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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
64420 Anti-Phospho-HSL (Ser660)/FITC 熒光素標記磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體IgG 0.2ml
64421 Anti-HSP-20/FITC 熒光素標記熱休克蛋白-20抗體IgG 0.2ml
64422 Anti-HSP22/FITC 熒光素標記熱休克蛋白-22抗體IgG 0.2ml
64423 Anti-HSP-27/FITC 熒光素標記HSP-27蛋白抗體IgG 0.2ml
64424 Anti-HSP-47/FITC 熒光素標記熱休克蛋白-47蛋白抗體IgG 0.2ml
64425 Anti-HSP-60/FITC 熒光素標記熱休克蛋白-60蛋白抗體IgG 0.2ml
64426 Anti-HSP-70/FITC 熒光素標記HSP-70蛋白抗體IgG 0.2ml
64427 Anti-HSP75/TRAP-1 /FITC 熒光素標記熱休克蛋白-75抗體IgG 0.2ml
64428 Anti-OMPC/OMPA/FITC 熒光素標記抗大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體IgG 0.2ml
64429 Anti-HSP-90 Alpha/FITC 熒光素標記HSP-90α蛋白抗體IgG 0.2ml
64430 Anti-HSP-90 Alpha/FITC 熒光素標記熱休克蛋白90α抗體IgG 0.2ml
64431 Anti-HSP-90 Beta/FITC 熒光素標記HSP-90β蛋白抗體IgG 0.2ml
64432 Anti-HSP27/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記熱休克蛋白-27抗體IgG 0.2ml
64433 Anti-HSP-105/FITC 熒光素標記熱休克蛋白HSP105抗體IgG 0.2ml
64434 Anti-HSTF2/HSF2 /FITC 熒光素標記熱休克轉錄因子2抗體IgG 0.2ml
64435 Anti-HtrA2/Omi/FITC 熒光素標記*蛋白酶/線粒體*蛋白酶抗體IgG 0.2ml
64436 Anti-TRT/FITC 熒光素標記端粒酶抗體IgG 0.2ml
64437 Anti-TRT/TERT/PE 熒光素PE標記端粒酶抗體IgG 0.2ml
64438 Anti-COX10/FITC 熒光素標記COX10抗體IgG 0.2ml
64439 Anti-IAA/FITC 熒光素標記吲哚-3-乙酸抗體/植物生長素抗體IgG 0.2ml
64440 Anti-IAA/FITC 熒光素標記吲哚-3-乙酸抗體/植物生長素單克隆抗體IgG 0.2ml
64441 Anti-IASPP/FITC 熒光素標IASPP蛋白抗體IgG 0.2ml
64442 Anti-Iba-1/FITC 熒光素標記離子鈣接頭蛋白抗體IgG 0.2ml
64443 Anti-ICAD/FITC 熒光素標記Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體IgG 0.2ml
64444 Anti-ICAM-1(CD54)/FITC 熒光素標記細胞間粘附分子-1抗體IgG 0.2ml
64445 Anti-CD54/ICAM-1/Biotin *標記細胞間粘附分子-1抗體IgG 0.2ml
64446 Anti-ICAM-3/CD50/FITC 熒光素標記細胞間粘附分子-3抗體IgG 0.2ml
64447 Anti-Icos/CD278/FITC 熒光素標記誘導協同刺激分子CD278抗體IgG 0.2ml
64448 Anti-ICOS-L/B7-H2/CD275/FITC 熒光素標記誘導協同刺激分子配體CD275抗體IgG 0.2ml
64449 Anti-IDE/FITC 熒光素標記胰島素降解酶抗體IgG 0.2ml
64450 Anti-ID1/Inhibitor of DNA binding 1 /FITC 熒光素標記DNA結合抑制因子1抗體IgG 0.2ml
64451 Anti-IDE/FITC 熒光素標記胰島素降解酶抗體IgG 0.2ml
64452 Anti-IFABP/FITC 熒光素標記小腸型脂肪酸結合蛋白抗體IgG 0.2ml
64453 Anti-IFABP/FITC 熒光素標記小腸型脂肪酸結合蛋白抗體IgG 0.2ml
64454 Anti-IFI16/p16 /FITC 熒光素標記γ干擾素誘導蛋白16抗體IgG 0.2ml
64455 Anti-IFITM1/FITC 熒光素標記干擾素誘導跨膜蛋白1抗體IgG 0.2ml
64456 Anti-human IFN- Alpha /FITC 熒光素標記干擾素-α抗體(抗人)IgG 0.2ml
64457 Anti-IFN- Beta/FITC 熒光素標記干擾素-β抗體IgG 0.2ml
64458 Anti-IFN- Beta/FITC 熒光素標記抗人干擾素-β抗IgG 0.2ml
64459 Anti-IFN- Gamma/FITC 熒光素標記干擾素-γ抗體IgG 0.2ml
64460 Anti-IFN- Gamma/FITC(Interferon Gamma) 熒光素標記抗大、小鼠IFN-γ抗IgG 0.2ml
64461 Anti-IFNGR2/FITC 熒光素標記干擾素-gamma受體2抗體IgG 0.2ml
64462 Anti-IFN- Gamma/HRP 辣根過氧化物酶標記鼠抗人干擾素-γ/IFN-gamma單克隆抗體IgG 0.2ml
64463 Anti-IFNGR1/CD119/FITC 熒光素標記干擾素-gamma受體抗體IgG 0.2ml
64464 Anti-IGC/FITC 熒光素標記兔抗非洲爪蟾IGC抗體IgG 0.2ml
64465 Anti-IGF-I/FITC 熒光素標記標記胰島素樣生長因子-I抗體IgG 0.2ml
64466 Anti-IGF-II/FITC 熒光素標記胰島素樣生長因子-II抗體IgG 0.2ml
64467 Anti-IGF-IIBP3/FITC 熒光素標記胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗體IgG 0.2ml
64468 Anti-IGF-1 R/FITC 熒光素標記胰島素樣生長因子-I受體抗體IgG 0.2ml
64469 Anti-IGF-1R/FITC 熒光素標記胰島素樣生長因子-I受體抗體IgG 0.2ml
64470 Anti-phospho-IGF1 Receptor人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒 (Tyr1161) /FITC 熒光素標記磷酸化胰島素樣生長因子1受體抗體IgG 0.2ml
64471 Anti-IGFBP-1/FITC 熒光素標記胰島素樣生長因子結合蛋白-1抗體IgG 0.2ml
64472 Anti-IGFBP-2/FITC 熒光素標記胰島素樣生長因子結合蛋白-2抗體IgG 0.2ml
64473 Anti-IGFBP-3/FITC 熒光素標記胰島素樣生長因子結合蛋白-3抗體IgG 0.2ml
64474 Anti-IGFBP-4/IBP4/FITC 熒光素標記胰島素樣生長因子結合蛋白-4抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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