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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
61883 Anti-Nephrin *抗體 0.1ml
61884 Anti-nectin 2/CD112 細胞黏附分子CD112抗體 0.2ml
61885 Anti-Nestin 巢蛋白/神經上皮干細胞蛋白抗體 0.1ml
61886 Anti-Nestin 巢蛋白/神經上皮干細胞蛋白抗體(大、小鼠) 0.1ml
61887 Anti-Neurobeachin 蛋白激酶錨定蛋白抗體 0.2ml
61888 Anti-AKAP95 蛋白激酶A錨定蛋白95抗體 0.2ml
61889 Anti-NeuN 神經元核抗原抗體 0.2ml
61890 Anti-Nrn1/Cpg15/Neuritin 轉化神經突起蛋白抗體 0.2ml
61891 Anti-Neurocan 神經粘蛋白抗體 0.1ml
61892 Anti-NGB 腦紅蛋白/神經血紅蛋白抗體 0.1ml
61893 Anti-NeuroD1 神經元分化因子1抗體 0.2ml
61894 Anti-Neurofascin/Nfasc155 神經束蛋白-155 0.2ml
61895 Anti-NT 神經降壓素抗體 0.2ml
61896 Anti-NF2/merlin 2型神經纖維瘤抗體 0.2ml
61897 Anti-Phospho-Merlin (Ser518) 磷酸化2型神經纖維瘤抗體 0.1ml
61898 Anti-NFATc1 活化T細胞核因子1蛋白 0.1ml
61899 Anti-NFAM1/CNAIP NFAM1抗體 0.2ml
61900 Anti-phospho-NFATc2(Ser326) 磷酸化NFATc2(Ser326)抗體 0.1ml
61901 Anti-NFBD1/MDC1 DNA損傷關卡蛋白1抗體 0.2ml
61902 Anti-NF-H 高分子量神經絲蛋白抗體 0.2ml
61903 Anti-NFKB p52/NF-κB2 p100 細胞核因子/k基因結合核因子 p52/p100抗體 0.2ml
61904 Anti-Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870) 細胞核因子/k基因結合核因子p100抗體 0.1ml
61905 Anti-NFKB p65 細胞核因子/k基因結合核因子抗體 0.1ml
61906 Anti-Phospho-NFKB p65 (Ser276) 磷酸化細胞核因子NF-κB p65抗體 0.1ml
61907 Anti-Phospho-NFKB p65 (Ser468) 磷酸化細胞核因子NF-κB p65抗體 0.1ml
61908 Anti-phospho-NFKB p65 (Ser536) 磷酸化細胞核因子抗體 0.1ml
61909 Anti-NF-66 α-中連蛋白抗體 0.2ml
61910 Anti-NF-L/68kDa neurofilament 低分子量神經絲蛋白抗體 0.2ml
61911 Anti-NF-M 中分子量神經絲蛋白抗體 0.1ml
61912 Anti-NGAL/Lipocalin 2 脂質運載蛋白抗體 0.2ml
61913 Anti-NF-KappaB p105 細胞核因子p50/k基因結合核因子抗體 0.1ml
61914 Anti-Phospho-NF-KappaB p105 (Ser927) 磷酸化細胞核因子p50/k基因結合核因子抗體 0.1ml
61915 Anti-Phospho-NF-KappaB p105 (Ser933) 磷酸化細胞核因子p50/k基因結合核因子抗體 0.1ml
61916 Anti-NGFR/p75NTR 神經生長因子受體抗體 0.1ml
61917 Anti-NGF-beta 神經生長因子-β抗體 0.1ml
61918 Anti-NGN3 神經元素3抗體 0.2ml
61919 Anti-NGX6 鼻咽癌細胞相關基因6抗體 0.1ml
61920 Anti-NHE1 鈉氫通道蛋白抗體 0.2ml
61921 Anti-NIK/MAPKKK14 NFkB誘導激酶抗體 0.2ml
61922 Anti-NIS 鈉碘轉運體蛋白抗體 0.2ml
61923 Anti-NIT2 NIT2蛋白抗體 0.2ml
61924 Anti-Substance P Receptor P物質受體抗體 0.1ml
61925 Anti-NK-2R 神經激肽A受體/K物質受體抗體 0.1ml
61926 Anti-NKA 神經激肽A抗體 0.2ml
61927 Anti-NKB 神經激肽B抗體 0.2ml
61928 Anti-NKG2A NK細胞受體2A抗體 0.2ml
61929 Anti-NKG2C NK細胞受體2C抗體 0.2ml
61930 Anti-NKG2D/CD314 NK細胞受體2D抗體 0.2ml
61931 Anti-NKR(Neuromedin B Receptor) 神經激肽B受體抗體 0.2ml
61932 Anti-NKR/Neurokin B receptor 神經激肽B受體抗體 0.2ml
61933 Anti-Nm23 腫瘤轉移抑制基因抗體人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒 0.1ml
61934 Anti-Nm23-H1 腫瘤抑制基因抗體 0.1ml
61935 Anti-Nm23-H2 腫瘤抑制基因抗體 0.2ml
61936 Anti-NMP22 核基質蛋白22抗體 0.2ml
61937 Anti-Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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