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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
65542 Anti-RPS6/FITC 熒光素標記S6核糖體蛋白抗體IgG 0.2ml
65543 Anti-S-100A1/FITC 熒光素標記鈣結合蛋白S100A1抗體IgG 0.2ml
65544 Anti-S100-A8/MRP8/CFAG/FITC 熒光素標記鈣結合蛋白S100A8抗體IgG 0.2ml
65545 Anti-S100-A9/MRP14/CFAG/FITC 熒光素標記鈣結合蛋白S100A9抗體IgG 0.2ml
65546 Anti-S100A13/FITC 熒光素標記鈣結合蛋白S100A13抗體IgG 0.2ml
65547 Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236)/FITC 熒光素標記磷酸化S6核糖體蛋白抗體IgG 0.2ml
65548 Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) /FITC 熒光素標記磷酸化S6核糖體蛋白抗體IgG 0.2ml
65549 Anti-S100B/FITC 熒光素標記S100B蛋白抗體IgG 0.2ml
65550 Anti-S6PDH/FITC 熒光素標記抗6-磷酸*脫氫酶抗體IgG 0.2ml
65551 Anti-SAMDC/AMD1/FITC 熒光素標記S-腺苷蛋氨酸脫羧酶抗體IgG 0.2ml
65552 Anti-SARS S-protein/FITC 熒光素標記非典病毒表面蛋白S抗體IgG 0.2ml
65553 Anti-SARS putative orflab polyprotein/FITC 熒光素標記SARS抗體IgG 0.2ml
65554 Anti-SATB1/FITC 熒光素標記核基質結合區結合蛋白1抗體IgG 0.2ml
65555 Anti-Phospho-SATB1 (Ser47)/FITC 熒光素標記磷酸化核基質結合區結合蛋白1抗體IgG 0.2ml
65556 Anti-SCF/FITC 熒光素標記干細胞生長因子抗體IgG 0.2ml
65557 Anti-SCG3/SgIII /FITC 熒光素標記分泌粒蛋白Ⅲ抗體IgG 0.2ml
65558 Anti-SCN1A/FITC 熒光素標記電壓閥門鈉通道蛋白a1/癲癇相關蛋白抗體IgG 0.2ml
65559 Anti-SCN2A/FITC 熒光素標記電壓閥門鈉通道蛋白a2/癲癇相關蛋白抗體IgG 0.2ml
65560 Anti-SCN9A/NAV1.7/FITC 熒光素標記電壓開啟的鈉離子通道SCN9AIgG 0.2ml
65561 Anti-SCP2/NLTP/FITC 熒光素標記固醇攜帶蛋白2抗體IgG 0.2ml
65562 Anti-SCP3/FITC 熒光素標記聯會復合體蛋白3抗體IgG 0.2ml
65563 Anti-Secretin/FITC 熒光素標記分泌素抗體IgG 0.2ml
65564 Anti-Secretin receptor/FITC 熒光素標記分泌素受體抗體IgG 0.2ml
65565 Anti-SEL1L/FITC 熒光素標記SEL1L抗體IgG 0.2ml
65566 Anti-Selenoprotein W/FITC 熒光素標記硒蛋白W抗體IgG 0.2ml
65567 Anti-Sema3A/FITC 熒光素標記臂板蛋白3A抗體IgG 0.2ml
65568 Anti-Sema3F/FITC 熒光素標記臂板蛋白3F抗體IgG 0.2ml
65569 Anti-Sema4C/FITC 熒光素標記臂板蛋白4C抗體IgG 0.2ml
65570 Anti-Sema6A/FITC 熒光素標記抗Sema6A抗體IgG 0.2ml
65571 Anti-Sema7A/CD108/FITC 熒光素標記軸突生長因子CD108抗體IgG 0.2ml
65572 Anti-sFRP/FITC 熒光素標記抗子宮內膜抗體IgG 0.2ml
65573 Anti-SFRP1/FITC 熒光素標記分泌型卷曲相關蛋白1抗體IgG 0.2ml
65574 Anti-SGC/FITC 熒光素標記可溶性糖蛋白C抗體IgG 0.2ml
65575 Anti-SGLT1 /FITC 熒光素標記鈉-葡萄糖共轉運載體1抗體IgG 0.2ml
65576 Anti-SGK1/FITC 熒光素標記糖皮質激素調節激酶1抗體IgG 0.2ml
65577 Anti-Phospho-SGK1 (Ser78)/FITC 熒光素標記磷酸化糖皮質激素調節激酶1抗體IgG 0.2ml
65578 Anti-Phospho-SGK1 (Ser422) /FITC 熒光素標記磷酸化糖皮質激素調節激酶1抗體IgG 0.2ml
65579 Anti-Phospho-SGK1 (Thr256)/FITC 熒光素標記磷酸化糖皮質激素調節激酶1抗體IgG 0.2ml
65580 Anti-Shadow/SPRN/FITC 熒光素標記新朊蛋白/朊蛋白相關蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗體IgG 0.2ml
65581 Anti-Shank1/FITC 熒光素標記shank-1抗體IgG 0.2ml
65582 Anti-SHBG /FITC 熒光素標記性激素結合球蛋白抗體IgG 0.2ml
65583 Anti-Shh/FITC 熒光素標記Shh信號轉導通路膜蛋白受體抗體IgG 0.2ml
65584 Shiga-like toxin IIe variant subunit A/FITC 熒光素標記抗豬水腫病大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌株)抗體IgG 0.2ml
65585 Anti-SHC/FITC 熒光素標記SH2結構域轉化蛋白1抗體IgG 0.2ml
65586 Anti-phospho-SHC (Tyr239/240)/FITC 熒光素標記磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體IgG 0.2ml
65587 Anti-phospho-SHC (Ser36) /FITC 熒光素標記磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體IgG 0.2ml
65588 Anti-phospho-SHC (Tyr349) /FITC 熒光素標記磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體IgG 0.2ml
65589 Anti-phospho-SHC (Tyr427) /FITC 熒光素標記磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體IgG 0.2ml
65590 Anti-phospho-SHC (Tyr317)/FITC 熒光素標記磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體IgG 0.2ml
65591 Anti-PILR Beta/FDFACT/FITC 熒光素標記Ⅱ型成對免疫球蛋白樣受體β蛋白抗體IgG 0.2ml
65592 Anti-RECK/FITC 熒光素標記金屬蛋白酶抑制因子RECK抗體IgG 0.2ml
65593 Anti-SHP-1/FITC 人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒 熒光素標記造血細胞磷酸酶抗體IgG 0.2ml
65594 Anti-RIP2/FITC 熒光素標記受體結合**激酶2抗體IgG 0.2ml
65595 Anti-SHIP1/FITC 熒光素標記SH2結構含磷酸肌醇SHIP1抗體IgG 0.2ml
65596 Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020) /FITC 熒光素標記磷酸化SH2結構含磷酸肌醇SHIP1抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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