人雌激素誘導蛋白PS2 ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人雌激素誘導蛋白PS2 ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發，提高試驗質量。

65320 Anti-phospho-CaMK2a (pThr286)/FITC  熒光素標記抗磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體IgG  0.2ml
65321 Anti-phospho-CaMK2a(pTyr231) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠等磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體IgG  0.2ml
65322 Anti-phospho-ATF2(pSer490/pSer498)/FITC  熒光素標記抗磷酸化活化復制因子2抗體IgG  0.2ml
65323 Anti-phospho APP(pThr668)/FITC  熒光素標記抗磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體IgG  0.2ml
65324 Anti-phospho-P53(pSer392)/FITC  熒光素標記抗磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體IgG  0.2ml
65325 Anti-phosphor-PAK1+PAK2+PAK3 (pSer141)/FITC  熒光素標記抗磷酸化p21激活激酶1/2/3抗體IgG  0.2ml
65326 Anti-phospho-PAK1/2/3(pThr423)/FITC  熒光素標記抗磷酸化p21激活激酶1/2/3抗體IgG  0.2ml
65327 Anti-phospho-PAK1(pSer144)/FITC  熒光素標記抗磷酸化p21激活激酶1抗體IgG  0.2ml
65328 Anti-phospho-PAK2(pSer141)/FITC  熒光素標記抗磷酸化p21激活激酶2抗體IgG  0.2ml
65329 Anti-JNK1/2/3/FITC  熒光素標記抗氨基末端激酶1/2/3抗體 IgG  0.2ml
65330 Anti-phospho-PAK3(pSer139)/FITC  熒光素標記抗磷酸化p21激活激酶3抗體IgG  0.2ml
65331 Anti-Stanniocalcin 1/FITC  熒光素標記斯鈣素抗體IgG  0.2ml
65332 Anti-PAK1/FITC  熒光素標記p21激活激酶1抗體IgG  0.2ml
65333 Anti-Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) /FITC  熒光素標記磷酸化p21激活激酶1/2抗體IgG  0.2ml
65334 Anti-Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) /FITC  熒光素標記磷酸化p21激活激酶1/2抗體IgG  0.2ml
65335 Anti-PAK2 /FITC  熒光素標記p21激活激酶2抗體IgG  0.2ml
65336 Anti-Phospho-PAK2 (Ser20) /FITC  熒光素標記磷酸化p21激活激酶2抗體IgG  0.2ml
65337 Anti-PAK4/FITC  熒光素標記p21激活激酶4抗體IgG  0.2ml
65338 Phospho-PAK4 (Ser474)/PAK5 (Ser602)/PAK6 (Ser560) /FITC  熒光素標記磷酸化p21激活激酶4、5、6抗體IgG  0.2ml
65339 Anti-PAK7/PAK5/MBT/FITC  熒光素標記抗激活激酶PAK7/PAK5抗體IgG  0.2ml
65340 Anti--phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) /FITC  熒光素標記抗磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體IgG  0.2ml
65341 Anti-Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424) /FITC  熒光素標記磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體IgG  0.2ml
65342 Anti-phospho-P70 S6 Kinase beta (Ser371)/FITC  熒光素標記磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體IgG  0.2ml
65343 Anti-phospho-STAT1(pThr701)/FITC  熒光素標記抗磷酸化信號轉導與轉錄激活因子1抗體IgG  0.2ml
65344 Anti-phospho-STAT3(pThr705)/FITC  熒光素標記抗磷酸化信號轉導和轉錄激活因子3抗體IgG  0.2ml
65345 Anti-JNK2/FITC  熒光素標記氨基末端激酶2抗體IgG  0.2ml
65346 Anti-phospho-STAT5a(pThr694)/FITC  熒光素標記抗磷酸化信號轉導和轉錄激活因子5a抗體IgG  0.2ml
65347 Anti-JNK3/MAPK10/FITC  熒光素標記氨基末端激酶3抗體IgG  0.2ml
65348 Anti-phospho-STAT6(pThr641)/FITC  熒光素標記抗磷酸化信號轉導和轉錄激活因子6抗體IgG  0.2ml
65349 Anti-phospho-Src(pTyr529)/FITC  熒光素標記抗磷酸化Src原癌基因抗體IgG  0.2ml
65350 Anti-phospho c-Raf/RAF1(pSer338/pTyr340)/FITC  熒光素標記抗磷酸化原癌基因c-raf抗體IgG  0.2ml
65351 Anti-phospho-c-Raf (Ser289) /FITC  熒光素標記磷酸化原癌基因c-Raf抗體IgG  0.2ml
65352 Anti-phospho-c-Raf (Ser259)/FITC  熒光素標記磷酸化原癌基因c-Raf抗體IgG  0.2ml
65353 Anti-phospho-c-Raf (Ser296) /FITC  熒光素標記磷酸化原癌基因c-Raf抗體IgG  0.2ml
65354 Anti-phospho-c-Raf (Ser338) /FITC  熒光素標記磷酸化原癌基因c-Raf抗體IgG  0.2ml
65355 Anti-phospho C-Myc(pThr58/pSer62)/FITC  熒光素標記抗磷酸化致癌基因C-Myc抗體IgG  0.2ml
65356 Anti-phospho C-Met/pHGFR(pTyr1365)/FITC  熒光素標記抗磷酸化原癌基因c-Met抗體IgG  0.2ml
65357 Anti-phospho-c-Jun/AP-1(pThr91/pThr93)/FITC  熒光素標記抗磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgG  0.2ml
65358 Anti-phospho-c-Jun (Ser243) /FITC  熒光素標記磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgG  0.2ml
65359 Anti-phospho-c-Jun (Thr93) /FITC   熒光素標記磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgG  0.2ml
65360 Anti-phospho-c-Jun (Ser63) /FITC   熒光素標記磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgG  0.2ml
65361 Anti-phospho-MEK1/MAPKK1(pSer298)/FITC  熒光素標記抗磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體IgG  0.2ml
65362 Anti-phospho Histone H1,4(pSer27)/FITC  熒光素標記抗磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體IgG  0.2ml
65363 Anti-phospho c-kit/SCFR/CD117(pTyr936)FITC  熒光素標記抗磷酸化原癌基因c-kit抗體IgG  0.2ml
65364 Anti-Phospho-c-Kit (Tyr703) /FITC  熒光素標記磷酸化原癌基因c-kit抗體IgG  0.2ml
65365 Anti-Phospho-c-Kit (Tyr719) /FITC  熒光素標記磷酸化原癌基因c-kit抗體IgG  0.2ml
65366 Anti-Phospho-FAK (Tyr397) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化粘著斑激酶抗體IgG  0.2ml
65367 Anti-P-HP1/FITC  熒光素標記抗異染色質蛋白1磷酸化抗體（果蠅）IgG  0.2ml
65368 Anti-P-HP1/FITC  熒光素標記抗異染色質蛋白1磷酸化抗體（果蠅）IgG  0.2ml
65369 Anti-Phospho-HP1 gamma (Ser83) /FITC  熒光素標記磷酸化染色質相關蛋白1-γ抗體IgG  0.2ml
65370 Anti-PI3K/P85 alpha/FITC  熒光素標記磷脂酰肌醇激酶抗體IgG  0.2ml
65371 Anti-PI3K p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) /FITC  熒光素標記磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體IgG  0.2ml
65372 Anti-PI3 Kinase p110 delta/FITC  熒光素標記磷脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體IgG  0.2ml
65373 Anti-PIBF/FITC  熒光素標記孕激素誘導阻斷因子抗體IgG  0.2ml
65374 Anti-PIM1/FITC  熒光素標記前病毒整合位點蛋白1抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹的工作作風檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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