人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

65598 Anti-Phospho-SHIP2 (Tyr580)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白*磷酸酶2抗體IgG  0.2ml
65599 Anti-Phospho-SHIP2 (Tyr1135)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白*磷酸酶2抗體IgG  0.2ml
65600 Anti-Phospho-SHIP2 (Ser576) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白*磷酸酶2抗體IgG  0.2ml
65601 Anti-Phospho-SHIP2 (Tyr542)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白*磷酸酶2抗體IgG  0.2ml
65602 Anti-Phospho-SHIP2 (Tyr986/987) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白*磷酸酶2抗體IgG  0.2ml
65603 Anti-Phospho-RIP2 (Ser176) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化受體結(jié)合**激酶2抗體IgG  0.2ml
65604 Anti-Shrimp tropomyosin /FITC  熒光素標(biāo)記南美白對蝦過敏原蛋白（蝦原肌球蛋白）抗體IgG  0.2ml
65605 Anti-SIP1 /FITC  熒光素標(biāo)記運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體IgG  0.2ml
65606 Anti-SIRT1/FITC  熒光素標(biāo)記沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體IgG  0.2ml
65607 Anti-Phospho-SirT1 (Ser47) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體IgG  0.2ml
65608 Anti-Phospho-SirT1 (Ser27)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體IgG  0.2ml
65609 Anti-Skp2/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白抗體IgG  0.2ml
65610 Anti-SLC4A4/FITC  熒光素標(biāo)記*協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4抗體IgG  0.2ml
65611 Anti-Slc4a7/Nbcn1 /FITC  熒光素標(biāo)記*協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗體IgG  0.2ml
65612 Anti-SLC6A19 /FITC  熒光素標(biāo)記鉀依賴鈉鈣交換蛋白6IgG  0.2ml
65613 Anti-SLC16A3/MCT-4/FITC  熒光素標(biāo)記MCT4抗體IgG  0.2ml
65614 Anti-Slc22A17/FITC  熒光素標(biāo)記可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白22A17抗體IgG  0.2ml
65615 Anti-SLC24A5/FITC  熒光素標(biāo)記可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5抗體IgG  0.2ml
65616 Anti-SLC33A1/FITC  熒光素標(biāo)記乙酰*轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體IgG  0.2ml
65617 Anti-SLC34A2/NaPi-2b/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體IgG  0.2ml
65618 Anti-Slc26a5/Prestin/FITC  熒光素標(biāo)記外毛細(xì)胞運(yùn)動(dòng)蛋白/可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Slc26a5抗體IgG  0.2ml
65619 Anti-SLC39A6/FITC  熒光素標(biāo)記SLC39A6抗體IgG  0.2ml
65620 Anti-SLC40A1/FPN1/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC40A1抗體IgG  0.2ml
65621 Anti-SLK/Fyn/FITC  熒光素標(biāo)記*蛋白激酶Fyn（同步原癌基因）抗體IgG  0.2ml
65622 Anti-Slit2/Slil3/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體IgG  0.2ml
65623 Anti-SLT/SLT-IIe(O139) /FITC  熒光素標(biāo)記抗豬水腫素（O139）抗體IgG  0.2ml
65624 Anti-Slug/FITC  熒光素標(biāo)記鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體IgG  0.2ml
65625 Anti-Smac/DIABLO/FITC  熒光素標(biāo)記線粒體促凋亡蛋白抗體IgG  0.2ml
65626 Anti-phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化SMAD抗體IgG  0.2ml
65627 Anti-Smad 1/FITC  熒光素標(biāo)記Smad 1抗體IgG  0.2ml
65628 Anti-Phospho-Smad1 (Ser206) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體IgG  0.2ml
65629 Anti-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體IgG  0.2ml
65630 Anti-Smad2/3 /FITC  熒光素標(biāo)記Smad 2/3抗體IgG  0.2ml
65631 Anti-phospho-Smad2(p-Ser465) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、牛，馬，犬，雞磷酸化Smad2抗體IgG  0.2ml
65632 Anti-Phospho-Smad2 (Ser465/467)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體IgG  0.2ml
65633 Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體IgG  0.2ml
65634 Anti-Phospho-Smad3 (Ser423/425) /FITC   熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體IgG  0.2ml
65635 Anti-Smad4/FITC  熒光素標(biāo)記Smad4抗體IgG  0.2ml
65636 Anti-Smad7/FITC  熒光素標(biāo)記Smad 7抗體IgG  0.2ml
65637 Anti-SMC1/FITC  熒光素標(biāo)記染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體IgG  0.2ml
65638 Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體IgG  0.2ml
65639 Anti-Phospho-SMC1 (Ser957)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體IgG  0.2ml
65640 Anti-SMN1/FITC  熒光素標(biāo)記運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1抗體IgG  0.2ml
65641 Anti-Snail/FITC  熒光素標(biāo)記抗Snail蛋白抗體IgG  0.2ml
65642 Anti-Snake poison Protein/FITC  熒光素標(biāo)記抗蛇毒蛋白抗體（蝮蛇）IgG  0.2ml
65643 Anti-Snake poison Protein/FITC  熒光素標(biāo)記抗蛇毒蛋白抗體（中華眼鏡蛇）IgG  0.2ml
65644 Anti-SNAP-25 /FITC  熒光素標(biāo)記突觸相關(guān)蛋白25抗體IgG  0.2ml
65645 Anti-Socs 1/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白1抗體IgG  0.2ml
65646 Anti-Socs 2/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白2抗體IgG  0.2ml
65647 Anti-Socs 3/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白3抗體IgG  0.2ml
65648 Anti-SOD1/FITC  熒光素標(biāo)記超氧化物歧化酶1抗體IgG  0.2ml
65649 Anti-SOD2/FITC 人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒 熒光素超氧化物歧化酶2抗體IgG  0.2ml
65650 Anti-Solute carrier family 1/FITC  熒光素標(biāo)記溶質(zhì)攜帶物家族-1抗體IgG  0.2ml
65651 Anti-Somatostatin/GRIH /FITC  熒光素標(biāo)記*抗體IgG  0.2ml
65652 Anti-GRIM19/FITC  熒光素標(biāo)記干擾素/維甲酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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