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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
61547 Anti-KLK14 *14抗體 0.2ml
61548 Anti-KMT6/EZH2 抑癌蛋白EZH2抗體 0.2ml
61549 Anti-K-ras 原癌基因K-ras抗體 0.1ml
61550 Anti-KSR1 Ras信號轉導KSR1蛋白抗體 0.2ml
61551 Anti-Phospho-KSR1 (Ser392) 磷酸化Ras信號轉導KSR1蛋白抗體 0.1ml
61552 Anti-Ku70 DNA修復酶Ku70抗體 0.1ml
61553 Anti-Ku-80 DNA修復酶Ku-80抗體 0.1ml
61554 Anti-Kv1.3/PCN3 離子通道蛋白Kv1.3抗體 0.2ml
61555 Anti-Kv3.3/Kcnc3 離子通道蛋白Kv3.3抗體 0.2ml
61556 Anti-KCNC4/KV3.4 離子通道蛋白Kv3.4抗體 0.2ml
61557 Anti-Laminin alpha 5 層粘蛋白α5抗體 0.1ml
61558 Anti-LAMA3/Laminin 5 alpha 3 層粘蛋白α3抗體 0.2ml
61559 Anti-Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體 1ml
61560 Anti-Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體 1ml
61561 Anti-Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體 1ml
61562 Anti-LAG-3/CD223 淋巴細胞活化基因-3抗體 0.2ml
61563 Anti-Langerin/CD207 白細胞分化抗原CD207抗體 0.2ml
61564 Anti-LAP18/Stathmin 白血病相關蛋白18/癌蛋白18抗體 0.1ml
61565 Anti-Phospho-Stathmin (Ser16) 磷酸化原癌基因蛋白18 0.1ml
61566 Anti-Phospho-Stathmin (Ser38) 磷酸化原癌基因蛋白18 0.1ml
61567 Anti-LAT/LAT1 T細胞活化連接蛋白抗體 0.2ml
61568 Anti-Phospho-LAT (Tyr171) 磷酸化T細胞活化連接蛋白抗體 0.1ml
61569 Anti-Phospho-LAT (Tyr191) 磷酸化T細胞活化連接蛋白抗體 0.1ml
61570 Anti-LAIR-1/CD305 白細胞相關免疫球蛋白樣受體1抗體 0.2ml
61571 Anti-Layilin 透明質酸受體抗體 0.2ml
61572 Anti-LAIR-2/CD306 白細胞相關免疫球蛋白樣受體2抗體 0.2ml
61573 Anti-LC3A/B 自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體 0.2ml
61574 Anti-LCAT 卵磷*?;D移酶抗體 0.2ml
61575 Anti-LATS1 腫瘤抑制基因LATS1抗體 0.2ml
61576 Anti-Phospho-LATS1 (Thr1079) 磷酸化腫瘤抑制基因LATS1抗體 0.1ml
61577 Anti-Phospho-LATS1 (Ser909) 磷酸化腫瘤抑制基因LATS1抗體 0.1ml
61578 Anti-L-Citrulline L-瓜氨酸抗體 0.2mg
61579 Anti-Lck/p56-LCK 淋巴細胞特異性蛋白*激酶抗體 0.2ml
61580 Anti-Phospho-Lck (Tyr505) 磷酸化淋巴細胞特異性蛋白*激酶抗體 0.1ml
61581 Anti-LDL 低密度脂蛋白抗體 0.1ml
61582 Anti-LDL-R 低密度脂蛋白受體抗體 0.2ml
61583 Anti-ox-LDL 氧化低密度脂蛋白抗體 0.2ml
61584 Anti-LDH 乳酸脫氫酶抗體 0.2ml
61585 Anti-Mannan Binding Lectin 甘露聚糖結合凝集素抗體 0.2ml
61586 Anti-LEF-1 淋巴增強因子-1抗體 0.2ml
61587 Anti-Leptin 瘦素抗體 0.2ml
61588 Anti-Leptin 瘦素抗體 0.1ml
61589 Anti-Leptin receptor 瘦素受體抗體 0.1ml
61590 Anti-Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長) 0.2ml
61591 Anti-Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長) 0.2ml
61592 Anti-Leptin receptor(L/M/S) 瘦素受體抗體(長、中、短型) 0.2ml
61593 Anti-L-enk *腦啡肽抗體 0.2ml
61594 Anti-Lgr5/GPR49 Lgr5/GPR49抗體 0.1ml
61595 Anti-LH 人促黃體生成素抗體 0.1ml
61596 Anti-LH 促黃體生成素抗體 0.1ml
61597 Anti-LH 促黃體生成素單克隆抗體 0.1ml
61598 Anti-LH 促黃體生成素抗體人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒 0.1ml
61599 Anti-LHR/CGR 促黃體生成素受體抗體 0.1ml
61600 Anti-HDC L-*脫羧酶抗體 0.1ml
61601 Anti-LHRH/GNRH 黃體激素釋放激素類似物抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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