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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人多巴銨D1受體(D1R)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人多巴銨D1受體(D1R)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人多巴銨D1受體(D1R)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
63184 Anti-AT1R/FITC 熒光素標記血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體IgG 0.2ml
63185 Anti-AT2R/FITC 熒光素標記血管緊張素Ⅱ-2型受體抗體IgG 0.2ml
63186 Anti-ATF1/FITC 熒光素標記活化復制因子1抗體IgG 0.2ml
63187 Anti-ATR/ACTR(phospho Ser428) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化ATR抗體IgG 0.2ml
63188 Anti-ATF2/FITC 熒光素標記活化復制因子2抗體IgG 0.2ml
63189 Anti-phospho-ATF2(Thr69/71) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠、猴磷酸化活化復制因子2(phospho ATF 2)抗體IgG 0.2ml
63190 Anti-ATF3/FITC 熒光素標記活化轉錄因子3抗體IgG 0.2ml
63191 Anti-ATF4/FITC 熒光素標記活化轉錄因子4抗體IgG 0.2ml
63192 Anti-ATF6/FITC 熒光素標記活化轉錄因子6抗體IgG 0.2ml
63193 Anti-ATG1/ULK1/FITC 熒光素標記自噬相關蛋白1抗體IgG 0.2ml
63194 Anti-ATG7/FITC 熒光素標記自噬相關蛋白7抗體IgG 0.2ml
63195 Anti-thrombin II /FITC 熒光素標記*Ⅱ抗體IgG 0.2ml
63196 Anti-ATH III /FITC 熒光素標記抗*Ⅲ抗體IgG 0.2ml
63197 Anti-ATM/FITC 熒光素標記毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體IgG 0.2ml
63198 Anti-Phospho-PAK4 (Ser99)/FITC 熒光素標記磷酸化p21激活激酶4抗體IgG 0.2ml
63199 Anti-ATP2c1/Ca++ ATPase/FITC 熒光素標記鈣離子ATP酶通道蛋白抗體IgG 0.2ml
63200 Anti-ATP4B/H+K+ ATPase/FITC 熒光素標記氫鉀ATP酶通道蛋白抗體IgG 0.2ml
63201 Anti-ATP5j/FITC 熒光素標記ATP合成酶H+轉運線粒體F0復合體亞基F6抗體IgG 0.2ml
63202 Anti-ATP7A/FITC 熒光素標記銅轉運蛋白質α鏈抗體IgG 0.2ml
63203 Anti-ATP7B/FITC 熒光素標記銅轉運蛋白質β鏈抗體IgG 0.2ml
63204 Anti-phospho-ATP citrate lyase(Ser455) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體IgG 0.2ml
63205 Anti-ATPase Na+/K+protein/FITC 熒光素標記鈉鉀ATP酶通道蛋白抗體IgG 0.2ml
63206 Anti-Na,K-ATPase alpha-1 (Phospho Ser23) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體IgG 0.2ml
63207 Anti-Phospho-Na,K-ATPase alpha-1 (Tyr10) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體IgG 0.2ml
63208 Anti-Na,K-ATPase alpha-1 (Phospho Ser16) /FITC 熒光素標記兔抗小鼠、牛、豬磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體IgG 0.2ml
63209 Anti-ATP-sensitive K+ channel subunit Kir6.2/FITC 熒光素標記ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體IgG 0.2ml
63210 Anti-ATRN/FITC 熒光素標記吸引素抗體IgG 0.2ml
63211 Anti-ATX/Autotaxin/E-NPP2/FITC 熒光素標記自分泌運動因子抗體IgG 0.2ml
63212 Anti-ATXN1/Ataxin 1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠失調癥蛋白1抗體IgG 0.2ml
63213 Anti-Ataxin-1(phospho Ser776)/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化失調癥蛋白1抗體IgG 0.2ml
63214 Anti-AU5 tag/FITC 熒光素標記AU5 tag標簽抗體IgG 0.2ml
63215 Anti-AU1 tag/FITC 熒光素標記抗AU1 tag標簽抗體IgG 0.2ml
63216 Anti-Aurora A /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠、牛、兔、馬、豬有絲分裂激酶A抗體IgG 0.2ml
63217 Anti-Phospho-Aurora A (p-Thr288) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化有絲分裂激酶A抗體IgG 0.2ml
63218 Anti-Aurora B/FITC 熒光素標記極光激酶B抗體IgG 0.2ml
63219 Anti-Phospho-Aurora B (Thr232)/Aurora C (Thr198) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體IgG 0.2ml
63220 Anti-Aurora A/Aurora B/Aurora C /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠有絲分裂激酶A、B、C抗體IgG 0.2ml
63221 Anti-Aurora C /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠、牛、兔、豬有絲分裂激酶B抗體IgG 0.2ml
63222 Anti-AVEN/FITC 熒光素標記凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體IgG 0.2ml
63223 Anti-AVPR2/FITC 熒光素標記*加壓素受體2抗體IgG 0.2ml
63224 Anti-Axin1/FITC 熒光素標記軸蛋白1Axin protein 1抗體IgG 0.2ml
63225 Anti-B7-DC/PDL2/CD273 /FITC 熒光素標記程序性死亡配體2抗體IgG 0.2ml
63226 Anti-B7-H1/PDL1/CD274 /FITC 熒光素標記程序性死亡配體1抗體IgG 0.2ml
63227 Anti-B7-H4/FITC 熒光素標記B7H4抗體IgG 0.2ml
63228 Anti-BACE/ASP2 /FITC 熒光素標記β分泌酶抗體IgG 0.2ml
63229 Anti-Bad/FITC 熒光素標記相關死亡促進因子Bad抗體IgG 0.2ml
63230 Anti-Bad/FITC 熒光素標記相關死亡促進因子Bad抗體IgG 0.2ml
63231 Anti-Phospho-Bad(Ser112) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化相關死亡促進因子抗體IgG 0.2ml
63232 Anti-p-BAD/FITC 熒光素標記抗磷酸化相關死亡促進因子p-BAD抗體IgG 0.2ml
63233 Anti-BAD(phospho Ser75,Ser99,Ser118) /FITC 熒光素標記磷酸化相關死亡促進因子抗體IgG 0.2ml
63234 Anti-Phospho-Bad(Ser136) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化相關死亡促進因子抗體IgG 0.2ml
63235 Anti-Phospho-Bad(Ser155) /FITC 人多巴銨D1受體(D1R)ELISA試劑盒 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化相關死亡促進因子抗體IgG 0.2ml
63236 Anti-BADH2/FITC 熒光素標記BADH2抗體IgG 0.2ml
63237 Anti-BAFF/CD257/FITC 熒光素標記TNF家族B細胞激活因子抗體IgG 0.2ml
63238 Anti-BAFFR/Tnfrsf13c/CD268/FITC 熒光素標記B細胞活化因子受體抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人多巴銨D1受體(D1R)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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