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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
64644 Anti-Phospho-Jak3 (Tyr980/981)/FITC 熒光素標記磷酸化蛋白*激酶JAK-3抗體IgG 0.2ml
64645 Anti-JNK1/3 /FITC 熒光素標記c-Jun氨基末端激酶1/3抗體IgG 0.2ml
64646 Anti-Jun B/FITC 熒光素標記活化蛋白激酶B抗體IgG 0.2ml
64647 Anti-Jun D/FITC 熒光素標記活化蛋白激酶D抗體IgG 0.2ml
64648 Anti-p-Klf5/CKLF /FITC 熒光素標記磷酸化腸道內富含的Kruppel樣因子5抗體IgG 0.2ml
64649 Anti-p-Kinesin 5B/FITC 熒光素標記磷酸化 Kinesin 5B 抗體IgG 0.2ml
64650 Anti-phospho-Syndecan 4/FITC 熒光素標記抗磷酸化多配體聚糖4抗體IgG 0.2ml
64651 Anti-KGFR/FGFR2/RBITC 紅色羅丹明標記角質形成細胞生長因子受體/成纖維細胞生長因子受體2抗體IgG 0.2ml
64652 Anti-KiSS-1R/GPR54/GPCR54/FITC 熒光素標記G蛋白偶聯受體54抗體IgG 0.2ml
64653 Anti-Ki-67/FITC 熒光素標記Ki-67 Antigen抗體IgG 0.2ml
64654 Anti-Ki-67/FITC 熒光素標記Ki-67 Antigen抗體IgG 0.2ml
64655 Anti-Kif14 protein /FITC 熒光素標記驅動蛋白家族Member14蛋白抗體IgG 0.2ml
64656 Anti-Kiss-1/FITC 熒光素標記腫瘤轉移抑制基因抗體IgG 0.2ml
64657 Anti-KIF17/FITC 熒光素標記驅動蛋白家族KIF17抗體IgG 0.2ml
64658 Anti-PFK2/PFKFB3 /FITC 熒光素標記6磷酸果糖激酶2抗體IgG 0.2ml
64659 Anti-Phospho-PFK2 (Ser466) /FITC 熒光素標記磷酸化6磷酸果糖激酶2抗體IgG 0.2ml
64660 Anti-KLF2/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠腸道內富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白2抗體IgG 0.2ml
64661 Anti-Klf4/FITC 熒光素標記腸道內富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白K抗體IgG 0.2ml
64662 Anti-KLF5/FITC 熒光素標記腸道內富含的Kruppel樣因子5抗體IgG 0.2ml
64663 Anti-KLF6/FITC 熒光素標記轉染抑癌基因KLF6抗體IgG 0.2ml
64664 Anti-KLF8/FITC 熒光素標記KLF樣轉錄因子8抗體IgG 0.2ml
64665 Anti-KLF9/FITC 熒光素標記轉錄因子KLF9抗體IgG 0.2ml
64666 Anti-KLF13/RFLAT-1 /FITC 熒光素標記腸道內富含的Kruppel樣因子13抗體IgG 0.2ml
64667 Anti-KLK1/FITC 熒光素標記*1抗體IgG 0.2ml
64668 Anti-KLK3/FITC 熒光素標記*3/*3抗體IgG 0.2ml
64669 Anti-KLK4/FITC 熒光素標記*4抗體IgG 0.2ml
64670 Anti-KLK7/FITC 熒光素標記*7抗體IgG 0.2ml
64671 Anti-KLK9/FITC 熒光素標記*9抗體IgG 0.2ml
64672 Anti-KLK10/FITC 熒光素標記*10抗體IgG 0.2ml
64673 Anti-KLK14/FITC 熒光素標記*14抗體IgG 0.2ml
64674 Anti-KLRF1/NKp80/FITC 熒光素標記細胞毒性受體NK-p80抗體IgG 0.2ml
64675 Anti-K-ras/FITC 熒光素標記原癌基因K-ras抗體IgG 0.2ml
64676 Anti-KT3 tag/FITC 熒光素標記KT3 tag標簽抗體IgG 0.2ml
64677 Anti-KT3 tag/HRP 辣根過氧化物酶標記KT3 tag標簽抗體IgG 0.2ml
64678 Anti-KCNA5/FITC 熒光素標記鉀通道混合相關蛋白亞型5抗體IgG 0.2ml
64679 Anti-Ku-70/FITC 熒光素標記DNA修復酶Ku70抗體IgG 0.2ml
64680 Anti-Ku-80/FITC 熒光素標記DNA修復酶Ku-80抗體IgG 0.2ml
64681 Anti-KCNA7/FITC 熒光素標記鉀電壓閥門通道混合器相關亞家族成員7抗體IgG 0.2ml
64682 Anti-κOR/FITC 熒光素標記kappa型阿片受體抗體IgG 0.2ml
64683 Anti-Kv1.3/FITC 熒光素標記離子通道蛋白Kv1.3抗體IgG 0.2ml
64684 Anti-Kv3.3/Kcnc3/FITC 熒光素標記離子通道蛋白Kv3.3抗體IgG 0.2ml
64685 Anti-KSR1/FITC 熒光素標記Ras信號轉導KSR1蛋白抗體IgG 0.2ml
64686 Anti-Phospho-KSR1 (Ser392) /FITC 熒光素標記磷酸化Ras信號轉導KSR1蛋白抗體IgG 0.2ml
64687 Anti-KCNC4/KV3.4/FITC 熒光素標記離子通道蛋白Kv3.4抗體IgG 0.2ml
64688 Anti-Lectin/FITC 熒光素標記抗凝集素抗體IgG 0.2ml
64689 Anti-LEF-1/FITC 熒光素標記淋巴增強因子-1抗體IgG 0.2ml
64690 Anti-L-enk/FITC 熒光素標記抗*腦啡肽抗體IgG 0.2ml
64691 Anti- Beta-lactoglobulin/FITC 熒光素標記牛β-乳球蛋白抗體IgG 0.2ml
64692 Anti- Beta-lactoglobulin/FITC 熒光素標記牛β-乳球蛋白抗體IgG 0.2ml
64693 Anti- Beta-lactoglobulin/FITC 熒光素標記牛β-乳球蛋白抗體IgG 0.2ml
64694 Anti-Laminin alpha5/FITC 人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒 熒光素標記層粘蛋白α5抗體IgG 0.2ml
64695 Anti-LAG-3/CD223/FITC 熒光素標記淋巴細胞活化基因-3抗體IgG 0.2ml
64696 Anti-lamin A/FITC 熒光素標記核纖層蛋白A抗體IgG 0.2ml
64697 Anti-Laminin Beta1/FITC 熒光素標記層粘連蛋白β1抗體IgG 0.2ml
64698 Anti-lamin B/FITC 熒光素標記核纖層蛋白B抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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