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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
62960 Beta-Amyloid(31-35)/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽(31-35)抗體IgG 0.2ml
62961 Anti-14-3-3/FITC 熒光素標記14-3-3蛋白抗體IgG 0.2ml
62962 Anti-14-3-3 ζ(phospho Ser58)/FITC 熒光素標記磷酸化14-3-3 ζ抗體IgG 0.2ml
62963 Anti-2,4-D/FITC 熒光素標記2,4-二氯苯氧乙酸抗體IgG 0.2ml
62964 Anti-4E-BP1/EIF4EBP1/FITC 熒光素標記4E結合蛋白1抗體IgG 0.2ml
62965 Anti-4EBP1(phospho Ser64) /FITC 熒光素標記磷酸化4E結合蛋白1抗體IgG 0.2ml
62966 Anti-4EBP1(phospho Thr37/46) /FITC 熒光素標記磷酸化4E結合蛋白1抗體IgG 0.2ml
62967 Anti-phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70)/FITC 熒光素標記磷酸化eIF4E結合蛋白抗體IgG 0.2ml
62968 Anti-14-3-3/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記14-3-3抗體IgG 0.2ml
62969 Anti-5-HT/FITC 熒光素標記5-羥色胺抗體IgG 0.2ml
62970 Anti-5-HT/RBITC 紅色羅丹明標記5-羥色胺抗體IgG 0.2ml
62971 Anti-5-HTR1A/FITC 熒光素標記5-羥色胺受體1A抗體IgG 0.2ml
62972 Anti-5-HTR1B /FITC 熒光素標記5-羥色胺受體1B抗體IgG 0.2ml
62973 Anti-5-HTR2A/FITC 熒光素標記5-羥色胺受體2A抗體IgG 0.2ml
62974 Anti-5-HTR2B/FITC 熒光素標記5-羥色胺受體2B(5-HT/serotonin R2B)抗體IgG 0.2ml
62975 Anti-5-HTR3/FITC 熒光素標記5-羥色胺受體3抗體IgG 0.2ml
62976 Anti-5-HTR4/FITC 熒光素標記5-羥色胺受體4抗體IgG 0.2ml
62977 Anti-5-LOX/FITC 熒光素標記5-脂氧合酶抗體IgG 0.2ml
62978 Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser271) /FITC 熒光素標記磷酸化5-脂氧合酶抗體IgG 0.2ml
62979 Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser663) /FITC 熒光素標記磷酸化5-脂氧合酶抗體IgG 0.2ml
62980 Anti-5-HTT/SERT/FITC 熒光素標記5-羥色胺轉運蛋白抗體IgG 0.2ml
62981 Anti-8-OHdG/FITC 熒光素標記兔抗8-羥基脫氧鳥苷蛋白抗體IgG 0.2ml
62982 Anti-AACT-Alpha1 /RBITC 紅色熒光素羅丹明標記α-1抗胰*IgG 0.2ml
62983 Anti-AACT-Alpha1/FITC 熒光素標記α-1抗胰* 0.2ml
62984 Anti-AAK1/FITC 熒光素標記AP2關聯激酶1抗體IgG 0.2ml
62985 Anti-AARS2/FITC 熒光素標記丙氨酰tRNA合成酶2抗體IgG 0.2ml
62986 Anti-AARS2 /FITC 熒光素標記丙氨酰tRNA合成酶2抗體IgG 0.2ml
62987 Anti-AAT/FITC 熒光素標記α-1抗*抗體IgG 0.2ml
62988 Anti-AATF/FITC 熒光素標記拮抗凋亡轉錄因子抗體IgG 0.2ml
62989 Anti-AATK/FITC 熒光素標記細胞凋亡關聯*激酶抗體IgG 0.2ml
62990 Anti-BTK/ATK /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠蛋白*激酶ATK抗體IgG 0.2ml
62991 Anti-Phospho-Btk(Tyr223) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠蛋白*激酶ATK抗體IgG 0.2ml
62992 Anti-Phospho-Btk(Ser180) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠蛋白*激酶ATK抗體IgG 0.2ml
62993 Anti-ABCA1/FITC 熒光素標記腺苷三磷酸結合盒轉運體A1抗體IgG 0.2ml
62994 Anti-Tap1/ABCB2 /FITC 熒光素標記ATP結合轉運因子1抗體IgG 0.2ml
62995 Anti-ABCB5/FITC 熒光素標記ATP結合蛋白家族5抗體IgG 0.2ml
62996 Anti-ABCB6/FITC 熒光素標記ABCB6抗體IgG 0.2ml
62997 Anti-TCTP/FITC 熒光素標記翻譯控制腫瘤蛋白抗體IgG 0.2ml
62998 Anti-Phospho-TCTP (Ser46) /FITC 熒光素標記磷酸化翻譯控制腫瘤蛋白抗體IgG 0.2ml
62999 Anti-ABCF1/FITC 熒光素標記ATP結合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體IgG 0.2ml
63000 Anti-ABCG1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠ABCG1抗體IgG 0.2ml
63001 Anti-ABCG2/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠ABCG2抗體IgG 0.2ml
63002 Anti-ABCG4/FITC 熒光素標記抗ABC膜轉運蛋白抗體IgG 0.2ml
63003 Anti-c-Abl /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠非受體*激酶c-Abl抗體IgG 0.2ml
63004 Anti-ABL2/FITC 熒光素標記ABL2抗體IgG 0.2ml
63005 Anti-ACA11 /FITC 熒光素標記兔抗擬南芥ACA11抗體IgG 0.2ml
63006 Anti-AHA3 /FITC 熒光素標記兔抗植物蛋白AHA3抗體(擬南芥)IgG 0.2ml
63007 Anti-ABP/FITC 熒光素標記雄激素結合蛋白抗體IgG 0.2ml
63008 Anti-Rat IgA/FITC 熒光素標記兔抗大鼠IgA抗體 0.2ml
63009 Anti-ABI1/SSH3BP1/FITC 熒光素標記ABI1/SSH3BP1蛋白抗體IgG 0.2ml
63010 Anti-ACD/PTOP/FITC人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒 熒光素標記腎上腺皮質發育異常蛋白抗體IgG 0.2ml
63011 Anti-ACE1/FITC 熒光素標記血管緊張素轉換酶抗體IgG 0.2ml
63012 Anti-ACE2/FITC 熒光素標記血管緊張素轉換酶2抗體IgG 0.2ml
63013 Anti-ACEI/FITC 熒光素標記血管緊張素1轉換酶抑制劑抗體IgG 0.2ml
63014 Anti-Acetyl CoA Carboxylase/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠、猴、牛乙酰*羧化酶抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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