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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
63522 Anti-CD90/Thy-1/FITC 熒光素標記CD90抗體IgG 0.2ml
63523 Anti-ICAM-2/CD102 /FITC 熒光素標記細胞間粘附分子-2抗體IgG 0.2ml
63524 Anti-CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor/FITC 熒光素標記CD105/轉化生長因子β受體抗體IgG 0.2ml
63525 Anti-CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor /RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記CD105/轉化生長因子β受體抗體IgG 0.2ml
63526 Anti-CD107a/LAMP-1/FITC 熒光素標記溶酶體相關膜蛋白1抗體IgG 0.2ml
63527 Anti-CD107a/LAMP-1/PE 熒光素PE標記溶酶體相關膜蛋白1抗體IgG 0.2ml
63528 Anti-nectin 2/CD112/FITC 熒光素標記細胞黏附分子CD112抗體IgG 0.2ml
63529 Anti-CD117/FITC 熒光素標記CD117抗體IgG 0.2ml
63530 Anti-CD133 Anti-gen/FITC 熒光素標記造血干細胞抗原CD133抗體IgG 0.2ml
63531 Anti-OX40/CD134/TNFRSF4/FITC 熒光素標記CD134抗體IgG 0.2ml
63532 Anti-IL-7Ra/CD127/PE 熒光素PE標記兔抗人、大、小鼠、馬、兔白細胞介素-7受體a抗體IgG 0.2ml
63533 Anti-CD137/TNFRSF9/FITC 熒光素標記CD137抗體IgG 0.2ml
63534 Anti-CD133 antigen/PE 熒光素藻紅蛋白標記兔抗人、大、小鼠和果蠅CD133抗體IgG 0.2ml
63535 Anti-HVEM/TNFRSF14/FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體IgG 0.2ml
63536 Anti-Syndecan-1/CD138/FITC 熒光素標記多配體聚糖抗體IgG 0.2ml
63537 Anti-CD141/FITC 熒光素標記凝血調節蛋白抗體IgG 0.2ml
63538 Anti-VE-cadherin/CD144/VECD/FITC 熒光素標記上皮型鈣粘附分子/血管內皮鈣粘蛋白抗體IgG 0.2ml
63539 Anti-CD146(MCAN)/FITC 熒光素標記抗黑色素瘤細胞粘付分子CD146抗體IgG 0.2ml
63540 Anti-CD158a/KIR2DL1/FITC 熒光素標記NK細胞抑制性受體2DL1抗體IgG 0.2ml
63541 Anti-CD158b2/KIR2DL3/NKAT2a/FITC 熒光素標記NK細胞抑制性受體2DL3抗體IgG 0.2ml
63542 Anti-CD158D/KIR2DL4/G9P/FITC 熒光素標記NK細胞抑制性受體2DL4抗體IgG 0.2ml
63543 Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 熒光素標記NK細胞抑制性受體3DL1抗體IgG 0.2ml
63544 Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 熒光素標記NK細胞抑制性受體3DL1抗體IgG 0.2ml
63545 Anti-CD158i/KIR2DS4/FITC 熒光素標記NK細胞抑制性受體2DS4抗體IgG 0.2ml
63546 Anti-CD147/EMMPRIN/FITC 熒光素標記細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子抗體IgG 0.2ml
63547 Anti-CD151/MER2/PETA-3/FITC 熒光素標記CD151抗體IgG 0.2ml
63548 Anti-CD155/PVR/FITC 熒光素標記CD155抗體IgG 0.2ml
63549 Anti-CD160/By55/FITC 熒光素標記NK細胞受體BY55抗體IgG 0.2ml
63550 Anti-CD161/NK1.1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠CD161抗體IgG 0.2ml
63551 Anti-CD163/M130/FITC 熒光素標記CD163抗體IgG 0.2ml
63552 Anti-CD166/ALCAM/FITC 熒光素標記活化白細胞粘附分子抗體IgG 0.2ml
63553 Anti-CD167a/DDR1/FITC 熒光素標記CD167a抗體IgG 0.2ml
63554 Anti-CD169/Siglec-1/sialoadhesin /FITC 熒光素標記CD169抗體IgG 0.2ml
63555 Anti-CD170/Siglec-5/FITC 熒光素標記唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體IgG 0.2ml
63556 Anti-Sialic14/FITC 熒光素標記唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素14抗體IgG 0.2ml
63557 Anti-CD177/FITC 熒光素標記CD177抗體IgG 0.2ml
63558 Anti-CD184/CXC-R4/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體4抗體IgG 0.2ml
63559 Anti-CD226/DNAM-1/FITC 熒光素標記CD226抗體IgG 0.2ml
63560 Anti-CD229/SLAMF3/FITC 熒光素標記CD229抗體IgG 0.2ml
63561 Anti-CD244/NKR2B4/SLAMF4/FITC 熒光素標記CD244抗體IgG 0.2ml
63562 Anti-TNFRSF13B/TNFRSF14B/TACI/FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體IgG 0.2ml
63563 Anti-CD272/BTLA/FITC 熒光素標記B和T淋巴細胞衰減蛋白抗體IgG 0.2ml
63564 Anti-Cdc2 p34/FITC 熒光素標記周期素依賴性蛋白激酶p34抗體IgG 0.2ml
63565 Anti-Phospho-cdc2 (Thr14)/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素依賴激酶1抗體IgG 0.2ml
63566 Anti-Phospho-cdc2 (Tyr15) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素依賴激酶1抗體IgG 0.2ml
63567 Anti-Cdc6/FITC 熒光素標記細胞分裂周期蛋白6抗體IgG 0.2ml
63568 Anti-Phospho-cdc25C (Ser216) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體IgG 0.2ml
63569 Anti-cdc25A /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠細胞分裂周期蛋白25抗體IgG 0.2ml
63570 Anti-Phospho-cdc25A (Thr506) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體IgG 0.2ml
63571 Anti-Phospho-cdc25A (Ser76) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體IgG 0.2ml
63572 Anti-Phospho-cdc25A ( Ser178) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體IgG 0.2ml
63573 Anti-Cdc34/FITC 熒光素標記細胞周期調控因子34IgG 0.2ml
63574 Anti-CDC42/FITC人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒 熒光素標記細胞分化周期CDC42蛋白抗體IgG 0.2ml
63575 Anti-Phospho-CDC42 (Ser71) /FITC 熒光素標記磷酸化細胞分化周期CDC42蛋白抗體IgG 0.2ml
63576 Anti-Jagged1/CD339 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠Jagged1/CD339抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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