cyclin E 周期素E抗體人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒 0.1ml
60632 Anti-phospho-Cyclin E(Thr395) 磷酸化周期素E抗體 0.1ml
60633 Anti-phospho-Cyclin E(Thr62) 磷酸化周期素E抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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