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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
64532 Anti-IL-13/FITC 熒光素標記白介素13抗體IgG 0.2ml
64533 Anti-IL-13Ra1/FITC 熒光素標記白細胞介素-13受體a1抗體IgG 0.2ml
64534 Anti-IL-13Ra2/FITC 熒光素標記白細胞介素-13受體a2抗體IgG 0.2ml
64535 Anti-IL-14/Taxilin alpha/FITC 熒光素標記抗白介素14抗體IgG 0.2ml
64536 Anti-IL-15/FITC 熒光素標記白介素15抗體IgG 0.2ml
64537 Anti-IL-15R Alpha/FITC 熒光素標記白介素15受體α抗體IgG 0.2ml
64538 Anti-IL-16/FITC 熒光素標記白細胞介素-16抗體IgG 0.2ml
64539 Anti-IL-16/FITC 熒光素標記白介素16抗體IgG 0.2ml
64540 Anti-IL-17/FITC 熒光素FITC標記白介素-17抗體IgG 0.2ml
64541 Anti-IL-17B/FITC 熒光素標記白介素-17B抗體IgG 0.2ml
64542 Anti-IL-17/PE 熒光素PE標記白介素-17抗體IgG 0.2ml
64543 Anti-IL-17R/IL-17RA/CD217/FITC 熒光素標記白介素17受體抗體IgG 0.2ml
64544 Anti-IL-17(Interleukin-17)human/FITC 熒光素標記白介素-17抗體(人)IgG 0.2ml
64545 Anti-IL-17RC/IL-17RL/FITC 熒光素標記白介素17受體C抗體IgG 0.2ml
64546 Anti-IL-17RD/FITC 熒光素標記白介素17受體D抗體IgG 0.2ml
64547 Anti-IL-17RB/FITC 熒光素標記白介素-17B受體抗體IgG 0.2ml
64548 Anti-IL-17C/FITC 熒光素標記白介素-17C抗體IgG 0.2ml
64549 Anti-IL-17D/IL-27/FITC 熒光素標記白介素-17D抗體IgG 0.2ml
64550 Anti-IL-27R/TCCR/FITC 熒光素標記白細胞介素27受體抗體IgG 0.2ml
64551 Anti-IL-17E/IL-25/FITC 熒光素標記白介素-17E抗體IgG 0.2ml
64552 Anti-IL-17F/IL-24/FITC 熒光素標記白介素-17F抗體IgG 0.2ml
64553 Anti-IL-18R Alpha/FITC 熒光素標記白細胞介素-18受體α鏈抗體IgG 0.2ml
64554 Anti-IL-18R Beta/IL1R7/CD218b/FITC 熒光素標記白細胞介素-18受體β鏈抗體IgG 0.2ml
64555 Anti-IL-19/NG.1/FITC 熒光素標記白細胞介素-19抗體IgG 0.2ml
64556 Anti-IL-20R Alpha/IL20RA/FITC 熒光素標記白介素20受體α鏈抗體IgG 0.2ml
64557 Anti-IL-20RB/IL-20R2/FITC 熒光素標記白介素20受體β鏈抗體IgG 0.2ml
64558 Anti-IL-20/FITC 熒光素標記白細胞介素-20抗體IgG 0.2ml
64559 Anti-IL-21/FITC 熒光素標記白介素21抗體IgG 0.2ml
64560 Anti-IL-21R/FITC 熒光素標記白介素21受體抗體IgG 0.2ml
64561 Anti-IL-22/ZCYTO18/FITC 熒光素標記白介素-22抗體IgG 0.2ml
64562 Anti-IL-22R/IL22RA1/FITC 熒光素標記白介素-22受體抗體IgG 0.2ml
64563 Anti-IL-22BP/IL22RA2/FITC 熒光素標記白介素22受體結合蛋白抗體IgG 0.2ml
64564 Anti-IL-23/FITC 熒光素標記白介素-23抗體IgG 0.2ml
64565 Anti-IL-23R/FITC 熒光素標記抗白介素-23受體抗體IgG 0.2ml
64566 Anti-IL-26/AK155/FITC 熒光素標記白介素26抗體IgG 0.2ml
64567 Anti-IL-28A/IFNL2/FITC 熒光素標記白細胞介素28A抗體IgG 0.2ml
64568 Anti-IL-28B/IL-28C/FITC 熒光素標記白細胞介素28B抗體IgG 0.2ml
64569 Anti-IL-29/IFNL1/FITC 熒光素標記白細胞介素29抗體IgG 0.2ml
64570 Anti-IL-31/FITC 熒光素標記白細胞介素31抗體IgG 0.2ml
64571 Anti-IL-31RA/CRL3/FITC 熒光素標記白介素31受體a抗體IgG 0.2ml
64572 Anti-IL-32/NK4/FITC 熒光素標記白介素32抗體IgG 0.2ml
64573 Anti-IL-33/NFHEV/FITC 熒光素標記白介素33抗體IgG 0.2ml
64574 Anti-IL-33/FITC 熒光素標記白介素33抗體IgG 0.2ml
64575 Anti-ILK-1/FITC 熒光素標記整合素連接激酶-1抗體IgG 0.2ml
64576 Anti-ILT2/CD85j/FITC 熒光素標記細胞表面免疫球蛋白樣轉錄因子2抗體IgG 0.2ml
64577 Anti-ILTV/FITC 熒光素標記抗雞傳染性喉氣管炎病毒抗體IgG 0.2ml
64578 Anti-IMP3/FITC 熒光素標記胰島素樣生長因子ⅡmRNA結合蛋白3抗體IgG 0.2ml
64579 Anti-ING1/p33/FITC 熒光素標記生長抑制因子基因1抗體IgG 0.2ml
64580 Anti-Inhibin Alpha/FITC 熒光素標記抑制素α抗體IgG 0.2ml
64581 Anti-Inhibin BetaA/FITC 熒光素標記抑制素βA抗體IgG 0.2ml
64582 Anti-Inhibin Beta B /FITC 熒光素標記抑制素βB抗體IgG 0.2ml
64583 Anti-Inhibin Beta C /FITC 熒光素標記抑制素βC抗體IgG 0.2ml
64584 Anti-Inhibin Alpha/Biotin 人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 *化抑制素α抗體IgG 0.2ml
64585 Anti-Insulin/FITC 熒光素標記標記胰島素抗體IgG 0.2ml
64586 Anti-Insulin/FITC 熒光素標記胰島素抗體IgG 0.2ml
64587 Anti-Insulin(1-51 protein)/FITC 熒光素標記胰島素1-51蛋白抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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