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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人麻疹病毒(MV)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人麻疹病毒(MV)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人麻疹病毒(MV)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
61364 anti-IL-10RB 白細胞介素-10受體β抗體 0.2ml
61365 Anti-IL-12 (rat, mouse) 白介素12抗體 (大鼠,小鼠) 0.1ml
61366 Anti-IL-12 (human) 白介素12抗體(人) 0.2ml
61367 Anti-IL-12RB1/CD212 白細胞介素-12受體β1抗體 0.2ml
61368 Anti-IL12RB2 白細胞介素-12受體β2抗體 0.2ml
61369 Anti-IL-13 白介素13抗體 0.1ml
61370 Anti-IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗體 0.2ml
61371 Anti-IL-15RA 白介素15受體α抗體 0.2ml
61372 Anti-IL-15 白介素15抗體 0.2ml
61373 Anti-IL-16 白介素16抗體 0.2ml
61374 Anti-IL-13Ra1 白細胞介素-13受體a1抗體 0.2ml
61375 Anti-IL-13Ra2 白細胞介素-13受體a2抗體 0.2ml
61376 Anti-IL-16/LCF 白介素-16抗體 0.1ml
61377 Anti-IL-17 (mouse, rat) 白介素-17抗體(小鼠,大鼠) 0.1ml
61378 Anti-IL-17 白介素-17抗體(人) 0.2ml
61379 Anti-IL-17R/IL-17RA/CD217 白介素17受體抗體 0.2ml
61380 Anti-IL-17RC/IL-17RL 白介素17受體C抗體 0.2ml
61381 Anti-IL-17RD 白介素17受體D抗體 0.2ml
61382 Anti-IL-17B 白介素-17B抗體 0.2ml
61383 Anti-IL-17RB 白介素-17B受體抗體 0.2ml
61384 Anti-IL-17C 白介素-17C抗體 0.2ml
61385 Anti-IL-17D/IL-27 白介素-17D抗體 0.2ml
61386 Anti-IL-17E/IL-25 白介素-17E抗體 0.2ml
61387 Anti-IL-17F/IL-24 白介素-17F抗體 0.2ml
61388 Anti-IL-27R/TCCR 白細胞介素27受體抗體 0.2ml
61389 Anti-IL-18/IGIF 白細胞介素-18/干擾素γ誘導因子抗體 0.1ml
61390 Anti-IL-20 白細胞介素-20抗體 0.2ml
61391 Anti-IL-23 白介素-23抗體 0.2ml
61392 Anti-IL-23R 白介素-23受體抗體 0.2ml
61393 Anti-IL-19/NG.1 白細胞介素-19抗體 0.2ml
61394 Anti-IL-20R alpha/IL20RA 白介素20受體α鏈抗體 0.2ml
61395 Anti-IL-20RB/IL-20R2 白介素20受體β鏈抗體 0.2ml
61396 Anti-IL-21 白介素21抗體 0.2ml
61397 Anti-IL-21R 白介素21受體抗體 0.2ml
61398 Anti-IL-22 白介素-22抗體 0.2ml
61399 Anti-IL-22R 白介素-22受體抗體 0.2ml
61400 Anti-IL-22BP/IL22RA2 白介素22受體結合蛋白抗體 0.2ml
61401 Anti-IL1RAPL1 白介素1受體相關蛋白樣1前體蛋白抗體 0.2ml
61402 Anti-IL-26/AK155 白介素26抗體 0.2ml
61403 Anti-IL-28A/IFNL2 白細胞介素28A抗體 0.2ml
61404 Anti-IL-28B/IL-28C 白細胞介素28B抗體 0.2ml
61405 Anti-IL-29/IFNL1 白細胞介素29抗體 0.2ml
61406 Anti-IL-31 白細胞介素31抗體 0.2ml
61407 Anti-IL-31RA/CRL3 白介素31受體a抗體 0.2ml
61408 Anti-IL-32/NK4 白介素32抗體 0.2ml
61409 Anti-IL-33/NFHEV 白介素33抗體 0.2ml
61410 Anti-IL-33 白介素33抗體 0.2ml
61411 Anti-IL-1 Alpha 白介素1α抗體 0.1ml
61412 Anti-IL-1 Beta/IL-1B 白介素1β抗體 0.1ml
61413 Anti-IL-2 白介素2抗體(大、小鼠) 0.1ml
61414 Anti-IL-2 人麻疹病毒(MV)ELISA試劑盒白介素2抗體(人) 0.1ml
61415 Anti-IL-2 白細胞介素-2單克隆抗體 0.2ml
61416 Anti-ITK/PSCTK2 IL-2誘導型T細胞激酶抗體 0.2ml
61417 Anti-IL-3 白介素3抗體 0.1ml
61418 Anti-IL-3R alpha/CD123 兔抗人白介素3受體a鏈抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人麻疹病毒(MV)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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