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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
61025 Anti-GDF8/MSTN 生長分化因子8抗體 0.2ml
61026 Anti-GDF8 羊抗生長分化因子8/肌肉抑制素抗體 0.2ml
61027 Anti-GDF-9 生長分化因子9抗體 0.2ml
61028 Anti-GDNF 膠質細胞源性神經營養因子抗體 0.1ml
61029 Anti-Gelsolin 凝溶膠蛋白抗體 0.2ml
61030 Anti-GFAP 膠質纖維酸性蛋白抗體 0.1ml
61031 Anti-GFP 綠色熒光蛋白(免疫組化用抗體) 0.2ml
61032 Anti-GFP 綠色熒光蛋白抗體 0.2ml
61033 Anti-GFP 綠色熒光蛋白抗體 0.2ml
61034 Anti-EGFP Tag 重組增強型綠色熒光蛋白標簽抗體 0.1ml
61035 Anti-GFRA4 GDNF家族受體α-4抗體 0.2ml
61036 Anti-GFR Alpha-1 GDNF家族受體α-1抗體 0.1ml
61037 Anti-GHR 生長激素受體抗體 0.1ml
61038 Anti-Ghrelin 腦腸肽抗體 0.1ml
61039 Anti-GHRF/GHRH 生長激素釋放激素抗體 0.1ml
61040 Anti-ID1 DNA結合抑制因子1抗體 0.2ml
61041 Anti-GIG8/ID2 DNA結合抑制因子2抗體 0.1ml
61042 Anti-GIP 胃泌素抑制肽抗體 0.2ml
61043 Anti-TNFRSF18 糖皮質激素誘導腫瘤壞死因子受體抗體 0.2ml
61044 Anti-Glasses Snake poison Protein 兔抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體(眼鏡蛇) 0.2ml
61045 Anti-GLI1 下游轉錄因子Gli1蛋白抗體 0.2ml
61046 Anti-GLP-1 (7-36) 胰高血糖素樣肽-1抗體 0.1ml
61047 Anti-GLP-1 胰高血糖素樣肽-1抗體 0.1ml
61048 Anti-GLP-1/KG-31 GLP-1單克隆抗體 0.1ml
61049 Anti-GLP-1R 胰高血糖素樣肽-1受體抗體 0.1ml
61050 Anti-GLP-2 胰高血糖素樣肽-2抗體 0.2ml
61051 Anti-GLP-2 胰高血糖素樣肽-2抗體 0.2ml
61052 Anti-GLUT1 葡萄糖轉運蛋白1抗體 0.1ml
61053 Anti-GLUT2 葡萄糖轉運蛋白2抗體 0.2ml
61054 Anti-GLUT3 葡萄糖轉運蛋白3抗體 0.2ml
61055 Anti-GLUT4 葡萄糖轉運蛋白4抗體 0.1ml
61056 Anti-GlyR alpha 1/2/3 *受體alpha 1/2/3型抗體 0.2ml
61057 Anti-GLUT12/slc2a12 葡萄糖轉運蛋白12抗體 0.2ml
61058 Anti-E1 glycoprotein 風疹病毒糖蛋白抗體 0.2ml
61059 Anti-GM-CSF 粒細胞-巨噬細胞克隆刺激因子抗體 0.1ml
61060 Anti-GM-CSFR alpha/CD116 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體α抗體 0.2ml
61061 Anti-GM-CSFR Beta 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體β抗體 0.2ml
61062 Anti-Fx1A 腎刷狀緣抗體 0.2ml
61063 Anti-GP65/SDFR1/NPTN 間質細胞衍化因子受體1抗體 0.2ml
61064 Anti-GPA33 糖蛋白A33抗體 0.2ml
61065 Anti-GNLY/NKG5 顆粒溶素抗體 0.2ml
61066 Anti-GPNMB/Osteoactivin GPNMB抗體 0.2ml
61067 Anti-glypican 1 磷脂?;嫉鞍拙厶?1抗體 0.2ml
61068 Anti-glypican 3/GPC3 磷脂?;嫉鞍拙厶?3抗體 0.1ml
61069 Anti-Glypican 4 磷脂酰基醇蛋白聚糖-4抗體 0.2ml
61070 Anti-Glycodelin A/PP14 胎盤蛋白14抗體 0.2ml
61071 Anti-Glucocorticoid receptor 糖皮質激素受體抗體 0.2ml
61072 Anti-Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211) 磷酸化糖皮質激素受體抗體 0.1ml
61073 Anti-GRB2/ASH 生長因子受體結合蛋白2抗體 0.2ml
61074 Anti-GZMA 顆粒酶A抗體 0.2ml
61075 Anti-GZMB/CCPI 人單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒 顆粒酶B抗體 0.1ml
61076 Anti-Granzyme D/B/E/N/G/F/H 顆粒酶D/B/E/N/G/F/H抗體 0.1ml
61077 Anti-GRB10 生長因子受體結合蛋白10抗體 0.2ml
61078 Anti-Phospho-GRB10 (Tyr67) 磷酸化生長因子受體結合蛋白10 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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