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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人變腎上腺素(MN) ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人變腎上腺素(MN) ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人變腎上腺素(MN) ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
63128 Anti-AP2 alpha/FITC 熒光素標記轉錄激活蛋白2α抗體IgG 0.2ml
63129 Anti-alpha Adaptin/FITC 熒光素標記銜接蛋白1抗體IgG 0.2ml
63130 Anti-Apaf-1 /FITC 熒光素標記凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)IgG 0.2ml
63131 Anti-Apaf-1/FITC 熒光素標記凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)IgG 0.2ml
63132 Anti-Protein C/FITC 熒光素標記APC活化蛋白C抗體IgG 0.2ml
63133 Anti-Apelin/FITC 熒光素標記脂肪炎癥因子Apelin抗體IgG 0.2ml
63134 Anti-Apelin receptor/APJ receptor /FITC 熒光素標記Apelin receptor抗體IgG 0.2ml
63135 Anti-APEX1/Ref-1 /FITC 熒光素標記氧化還原因子1抗體IgG 0.2ml
63136 Anti-APG4B/AUTL1 /FITC 熒光素標記APG4B細胞自噬相關抗體IgG 0.2ml
63137 Anti-API5/AAC11 /FITC 熒光素標記凋亡抑制因子5抗體IgG 0.2ml
63138 Anti-APNG/MPG/FITC 熒光素標記N-甲基嘌呤DNA糖基化酶IgG 0.2ml
63139 Anti-apoA1/FITC 熒光素標記載脂蛋白A1抗體IgG 0.2ml
63140 Anti-ApoB/FITC 熒光素標記載脂蛋白B抗體IgG 0.2ml
63141 Anti-apo-D /FITC 熒光素標記載脂蛋白D抗體IgG 0.2ml
63142 Anti-Apo-E/FITC 熒光素標記載脂蛋白E抗體IgG 0.2ml
63143 Anti-ApoH/FITC 熒光素標記載脂蛋白H抗體IgG 0.2ml
63144 Anti-Apollon/FITC 熒光素標記Apollon凋亡抑制蛋白抗體IgG 0.2ml
63145 Anti-APP/FITC 熒光素標記APP淀粉樣肽前體蛋白抗體IgG 0.2ml
63146 Anti-phospho-APP(phospho Thr668) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白(p-APP Thr668)抗體IgG 0.2ml
63147 Anti-APP695/770 /FITC 熒光素標記淀粉樣肽前體蛋白抗體IgG 0.2ml
63148 Anti-APPL1/FITC 熒光素標記抗銜接因子蛋白含pH域磷酸*結合域和*拉鏈基元1抗體IgG 0.2ml
63149 Anti-APS/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠APS抗體IgG 0.2ml
63150 Anti-APS(Ser598)/FITC 熒光素標記磷酸化APS抗體IgG 0.2ml
63151 anti-AQP1/FITC 熒光素標記水通道蛋白-1抗體IgG 0.2ml
63152 Anti-AQP-2/FITC 熒光素標記水通道蛋白-2蛋白抗體IgG 0.2ml
63153 Anti-AQP-3/FITC 熒光素標記水通道蛋白-3抗體IgG 0.2ml
63154 Anti-AQP4/FITC 熒光素標記水通道蛋白-4蛋白抗體IgG 0.2ml
63155 Anti-AQP5/FITC 熒光素標記水通道蛋白-5抗體IgG 0.2ml
63156 Anti-AQP7/FITC 熒光素標記水通道蛋白-7抗體IgG 0.2ml
63157 Anti-AQP9/FITC 熒光素標記水通道蛋白-9抗體IgG 0.2ml
63158 Anti-AR/FITC 熒光素標記雄激素受體抗體IgG 0.2ml
63159 Anti-AKR1B1/ADR/FITC 熒光素標記醛糖還原酶抗體IgG 0.2ml
63160 Anti-phospho-AR ( p-Ser580)/FITC 熒光素標記磷酸化雄激素受體抗體IgG 0.2ml
63161 Anti-AR(phospho Ser213/Ser791)/FITC 熒光素標記磷酸化雄激素受體抗體IgG 0.2ml
63162 Anti-AR Alpha1/FITC 熒光素標記α1腎上腺素能受體抗體IgG 0.2ml
63163 Anti-ARC/FITC 熒光素標記ARC抗體IgG 0.2ml
63164 Anti-ARF6/FITC 熒光素標記ADP核糖基化因子6抗體IgG 0.2ml
63165 Anti-arfaptin 1/FITC 熒光素標記ADP核糖基化因子結合蛋白1抗體IgG 0.2ml
63166 Anti-arfaptin 2/FITC 熒光素標記ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體IgG 0.2ml
63167 Anti-arfaptin 2(phospho S260) /FITC 熒光素標記磷酸化ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體IgG 0.2ml
63168 Anti-ARHI/FITC 熒光素標記ARHI蛋白抗體IgG 0.2ml
63169 Anti-ARIP2a/FITC 熒光素標記激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體IgG 0.2ml
63170 Anti-ARIP2B/FITC 熒光素標記激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體IgG 0.2ml
63171 Anti-Aromatase P450/FITC 熒光素標記芳香化酶蛋白抗體IgG 0.2ml
63172 Anti-Aromatase P450/FITC 熒光素標記芳香化酶/細胞色素P450/P450抗體IgG 0.2ml
63173 Anti-ART/FITC 熒光素標記膠質細胞系源性神經營養因子GDNF的一種抗體IgG 0.2ml
63174 Anti-ASCL1/MASH1 /FITC 熒光素標記神經母細胞特異性轉移因子抗體IgG 0.2ml
63175 Anti-ASIC1/BNaC2/FITC 熒光素標記酸敏感離子通道1抗體IgG 0.2ml
63176 Anti-ASK1/MAPKKK5 /FITC 熒光素標記細胞凋亡信號調節激酶1/絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶5抗體IgG 0.2ml
63177 Anti-ASK1(phospho Ser83) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體IgG 0.2ml
63178 Anti-phospho-ASK1(Thr845) /FITC 熒光素標記兔抗人、小鼠磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體IgG 0.2ml
63179 Anti-ASK1(phospho Ser967) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體IgG 人變腎上腺素(MN) ELISA試劑盒 0.2ml
63180 Anti-ASPP1/FITC 熒光素標記p53凋亡刺激蛋白1抗體IgG 0.2ml
63181 Anti-ASPP2/FITC 熒光素標記P53凋亡刺激蛋白2抗體IgG 0.2ml
63182 Anti-AT/AGT /FITC 熒光素標記血管緊張素原抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人變腎上腺素(MN) ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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