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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
61250 Anti-Heme Oxygenase 1/HO-1 血紅素氧合酶 1/熱休克蛋白32抗體 0.1ml
61251 Anti-Heme Oxygenase 1/HO-1 血紅素氧合酶 1/熱休克蛋白32抗體 0.1ml
61252 Anti-HO-2 血紅素氧合酶2抗體 0.1ml
61253 Anti-HOXB4 HOXB4抗體 0.2ml
61254 Anti-HOXc8 HOXc8抗體 0.2ml
61255 Anti-PSGD/HOXB13 同源盒蛋白HOXB13抗體 0.2ml
61256 Anti-Heparanase 乙酰肝素酶抗體 0.1ml
61257 Anti-phospho-HP1 alpha (Tyr24) 磷酸化異染色質蛋白1抗體(果蠅) 1ml
61258 Anti-HOXA10 HOXA10抗體 0.2ml
61259 Anti-Phospho-HP1(Tyr43) 異染色質蛋白1磷酸化抗體(果蠅) 1ml
61260 Anti-HPL/PL 人胎盤泌乳素抗體 0.2ml
61261 Anti-HPR1/p84 核基質p84蛋白抗體 0.2ml
61262 Anti-HPV 人類乳頭狀瘤病毒抗體 0.2ml
61263 Anti-HPV16-E6 人類乳頭狀瘤病毒16抗體 0.1ml
61264 Anti-HPV18 E6 人類乳頭狀瘤病毒18 E6抗體 0.2ml
61265 Anti-HPV16 E6 + HPV18 E6 人類乳頭狀瘤病毒16/18 E6抗體 0.2ml
61266 Anti-HPV16-E7 人類乳頭狀瘤病毒16-E7抗體 0.2ml
61267 Anti-Hpt/HP 結合珠蛋白/觸珠蛋白抗體 0.1ml
61268 Anti-H-ras/Ras/Ras p21 原癌基因H-ras抗體 0.1ml
61269 Anti-HRG-alpha Heregulin α蛋白抗體 0.2ml
61270 Anti-HSA 人血清白蛋白抗體 0.2ml
61271 Anti-HSA 人血清白蛋白單克隆抗體 0.2ml
61272 Anti-HRG Beta1 Heregulin β蛋白抗體 0.2ml
61273 Anti-HRH3/GPCR97 組織胺H3受體抗體 0.1ml
61274 Anti-HRH4/GPCR105 組織胺H4受體抗體 0.1ml
61275 Anti-HSTF2/HSF2 熱休克轉錄因子2抗體 0.2ml
61276 Anti-HSL/LIPE 荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 0.2ml
61277 Anti-Phospho-HSL (Ser552) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 0.1ml
61278 Anti-Phospho-HSL (Ser563) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 0.1ml
61279 Anti-Phospho-HSL (Ser565) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 0.1ml
61280 Anti-Phospho-HSL (Ser660) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 0.1ml
61281 Anti-Hrasls3/HREV107 HRAS樣抑制因子3抗體 0.2ml
61282 Anti-HSD11B2/HSD2 羥基類固醇脫氫酶11β2抗體 0.2ml
61283 Anti-HSP20 熱休克蛋白-20抗體 0.2ml
61284 Anti-HSP22 熱休克蛋白-22抗體 0.2ml
61285 Anti-HSP27 熱休克蛋白-27抗體 0.1ml
61286 Anti-Phospho-HSP27 (Ser78) 磷酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
61287 Anti-Phospho-HSP27 (Ser82) 磷酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
61288 Anti-Phospho-HSP27 (Ser15) 磷酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
61289 Anti-HSP60 熱休克蛋白-60抗體 0.1ml
61290 Anti-HSP47 熱休克蛋白-47抗體 0.2ml
61291 Anti-HSP70 熱休克蛋白-70抗體 0.1ml
61292 Anti-HSP75/TRAP1 熱休克蛋白-75抗體 0.2ml
61293 Anti-HSP90 Alpha 熱休克蛋白90α抗體 0.1ml
61294 Anti-HSP90 Alpha 熱休克蛋白90α抗體 0.1ml
61295 Anti-Phospho-HSP90 alpha (Thr5/7) 磷酸化熱休克蛋白90α抗體 0.1ml
61296 Anti-HSP90 beta 熱休克蛋白90β 抗體 0.1ml
61297 Anti-HSP105 熱休克蛋白105抗體 0.1ml
61298 Anti-Syndecan-2 多配體蛋白聚糖2抗體 0.2ml
61299 Anti-HtrA2/Omi 線粒體*蛋白酶抗體 0.2ml
61300 Anti-TRT/TERT 人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒 端粒酶抗體 0.1ml
61301 anti-human serum 人血清抗體 0.2ml
61302 Anti-Human serum 人血清抗體 1ml
61303 Anti-COX10 *氧化酶10抗體 0.1ml
61304 Anti-IAA (Indole-3-Acetic Acid) 吲哚乙酸抗體/植物生長素抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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