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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
63410 Anti-CCL27/CTACK/FITC 熒光素標記皮膚T細胞虜獲趨化因子抗體IgG 0.2ml
63411 Anti-CCL26/FITC 熒光素標記抗嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體IgG 0.2ml
63412 Anti-CCL28/FITC 熒光素標記粘膜相關上皮趨化因子MEC抗體IgG 0.2ml
63413 Anti-CCP/FITC 熒光素標記兔抗瓜氨酸環肽抗體IgG 0.2ml
63414 Anti-CCR-1/FITC 熒光素標記趨化因子受體1抗體IgG 0.2ml
63415 Anti-CCR-2/5/FITC 熒光素標記CC趨化因子受體2/5抗體IgG 0.2ml
63416 Anti-CCR-2A/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體2A抗體IgG 0.2ml
63417 Anti-CCR-2B/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體2B抗體IgG 0.2ml
63418 Anti-CCR-3/FITC 熒光素標記CC趨化因子受體3抗體IgG 0.2ml
63419 Anti-CCR-4/FITC 熒光素標記CC趨化因子受體4抗體IgG 0.2ml
63420 Anti-CCR-5/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體5抗體IgG 0.2ml
63421 Anti-CCR6/CD196/FITC 熒光素標記趨化因子受體6抗體IgG 0.2ml
63422 Anti-CCR-7/FITC 熒光素標記CC趨化因子受體7抗體IgG 0.2ml
63423 Anti-CCR-8 /FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體8抗體IgG 0.2ml
63424 Anti-CCR-9/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體9抗體IgG 0.2ml
63425 Anti-CCR-10/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體10抗體IgG 0.2ml
63426 Anti-CCRK/FITC 熒光素標記細胞周期相關激酶抗體IgG 0.2ml
63427 Anti-CD2/FITC 熒光素標記CD2抗體IgG 0.2ml
63428 Anti-CD2AP/FITC 熒光素標記白細胞分化抗原CD2AP抗體IgG 0.2ml
63429 Anti-SLAMF9/CD2F-10/FITC 熒光素標記CD2F-10抗體IgG 0.2ml
63430 Anti-SLAMF9/CD2F-10/FITC 熒光素標記CD2F-10抗體IgG 0.2ml
63431 Anti-CD3/FITC 熒光素標記CD3蛋白抗體IgG 0.2ml
63432 Anti-CD3/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記CD3抗體IgG 0.2ml
63433 Anti-CD3/PE 熒光素PE標記CD3抗體IgG 0.2ml
63434 Anti-CD4/FITC 熒光素標記CD4蛋白抗體IgG 0.2ml
63435 Anti-CD4/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記CD4抗體IgG 0.2ml
63436 Anti-CD4/PE 熒光素PE標記CD4抗體IgG 0.2ml
63437 Anti-CD5/FITC 熒光素標記CD5抗體IgG 0.2ml
63438 Anti-CD5L/Api6/FITC 熒光素標記CD5L抗體IgG 0.2ml
63439 Anti-CD6/TP120/FITC 熒光素標記CD6抗體IgG 0.2ml
63440 Anti-CD7/FITC 熒光素標記抗CD7抗體IgG 0.2ml
63441 Anti-CD8/FITC 熒光素標記CD8蛋白抗體IgG 0.2ml
63442 Anti-CD9/MRP-1/FITC 熒光素標記CD9抗體IgG 0.2ml
63443 Anti-CD10/CALLA/FITC 熒光素標記CD10抗體IgG 0.2ml
63444 Anti-CD13/FITC 熒光素標記氨肽酶N抗體IgG 0.2ml
63445 Anti-CD14/FITC 熒光素標記CD14蛋白抗體IgG 0.2ml
63446 Anti-CD17/FITC 熒光素標記CD17抗體IgG 0.2ml
63447 Anti-CD18/LFA-1/FITC 熒光素標記白細胞粘附蛋白抗體IgG 0.2ml
63448 Anti-CD19/FITC 熒光素標記CD19抗體IgG 0.2ml
63449 Anti-Phospho-CD19 (Tyr531) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化CD19抗體IgG 0.2ml
63450 Anti-CD19/PE 熒光素PE標記CD19抗體IgG 0.2ml
63451 Anti-CD20/FITC 熒光素標記CD20抗體IgG 0.2ml
63452 Anti-CD20/Biotin *化CD20抗體IgG 0.2ml
63453 Anti-CD20/MS4A1/PE 熒光素PE標記CD20抗體IgG 0.2ml
63454 Anti-CD25/IL-2RA /PE-Cy5 熒光素PE-Cy5標記兔抗人、大、小鼠白介素2受體a鏈抗體IgG 0.2ml
63455 Anti-CD22/FITC 熒光素標記抗白細胞分化抗原CD22抗體IgG 0.2ml
63456 Anti-CD23/Fc EpsilonR II /FITC 熒光素標記CD23抗體IgG 0.2ml
63457 Anti-CD24/FITC 熒光素標記CD24蛋白抗體IgG 0.2ml
63458 Anti-CD25/IL-2RA/FITC 熒光素標記CD25/白介素2-受體抗體IgG 0.2ml
63459 Anti-CD26/ADCP2/DPP IV /FITC 熒光素標記CD26抗體IgG 0.2ml
63460 Anti-CD27/TNFRSF7/FITC 熒光素標記CD27抗體IgG 0.2ml
63461 Anti-CD28/FITC 人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA試劑盒熒光素標記CD28蛋白抗體IgG 0.2ml
63462 Anti-Integrin Beta1/CD29(integrin beta 1)/FITC 熒光素標記整合素β1蛋白抗體IgG 0.2ml
63463 Anti-CD30/TNFRSF8/FITC 熒光素標記CD30抗體IgG 0.2ml
63464 Anti-CD31/FITC 熒光素標記血小板內皮細胞黏附分子-1抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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