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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
61306 Anti-API5 凋亡抑制因子5抗體 0.1ml
61307 Anti-IASPP 腫瘤細胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體 0.2ml
61308 Anti-Iba1 離子鈣接頭蛋白抗體 0.1ml
61309 Anti-ICAD/DFF-45 Beta Caspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體 0.1ml
61310 Anti-ICOS/CD278 誘導協同刺激分子CD278抗體 0.2ml
61311 Anti-IDE 胰島素降解酶抗體 0.2ml
61312 Anti-IDE 胰島素降解酶抗體 0.2ml
61313 Anti-influenza A virus nucleoprotein(Flu-A) 流感病毒A核蛋白單克隆抗體 0.1ml
61314 Anti-influenza B virus nucleoprotein 流感B核蛋白單克隆抗體 0.1ml
61315 Anti-IFABP 小腸型脂肪酸結合蛋白抗體 0.2ml
61316 Anti-IFABP 小腸型脂肪酸結合蛋白抗體 0.2ml
61317 Anti-IFI16/p16 γ干擾素誘導蛋白16抗體 0.1ml
61318 Anti-IFITM1/CD225 干擾素誘導跨膜蛋白1抗體 0.1ml
61319 Anti-IFN-Beta 干擾素-β抗體(抗人) 0.1ml
61320 Anti-IFN-Alpha 干擾素-α抗體(抗人) 0.1ml
61321 Anti-IFN-Alpha 2b 干擾素α2b抗體 0.2ml
61322 Anti-IFN-Beta 干擾素-β抗體(大鼠、小鼠) 0.1ml
61323 Anti-IFN gamma γ-干擾素單克隆抗體 0.1ml
61324 Anti-IFN Gamma (human) 干擾素-γ抗體(人) 0.1ml
61325 Anti-IFN gamma (mouse, rat) 干擾素-γ抗體(小鼠,大鼠) 0.1ml
61326 Anti-IFNGR1/CD119 干擾素-gamma受體1抗體 0.2ml
61327 Anti-IFNGR2 干擾素-gamma受體2抗體 0.2ml
61328 Anti-IGC 非洲爪蟾IGC抗體 1ml
61329 Anti-IGF1R/CD221 胰島素樣生長因子I受體抗體 0.1ml
61330 Anti-phospho-IGF1 Receptor (Tyr1161) 磷酸化胰島素樣生長因子1受體抗體 0.1ml
61331 Anti-IGF1R/CD221 胰島素樣生長因子1受體抗體 0.1ml
61332 Anti-IGFBP1 胰島素樣生長因子結合蛋白-1抗體 0.1ml
61333 Anti-IGFBP2 胰島素樣生長因子結合蛋白2抗體 0.2ml
61334 Anti-IGFBP3 胰島素樣生長因子結合蛋白3抗體 0.1ml
61335 Anti-IGFBP4/IBP4 胰島素樣生長因子結合蛋白4抗體 0.2ml
61336 Anti-IGFBP5/IBP5 胰島素樣生長因子結合蛋白5抗體 0.1ml
61337 Anti-IGF I 胰島素樣生長因子I抗體 0.1ml
61338 Anti-IGF II/IGF2 胰島素樣生長因子-II抗體 0.1ml
61339 Anti-IMP3/IGF-IIBP3 胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗體 0.2ml
61340 Anti-IGSF8/CD316 免疫球蛋超家族成員8抗體 0.2ml
61341 Anti-IKK alpha KB抑制蛋白激酶α抗體 0.2ml
61342 Anti-IKK beta KB抑制蛋白激酶β抗體 0.1ml
61343 Anti-IKK gamma KB抑制蛋白激酶γ抗體 0.2ml
61344 Anti-IKB beta 核因子κB抑制蛋白β抗體 0.2ml
61345 Anti-phospho-IkB beta (Ser23) 磷酸化KB抑制蛋白β抗體 0.1ml
61346 Anti-IKB alpha 核因子κB抑制蛋白α抗體 0.1ml
61347 Anti-phospho-IKK alpha (Thr23) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體 0.1ml
61348 Anti-phospho-IKK alpha (Tyr463) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體 0.1ml
61349 Anti-phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體 0.1ml
61350 Anti-Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗體 0.1ml
61351 Anti-Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗體 0.1ml
61352 Anti-phospho-IKB alpha (Ser32/36) 磷酸化IKB alpha(Ser32/36)抗體 0.1ml
61353 Anti-phospho-IKK beta (Tyr188) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 0.1ml
61354 Anti-phospho-IKK beta (Tyr466) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 0.1ml
61355 Anti-phospho-IKK beta (Tyr199) 人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA試劑盒 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 0.1ml
61356 Anti-phospho-IKK gamma (Ser85) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體 0.1ml
61357 Anti-phospho-IKK gamma (Ser31) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體 0.1ml
61358 Anti-phospho-IKK gamma (Ser376) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體 0.1ml
61359 Anti-IKI3 family protein 擬南芥IKI3抗體 0.2ml
61360 Anti-IL-9 白介素9抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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