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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
64196 Anti-GFP/FITC (Green Fluorecent protein) 熒光素標記兔抗綠色熒光蛋白抗體IgG 0.2ml
64197 Anti-human Fibrinogen/Biotin *化兔抗* 0.2ml
64198 Anti-GFR Alpha-1/GDNF /FITC 熒光素標記GDNF家族受體α-1抗體IgG 0.2ml
64199 Anti-GFRA4/FITC 熒光素標記GDNF家族受體α-4抗體IgG 0.2ml
64200 Anti-Melamine/Biotin *標記兔抗三聚氰胺抗體IgG 0.2ml
64201 Anti-GHR /FITC 熒光素標記生長激素受體抗體IgG 0.2ml
64202 Anti-Ghrelin/FITC 熒光素標記腦腸肽抗體(一種新的生長激素釋放肽)IgG 0.2ml
64203 Anti-GHRF/GHRH /FITC 熒光素標記生長激素釋放激素因抗體IgG 0.2ml
64204 Anti-GIP/FITC 熒光素標記胃泌素抑制肽抗體IgG 0.2ml
64205 Anti-TNFRSF18/FITC 熒光素標記糖皮質激素誘導腫瘤壞死因子受體抗體IgG 0.2ml
64206 Anti-GIG8/ID2/FITC 熒光素標記DNA結合抑制因子2抗體IgG 0.2ml
64207 Anti-Glasses Snake poison Protein/FITC 熒光素標記抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體(眼鏡蛇)IgG 0.2ml
64208 Anti-GLI1/FITC 熒光素標記下游轉錄因子Gli1蛋白抗體IgG 0.2ml
64209 Anti-GLP-1(7-36)/FITC 熒光素標記兔抗胰高血糖素樣肽-1抗體IgG 0.2ml
64210 Anti-GLP-1/KG-31 /FITC 熒光素標記胰高血糖素樣肽-1抗體IgG 0.2ml
64211 Anti-GLP-2/FITC 熒光素標記胰高血糖素樣肽-2抗體IgG 0.2ml
64212 Anti-GLP-2/FITC 熒光素標記胰高血糖素樣肽-2抗體IgG 0.2ml
64213 Anti-Glu-Glu Tag/FITC 熒光素標記兔抗Glu-Glu Tag標簽抗體IgG 0.2ml
64214 Anti-GLUR2/FITC 熒光素標記*受體2抗體IgG 0.2ml
64215 Anti-GLUR3/FITC 熒光素標記*受體3抗體IgG 0.2ml
64216 Anti-GLUR4/FITC 熒光素標記*受體4抗體IgG 0.2ml
64217 Anti-GLP-1R/FITC 熒光素標記兔抗胰高血糖素樣肽-1受體抗體IgG 0.2ml
64218 Anti-GLUT1/FITC 熒光素標記葡萄糖轉運蛋白1抗體IgG 0.2ml
64219 Anti-GLUT2/FITC 熒光素標記葡萄糖轉運蛋白2抗體IgG 0.2ml
64220 Anti-GLUT3/FITC 熒光素標記葡萄糖轉運蛋白3抗體IgG 0.2ml
64221 Anti-GLUT4/FITC 熒光素標記葡萄糖轉運蛋白4抗體IgG 0.2ml
64222 Anti-GLUT12/slc2a12/FITC 熒光素標記葡萄糖轉運蛋白12抗體IgG 0.2ml
64223 Anti-Glycoprotein /FITC 熒光素標記風疹病毒糖蛋白抗體IgG 0.2ml
64224 Anti-glypican 1/FITC 熒光素標記磷脂酰基醇蛋白聚糖-1抗體IgG 0.2ml
64225 Anti-Glypican 4/FITC 熒光素標記磷脂酰基醇蛋白聚糖-4抗體IgG 0.2ml
64226 Anti-GlyR Alpha1/FITC 熒光素標記*受體alpha1型抗體IgG 0.2ml
64227 Anti-MMP24(MT5-MMP)/FITC 熒光素標記基質金屬蛋白酶-24抗體IgG 0.2ml
64228 Anti-GM-CSF/FITC 熒光素標記粒細胞-巨噬細胞克隆刺激因子抗體IgG 0.2ml
64229 Anti-GM-CSFR Alpha/FITC 熒光素標記粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體α抗體IgG 0.2ml
64230 Anti-GNLY/NKG5/FITC 熒光素標記顆粒溶素抗體IgG 0.2ml
64231 Anti-GNRHR/FITC 熒光素標記*釋放激素受體抗體IgG 0.2ml
64232 Anti-GP65/SDFR1/FITC 熒光素標記間質細胞衍化因子受體1抗體IgG 0.2ml
64233 Anti-GPA/GYPA/CD235a/FITC 熒光素標記血型糖蛋白A(涎糖蛋白)抗體IgG 0.2ml
64234 Anti-GPA33/FITC 熒光素標記糖蛋白A33(跨膜)抗體IgG 0.2ml
64235 Anti-GPC3/FITC 熒光素標記磷脂酰基醇蛋白聚糖-3抗體IgG 0.2ml
64236 Anti-GPR14/FITC 熒光素標記G蛋白偶聯受體14抗體IgG 0.2ml
64237 Anti-GPR30/FITC 熒光素標記G蛋白偶聯受體30抗體IgG 0.2ml
64238 Anti-G Protein/FITC 熒光素標記G蛋白/鳥苷酸結合蛋白抗體IgG 0.2ml
64239 Anti-GRP78/FITC 熒光素標記G蛋白偶聯受體78抗體IgG 0.2ml
64240 Anti-GR /FITC 熒光素標記糖皮質激素受體抗體IgG 0.2ml
64241 Anti-GPNMB/Osteoactivin/FITC 熒光素標記GPNMB抗體IgG 0.2ml
64242 Anti-Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化糖皮質激素受體抗體IgG 0.2ml
64243 Anti-GRB2/ASH /FITC 熒光素標記生長因子受體結合蛋白2抗體IgG 0.2ml
64244 Anti-GPR109A/HM74A/FITC 熒光素標記G蛋白偶聯受體109A抗體IgG 0.2ml
64245 Anti-GRB10/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠生長因子受體結合蛋白10抗體IgG 0.2ml
64246 Anti-Phospho-GRB10 (Tyr67) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化生長因子受體結合蛋白10抗體IgG 0.2ml
64247 Anti-GrB(Granzyme B)(AA 18-29)/FITC 熒光素標記顆粒酶B抗體IgG 0.2ml
64248 Anti-gremlin/FITC 熒光素標記骨形態形成蛋白拮抗蛋白抗體IgG 0.2ml
64249 Anti-GRGDS/FITC 人性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒 熒光素標記抗粘附多肽抗體IgG 0.2ml
64250 Anti-GRO Alpha/FITC 熒光素標記兔抗生長調節致癌基因α抗體IgG 0.2ml
64251 Anti-GRK1/FITC 熒光素標記G蛋白偶合受體激酶1抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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