人肝細(xì)胞生長因子受體(cMET/HGFR)ELISA試劑盒說明書
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更新時間:2017-01-28 19:36:49瀏覽次數(shù):143次
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人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
60800 Anti-EpCAM/CD326 上皮細(xì)胞粘附分子抗體 0.2ml
60801 Anti-E.coli O6 大腸桿菌埃希桿菌O6抗體(腸致病性大腸桿菌O6) 0.2ml
60802 Anti-E.coli DH-5 Alpha DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體 0.1ml
60803 Anti-E.coli O157:H7 大腸桿菌埃希氏菌O157抗體(腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7) 0.1ml
60804 Anti-EPEC/E.coli 腸致病性大腸桿菌抗體 0.2ml
60805 Anti-E.coli/EPEC 抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體 0.1ml
60806 Anti-E.coli O139 抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139) 0.2ml
60807 Anti-EP3 前列腺素E受體3抗體 0.2ml
60808 Anti-Ephrin A1 EphA1抗體 0.2ml
60809 Anti-EphA4 *蛋白激酶A4抗體 0.2ml
60810 Anti-Ephrin B Ephrin B抗體 0.2ml
60811 Anti-phospho-Ephrin B (Tyr331) 磷酸化Ephrin B抗體 0.1ml
60812 Anti-phospho-Ephrin B (Tyr317) 磷酸化Ephrin B抗體 0.1ml
60813 Anti-phospho-Ephrin B (Tyr298) 磷酸化Ephrin B抗體 0.1ml
60814 Anti-phospho-Ephrin B (Tyr324/329) 磷酸化Ephrin B抗體 0.1ml
60815 Anti-EphA2/Eph receptor A2 內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白*激酶抗體 0.1ml
60816 Anti-Phospho-EphA2 (Tyr594) 磷酸化*蛋白激酶A2受體抗體 0.1ml
60817 Anti-EphA4 R *蛋白激酶A4受體抗體 0.2ml
60818 Anti-EphB2 R EphB2 R抗體 0.1ml
60819 Anti-EPOR 紅細(xì)胞生成素受體抗體 0.1ml
60820 Anti-EphB6 *蛋白激酶受體B6抗體 0.2ml
60821 Anti-ER-alpha 雌激素受體α抗體 0.1ml
60822 Anti-ERAB 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
60823 Anti-ERCC1 DNA切除修復(fù)蛋白1抗體 0.2ml
60824 Anti-ERK2/MAPK1 絲裂原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml
60825 Anti-phospho-MEK1/MAPKK1(Ser298) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體 0.1ml
60826 Anti-phospho-MEK1 (Thr286) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體 0.1ml
60827 Anti-Phospho-MEK1/2 (Ser217/221) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體 0.1ml
60828 Anti-Phospho-MEK1/2 (Ser221) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體 0.1ml
60829 Anti-phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 0.1ml
60830 Anti-phospho-ERK1(Thr202/Tyr204) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml
60831 Anti-ERK1/2(p44/42 MAPK) 絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 0.2ml
60832 Anti-phospho-p44/42 MAPK (Thr202/Tyr204) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 0.1ml
60833 Anti-phospho-ERK1(Thr202/Thr204)+ERK2(Thr183/Tyr185) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 0.1ml
60834 Anti-phospho-ERK1(Thr197/Thr202) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 0.2ml
60835 Anti-Eph receptor B2/Ephb2 Ephb2抗體 0.1ml
60836 Anti-ERK1/MAPK3 絲裂原活化蛋白激酶3抗體 0.1ml
60837 Anti-MAPK4 絲裂原活化蛋白激酶4抗體 0.1ml
60838 Anti-DUSP1/MKP-1 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 0.2ml
60839 Anti-Phospho-MKP1 (Ser359) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 0.1ml
60840 Anti-Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 0.1ml
60841 Anti-MKP-2/DUSP4 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗體 0.2ml
60842 Anti-ER-alpha 雌激素受體α抗體 0.1ml
60843 Anti-ER/PR/c-erbB-2 Kit(mo monoclonal) ER/PR/c-erbB-2檢測試劑盒(鼠單抗) 30人份
60844 Anti-Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167) 磷酸化雌激素受體ER alpha 抗體 0.1ml
60845 Anti-Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537) 磷酸化雌激素受體α抗體 0.1ml
60846 Anti-Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118) 磷酸化雌激素受體α抗體 0.1ml
60847 Anti-Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106) 磷酸化雌激素受體α抗體 0.1ml
60848 Anti-ER-Alpha 雌激素受體α抗體(用于western blot) 0.1ml
60849 Anti-ER-Alpha 雌激素受體α抗體 0.1ml
60850 Anti-ER-alpha/beta 雌激素受體α/β抗體 0.1ml
60851 Anti-ER-beta 人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒 雌激素受體β 抗體 0.1ml
60852 Anti-ER-Beta 雌激素受體β抗體 0.1ml
60853 Anti-EpCAM/CD326 上皮特異性抗原抗體 0.2ml
60854 Anti-ET-1 內(nèi)皮素-1抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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