大鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒說明書
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人促胰液素/分泌素受體(SR)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人促胰液素/分泌素受體(SR)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人促胰液素/分泌素受體(SR)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
63746 Anti-CT-R/FITC 熒光素標記降鈣素受體抗體IgG 0.2ml
63747 Anti-CSMD1/FITC 熒光素標記抑癌基因CSMD1抗體IgG 0.2ml
63748 Anti-CTBP1/FITC 熒光素標記C端結合蛋白1抗體IgG 0.2ml
63749 Anti-CT DNA /FITC 熒光素標記兔抗小牛胸腺DNA 抗體IgG 0.2ml
63750 Anti-CT DNA /Gold 膠體金標記兔抗小牛胸腺DNA 抗體IgG(10nm/15nm) 0.2ml
63751 Anti-CTGF/FITC 熒光素標記結締組織生長因子抗體IgG 0.2ml
63752 Anti-CTLA-4/CD152 /FITC 熒光素標記淋巴細胞相關抗原4/細胞毒性T細胞抗原-4抗體IgG 0.2ml
63753 Anti-CTSC/PALS/DPP-I/FITC 熒光素標記組織蛋白酶C抗體IgG 0.2ml
63754 Anti-CTn1/FITC 熒光素標記心肌肌鈣蛋白抗體IgG 0.2ml
63755 Anti-cTnT/Troponin T/FITC 熒光素標記心肌特異性肌鈣蛋白T抗體IgG 0.2ml
63756 Anti-CTNNAL1/FITC 熒光素標記粘附分子相關蛋白a1抗體IgG 0.2ml
63757 Anti-CULLIN/Cdc53/CUL/SCFCdc4 /FITC 熒光素標記CULLIN抗體IgG 0.2ml
63758 Anti-Cullin 4a/FITC 熒光素標記Cullin 4a蛋白抗體IgG 0.2ml
63759 Anti-COMP/EPD1/FITC 熒光素標記軟骨寡聚基質蛋白抗體IgG 0.2ml
63760 Anti-Cx26/FITC 熒光素標記整合素樣間隙連接蛋白26抗體IgG 0.2ml
63761 Anti-CX3CR1/FITC 熒光素標記抗CX3C趨化因子受體1抗體 0.2ml
63762 Anti-Cx32/FITC 熒光素標記間隙連接蛋白32抗體IgG 0.2ml
63763 Anti-CX36 /FITC 熒光素標記間隙連接蛋白36抗體IgG 0.2ml
63764 Anti-Cx40/FITC 熒光素標記間隙連接蛋白40抗體IgG 0.2ml
63765 Anti-Phospho-Connexin 43 (Ser368) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠等磷酸化Connexin 43蛋白抗體IgG 0.2ml
63766 Anti-CX45/FITC 熒光素標記間隙連接蛋白45抗體IgG 0.2ml
63767 Anti-CXCL4/PF-4/FITC 熒光素標記血小板因子4抗體IgG 0.2ml
63768 Anti-CXCL5/ENA-78/FITC 熒光素標記上皮中性粒細胞活化肽78抗體IgG 0.2ml
63769 Anti-GCP-2/CXCL6 /FITC 熒光素標記抗粒細胞趨化蛋白2抗體IgG 0.2ml
63770 Anti-CXCL7/NAP-2/PPBP/FITC 熒光素標記中性粒細胞趨化蛋白2抗體IgG 0.2ml
63771 Anti-CXCL9/MIG/CMK/FITC 熒光素標記γ干擾素誘導單核細胞因子抗體IgG 0.2ml
63772 anti-CXCL10/IP-10 /FITC 熒光素標記CXCL10趨化因子10/干擾素誘導蛋白10抗體IgG 0.2ml
63773 Anti-CXCL11/ITAC/FITC 熒光素標記干擾素誘導T細胞趨化因子抗體IgG 0.2ml
63774 Anti-SDF-1/CXCL12 /FITC 熒光素標記基質細胞衍生因子-1抗體IgG 0.2ml
63775 Anti-CXCL13/BLC-1/FITC 熒光素標記B-淋巴細胞趨化因子抗體IgG 0.2ml
63776 Anti-CXCL14/FITC 熒光素標記CXC趨化因子14抗體IgG 0.2ml
63777 Anti-CXCL15/Lungkine/FITC 熒光素標記趨化因子CXCL15體IgG 0.2ml
63778 Anti-CXCL16/FITC 熒光素標記CXC趨化因子16抗體IgG 0.2ml
63779 Anti-CXC-R1 /FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體1抗體IgG 0.2ml
63780 Anti-CXC-R2/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體2抗體IgG 0.2ml
63781 Anti-CXCR3/CD183/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體3抗體/G蛋白偶聯受體IgG 0.2ml
63782 Anti-CXCR3/CD183(rat,mo) /FITC 熒光素標記兔抗大、小鼠細胞表面趨化因子受體3抗體IgG 0.2ml
63783 Anti-CXCR5/CD185/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體5抗體IgG 0.2ml
63784 Anti-CXCR6/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體6抗體IgG 0.2ml
63785 Anti-CXCR7/RDC1/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體7抗體IgG 0.2ml
63786 Anti-CXorf36/FITC 熒光素標記脫羧酶蛋白體36抗體IgG 0.2ml
63787 Anti-CXorf36/FITC 熒光素標記脫羧酶蛋白體36抗體IgG 0.2ml
63788 Anti-Cyclin A/FITC 熒光素標記周期素A抗體IgG 0.2ml
63789 Anti-Cyclin B1/FITC 熒光素標記周期素B1抗體IgG 0.2ml
63790 Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser147) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素B1抗體IgG 0.2ml
63791 Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser133) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素B1抗體IgG 0.2ml
63792 Anti-Cyclin C/FITC 熒光素標記周期素C抗體IgG 0.2ml
63793 Anti-Cyclin D1/FITC 熒光素標記周期素D1蛋白抗體 0.2ml
63794 Anti-Phospho-Cyclin D1 (Thr286) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化cyclin D1抗體IgG 0.2ml
63795 Anti-Cyclin D2/FITC 熒光素標記周期素D2抗體IgG 0.2ml
63796 Anti-Cyclin D3/FITC 熒光素標記周期素D3抗體IgG 0.2ml
63797 Anti-Cyclin E/FITC 熒光素標記周期素E/原癌基因抗體IgG 0.2ml
63798 Anti-phospho-Cyclin E(Thr62) /FITC人促胰液素/分泌素受體(SR)ELISA試劑盒 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素E抗體IgG 0.2ml
63799 Anti-Cyclin F/FITC 熒光素標記周期素F抗體IgG 0.2ml
63800 Anti-Cyclin G/FITC 熒光素標記周期素G抗體IgG 0.2ml
63801 Anti-Cyclin H/FITC 熒光素標記周期素H抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人促胰液素/分泌素受體(SR)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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